杏鲍菇废弃菌渣中D-氨基葡萄糖盐酸盐的制备工艺及生物学活性分析

本文以杏鲍菇废弃菌渣为原料,探究了D-氨基葡萄糖盐酸盐(D-glucosamine hydrochloride,GAH)的制备工艺、液相-质谱(HPLC-MS)、红外光谱、理化指标及其对斑马鱼胚胎发育的影响。采用单因素和响应面优化试验,获得盐酸水解制备GAH的最佳条件:盐酸浓度31%,水解时间4 h,水解温度82℃,液固比5 mL/g,此时GAH得率可达23.61%。液相-质谱、红外光谱和理化指标分析显示,GAH纯化样品纯度是标准品的101.9%,质谱和红外光谱图与标准品一致,各项指标均符合甚至优于美国药典43-国家处方集38(USP43-NF38)的质量标准,砷含量仅0.21μg/g。斑马鱼实验结果表明,中高浓度(0.3%~0.5%)的GAH引发的斑马鱼胚胎发育异常比例超过50%,且0.3%的GAH对转化生长因子-β信号通路具有明显的促进作用。本研究结果可为未来杏鲍菇产品产业化生产及应用提供参考。

D-氨基葡萄糖盐酸盐的抗肿瘤作用

目的 :研究D 氨基葡萄糖盐酸盐灌胃给药 (ig)对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用 ,考察该药对荷瘤小鼠的白细胞生成和体重有无抑制作用。方法 :采用抗移植性肿瘤实验方法 ,检测受试药物对荷瘤小鼠的瘤重、生命延长率、外周血白细胞总数、骨髓粒细胞与红细胞比值及体重的影响。结果 :D 氨基葡萄糖盐酸盐 2 0 ,10mg/kg连续给药 10d对小鼠移植肉瘤 180 (S1 80 )的肿瘤抑制率分别为 66 7%和 57 1% ;对肝癌腹水瘤 (Heps)小鼠的生命延长率分别为 2 0 8 2 %和 13 3 7% ;该药 2 0mg/kg对小鼠移植的艾氏腹水实体瘤 (EC)瘤重有显著抑制 (P <0 0 5)作用 ,10mg/kg也有一定的抑制作用 ,但与对照组比较无显著差异。高、低剂量对该模型小鼠外周血白细胞、骨髓粒细胞与红细胞比值无明显抑制作用。该药对荷瘤小鼠体重无明显影响。结论 :D 氨基葡萄糖对小鼠移植肉瘤 180 (S1 80 )、肝癌腹水瘤 (Heps)、EC腹水实体瘤有显著的抑制作用 ,该抑瘤作用属首次发现。但该药对EC腹水实体瘤小鼠白细胞生成和荷瘤小鼠体重无明显抑制作用。

D-氨基葡萄糖盐酸盐的制备及抗氧化特性的研究

从盘锦河蟹壳制备甲壳素,后者用盐酸水解,再纯化得到D-氨基葡萄糖盐酸盐,同时研究了其对羟自由基(·OH)清除作用和对超氧(O_2^-·)自由基的抑制效果。

D-氨基葡萄糖盐酸盐的制备优化

目的优化从甲壳素酸水解制备氨基葡萄糖盐酸盐的制备工艺。方法采用正交试验L9(34),优化水解工艺条件。结果以30%HCl,温度95℃,时间3h效果最佳。纯度>99.0%。结论该优化条件能得到较高产率和纯度的盐酸氨基葡萄糖。

D-氨基葡萄糖盐酸盐体外抗肿瘤及其免疫调节作用

目的研究D-氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)体外抗肿瘤作用和免疫增强作用。方法MTT法观察体外GAH对肿瘤细胞生长和小鼠淋巴细胞增殖的影响,酶联免疫法(ELISA)观察GAH对淋巴细胞分泌细胞因子IL-2的影响。结果GAH明显抑制SGC-7901细胞的生长,对HepG-2、LS-174细胞生长的抑制作用较弱。GAH具有有丝分裂原样的作用,能够诱导淋巴细胞增殖并且分泌IL-2。结论GAH有一定的抗肿瘤作用和免疫增强作用。

D-氨基葡萄糖盐酸盐的制备研究

从龙虾壳制备的甲壳素，经盐酸水解得Ｄ－氨基葡萄糖盐酸盐，收率＞５０％，纯度＞９８．７％。水解条件考察表明，以１２ｍｏｌ／ＬＨＣｌ水解２．５～３ｈ效果最佳。

HPLC示差折光分析法测定D-氨基葡萄糖盐酸盐中的N-乙酰-D-氨基葡萄糖

利用高效液相示差折光分析法测定D-氨基葡萄糖盐酸盐中的N-乙酰-D-氨基葡萄糖.方法采用Alltech C18柱（250×4.6 mm，5μm），流动相为乙腈-醋酸盐缓冲液（3∶97），流速1 mL/min，柱温40℃，进样量20μL.N-乙酰-D-氨基葡萄糖在4.18-1 079.33μg/mL范围内呈显著的线性关系，相关系数为0.999 3.方法的加标回收率98.78%，检出限4.18μg/mL.

甲壳素超微粉碎辅助制备D-氨基葡萄糖盐酸盐

研究了甲壳素超微粉碎辅助制备D-氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)的工艺。对HCl浓度、反应时间、反应温度和液料比进行单因素考察,根据考察结果进行Box-Benhnken中心组合设计,利用响应面分析法优化工艺参数,然后进行验证实验,并将该工艺条件与传统GAH制备工艺比较。结果表明,甲壳素超微粉碎辅助制备GAH的较佳工艺为:HCl浓度8.8mol/L、液料比4.2∶1(mL∶g)、反应时间3.6h、反应温度83.0℃。此条件下GAH得率为74.82%,与理论值基本相符。与传统制备工艺相比,新工艺反应条件更加温和,同时GAH得率提高了14.77%。

滴定分析法和分光光度法测定保健食品中D-氨基葡萄糖盐酸盐含量的研究

〔目的〕建立保健食品中D-氨基葡萄糖盐酸盐测定方法。〔方法〕采用滴定分析方法和分光光度法,定量测定保健食品中的D-氨基葡萄糖盐酸盐。〔结果〕滴定分析法精密度（n=6）为94.0％±0.4％,相对标准偏差（RSD）为0.4％回收率为97.1％～99.7％。分光光度法精密度（n=6）为93.9％±1.0％,相对标准偏差（RSD）1.1％,回收率为97.4％～103.0％。对两种实验方法比对实验的结果进行t检验,t=0.243<t（0.05,18）=2.101,P>0.05,两种分析方法所得实验的结果无明显差异。〔结论〕两种方法操作简便,精密度、准确度均较高,适合于保健食品中D-氨基葡萄糖盐酸盐的测定,滴定分析法更适合D-氨基葡萄糖盐酸盐含量较高的保健食品及原料纯度进行测定。

N-乙酰氨基葡萄糖及D-氨基葡萄糖盐酸盐研究进展

随着对甲壳素及其衍生物的不断关注,现已经形成甲壳素化学这一学科,本文着重围绕甲壳素化学体系结构中的N-乙酰D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐两种物质在生物领域中的应用和研究作简要概述。

D-氨基葡萄糖盐酸盐体外对人淋巴细胞的增殖和细胞内钙浓度的影响

目的:研究D-氨基葡萄糖盐酸盐对淋巴细胞增殖作用和细胞内钙的浓度影响。方法:采用人外周血淋巴细胞为实验材料,通过MTT法,流式细胞仪法研究了D-氨基葡萄糖盐酸盐对人外周血淋巴细胞增殖和细胞周期分布的影响。同时采用荧光探针Furo-3/AM对细胞内的Ca2+进行标记,激光共聚焦扫描显微镜扫描细胞的荧光强度。结果:D-氨基葡萄糖盐酸盐能够诱导淋巴细胞增殖,促使淋巴细胞由G0/G1进入S期,并且可以使淋巴细胞内的钙离子浓度升高。结论:D-氨基葡萄糖盐酸盐能够通过Ca2+信号通路激活人外周血淋巴细胞,促使淋巴细胞增殖。

D-氨基葡萄糖盐酸盐激活Ca^(2+)信号通路诱导淋巴细胞增殖

目的研究D-氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)诱导小鼠脾淋巴细胞增殖及其机制。方法采用MTT法、荧光探针标记法、免疫荧光法观察GAH对淋巴细胞增殖、淋巴细胞内的钙离子浓度、调神经磷酸酶表达的影响。结果GAH能够诱导小鼠淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞内钙离子浓度,增强钙调神经磷酸酶的表达。结论GAH通过提高淋巴细胞内钙离子浓度,增加钙调神经磷酸酶的表达,激活淋巴细胞的Ca2+信号通路,诱导淋巴细胞增殖。

D-氨基葡萄糖盐酸盐的制备研究

以盐酸水解经醋酸溶解的壳聚糖溶液制备氨基葡萄糖盐酸盐,采用正交试验优化水解条件,研究结果表明:盐酸浓度15%、时间3 h、温度100℃为最佳反应条件,在该条件下氨基葡萄糖盐酸盐浓度可达4.6 mg/ml;温度对反应有显著影响,控制好反应温度是生产的关键;用丙酮沉淀氨基葡萄糖盐酸盐较乙醇理想,沉淀的过程还可达到脱色的目的。

用龙虾壳制取D-氨基葡萄糖盐酸盐

目的研究从龙虾壳制备甲壳质 ,解决D 氨基葡萄糖盐酸盐 (GAH)的工业生产技术问题。方法先由龙虾壳制备甲壳质 ,经盐酸水解得D 氨基葡萄糖盐酸盐。采用正交试验 ,优化水解工艺条件。结果以 1 2mol/LHCl,温度 90℃～ 95℃ ,2 .5～ 3h效果最佳。收率 >60 % ,纯度 >98%。结论此法为工业化生产提供了依据。

1,3,4,6-四-O-苄基-β-D-氨基葡萄糖盐酸盐的合成方法改进

以D-氨基葡萄糖盐酸盐为原料,制得D-氨基葡萄糖希夫碱(1);在无水DMF溶液中,1与苄溴反应得1,3,4,6-四-O-苄基-β-D-氨基葡萄糖希夫碱(2);2经酸解,甲醇/水重结晶合成了高纯度的1,3,4,6-四-O-苄基-β-D-氨基葡萄糖盐酸盐,其结构经1H NMR和IR确证。

壳寡糖与D-氨基葡萄糖盐酸盐体外对小鼠淋巴细胞和腹腔巨噬细胞作用的比较

目的：观察壳寡糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)体外对小鼠免疫细胞作用。方法：应用MTT法观察体外壳寡糖和GAH对小鼠脾淋巴细胞细胞增殖的影响,应用巨噬细胞吞噬中性红试验观察壳寡糖和GAH对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果：GAH浓度在200、100mg·L^(-1)时,能显著促进GonA诱导的小鼠脾细胞增殖,壳寡糖浓度为200、40mg·L^(-1)时,能增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。结论：结果表明壳寡糖和GHA对免疲细胞的调节作用是通过不同的途径实现的。

D-氨基葡萄糖盐酸盐的制备及工艺条件优化

目的优化从甲壳素制备D-氨基葡萄糖盐酸盐的工艺。方法采用正交试验优化水解条件。结果最佳工艺为:30%盐酸、95℃、甲壳与盐酸之比=1∶8,水解5小时。结论本法粗产品收率达60%,为工业化生产提供了依据。

正交设计优化甲壳素制备D-氨基葡萄糖盐酸盐工艺

以甲壳素为原料,通过正交试验法研究制备D-氨基葡萄糖盐酸盐工艺的最优化反应条件。即甲壳素酸水解制备D-氨基葡萄糖盐酸盐的最优条件为:27%盐酸,甲壳素与盐酸质量比为1∶7,95℃下水解5 h,此条件下D-氨基葡萄糖盐酸盐为D-氨基葡萄糖盐酸盐,优化得到的D-氨基葡萄糖盐酸盐提取工艺稳定可行,为工业生产提供了理论基础。

D-氨基葡萄糖盐酸盐对小鼠淋巴细胞增殖及相关基因表达的影响

研究D-氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)对小鼠淋巴细胞c-fos mRNA,NF-kB mRNA,p38 MAPK mRNA表达的影响,并在分子水平上进一步探讨GAH对小鼠淋巴细胞增殖的作用机制.利用RT-PCR法检测GAH作用后小鼠淋巴细胞c-fos mRNA,NF-kB mRNA,p38 MAPK mRNA表达水平的变化.结果表明,GAH作用小鼠淋巴细胞24 h后,淋巴细胞中c-fos mRNA,NF-kB mRNA,p38 MAPK mRNA表达均显著升高.说明GAH可明显促进小鼠淋巴细胞c-fos mRNA,NF-kB mRNA,p38 MAPK mRNA表达水平升高,能够促进小鼠淋巴细胞增殖.