去乙酰基7-氨基头孢烯酸制备方法的研究进展

目的:系统概述新型头孢中间体去乙酰基7-氨基头孢烯酸(D-7-ACA)的特点、应用及制备研究进展。方法:查阅现有文献总结出D-7-ACA的各种制备研究进展。结果:三酶法制备D-7-ACA,可将头孢菌素C(CPC)和3-去乙酰-头孢菌素C(D-CPC)催化转化为D-7-ACA,提高了头孢菌素C发酵组份的利用率,并且避免了使用有毒化学试剂,且酶法生产工艺具有条件温和、无污染、收率高、成本低等优点,更有利于产业化生产。

党组织、制度环境与私营企业研发投资

伴随着经济和社会的转型,中国私营企业党组织已发展成为肩负引领政治方向和推动企业转型发展双重角色的中国特色社会主义公司治理结构。非单一利益驱动和边界模糊化决定了党组织具备嵌入型团队的特征。在高质量发展背景下,重点就是与政府、企业、员工等各利益相关者展开跨界行为,实现宏观经济政策落实和微观企业技术进步的共赢。以中共中央统战部等4部门2012年对全国范围内5073家私营企业抽样调研数据为样本,实证检验了党组织对研发性投资的影响。研究发现,党组织能够显著推动研发投资的增长,在推动力度上对中低端研发投资要强于对高端研发投资。进一步研究发现,制度环境的改善可放大这种推动作用,且更多的体现在对高端研发投资的放大作用。将"跨界理论"应用于私营企业党组织实践,为完善私营企业党组织职能、夯实我党治国理政的微观基础,具有重要的理论价值和现实意义。

过氧化氢对D-氨基酸氧化酶转化头孢菌素C为戊二酰-7-氨基头孢烯酸反应的影响

在D-氨基酸氧化酶D1AAO转化头孢菌素C(CPC)为戊二酰基-7-氨基头孢烯酸(Gl-7-ACA)的反应中,所生成的过氧化氢同时与CPC和Gl-7-ACA发生的氧化副反应是造成目标产物收率损失的关键因素之一。通过联用溶氧电极和过氧化氢电极,测定了DAAO转化CPC为Gl-7-ACA的反应体系内溶氧浓度与相应的过氧化氢浓度的变化曲线,测知反应体系中过氧化氢浓度积累最高可达5mmol·L-1。模拟该反应条件下过氧化氢的氧化反应可知,在过氧化氢浓度较低时,溶液的酸性可加速该氧化反应。在中性条件下,过氧化氢浓度为5mmol·L-1时,反应1h后,CPC的氧化损失为2%,Gl-7-ACA的氧化损失为3%。通过改进氧气分布器、搅拌转速和并调控氧气流量以控制溶液中溶解氧的浓度,来适度地降低物系中过氧化氢积累浓度,使反应收率提高了2.2%。

民航维修班组可靠性分析模型研究

提高民航维修班组操作可靠性,可以有效降低维修过程中发生差错的概率。根据民航维修班组人员的行为特点,构建维修班组可靠性分析行为框架,应用CREAM模型分析事件发生序列,确定共同绩效条件(CPC),合理选择IDAC模型给出的比较全面的绩效影响因子(PIF)对CPC进行修正,并在总结利用CREAM模型和IDAC模型的基础上,提出基于人的认知可靠性适用于民航维修班组的I-D-P-A模型。通过分析维修班组操作过程发生差错机理,为维修过程中风险管理提供更客观的数据支持,以实现概率风险评价中的人误事件发生概率的量化。

大肠杆菌头孢菌素C乙酰酯酶的敲除对头孢菌素C酰化酶应用的影响

7-氨基头孢烷酸(7-ACA)是合成头孢菌素类抗生素的重要中间体,工业上通常采用头孢菌素C酰化酶一步水解头孢菌素C制备,但在该反应产物中存在一个主要杂质3-去乙酰基-7-氨基头孢烷酸(D-7-ACA),该杂质的产生是由大肠杆菌中内源基因aes编码的头孢菌素C乙酰酯酶水解头孢菌素C或7-ACA引起的。为了防止D-7-ACA的形成,获得高品质7-ACA,减少下游精制成本,采用大肠杆菌双质粒pTargetF/pCas敲除系统,设计相应的gRNA以及同源修复供体DNA,对大肠杆菌BL21(DE3)中的aes进行敲除,从而获得了Aes缺陷型菌株BL21(DE3)△aes。将携带头孢菌素C酰化酶(CPCacy)表达质粒pET30-CPCacy的重组工程菌BL21(DE3)/pET30-CPCacy和BL21(DE3)△aes/pET30-CPCacy所诱导表达的孢菌素C酰化酶细胞破碎上清液进行7-ACA的生产对比试验,结果表明,敲除菌BL21(DE3)△aes/pET30-CPCacy对头孢菌素C的转化率为98.8%而原始菌为98.5%,同时7-ACA的产率为80.7%而原始菌株为80.2%,杂质D-7-ACA的产率仅为0.1%,为原始菌的25%,这些工作为进一步生产高品质的7-ACA奠定了基础。