联合应用细胞遗传学、巢式RT-PCR和FISH技术检测慢性髓系白血病治疗过程中的肿瘤负荷

本研究探讨常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)、巢式逆转录-聚合酶链反应(nested-reverse transcriptase polyme rase chain reaction,nested-RT-PCR)及双色双融合荧光原位杂交(dual-color and dual-fusion fluo-rescence in situ hybridization,D-FISH)三种技术监测慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者造血干细胞移植治疗过程中肿瘤负荷的灵敏度和特异性。联合应用CC、巢式RT-PCR和D-FISH三种技术对7例CML患者非清髓性异基因干细胞移植治疗前后的肿瘤负荷水平进行检测。检测结果显示:7例CML患者治疗前后的40份骨髓标本中,有29份标本检出不同比率的Ph染色体;3份因细胞数少CC分析失败;36份标本RT-PCR检测结果为阳性。病例1移植后12、18、26及38个月的4份标本Ph染色体及RT-PCR结果均为阴性。病例1移植后9和10个月、病例2移植后15个月、病例3移植后12个月的4份Ph(-)bcr/abl(+)标本经FISH检测,分别检出5.4%、0%、16.5%及1.5%的bcr/abl(+)细胞。病例5移植后20和60天、病例7移植后40天的3份标本因细胞数少而CC核型分析失败,对其行FISH检测,结果bcr/abl(+)细胞检出率分别为55.0%、27.5%和73.5%。病例1移植后12个月Ph(-)bcr/abl(-)的标本行FISH检测,结果bcr/abl(+)细胞检出率为0%。结论:CC可作为监测CML患者治疗过程中肿瘤负荷水平的基本手段。在移植后早期细胞数太少而无法进行CC检测,以及治疗病人体内肿瘤负荷降低到CC不能检出而RT-PCR仍为阳性时,借助FISH准确检测体内肿瘤负荷,以监测其动态变化。FISH检测bcr/abl转阴的病人需靠灵敏度更高的RT-PCR监测核定。

基于多源异构数据融合分析技术的激光通信网络钓鱼检测

网络钓鱼对激光通信网络的应用带来较大危险,为保障激光通信网络应用安全,提出基于多源异构数据融合分析技术的激光通信网络钓鱼检测方法。首先采集激光通信网络钓鱼特征,采用D-S证据理论融合不同来源、不同结构的激光通信网络钓鱼特征数据,然后根据特下数,采用支持向量机检测设计激光通信网络钓鱼检测模型,最后进行了仿真实验,结果表明,该方法可有效提取并准确融合钓鱼特征数据,激光通信网络钓鱼检测激光通信网络钓鱼检测准确率超过95%,降低激光通信网络安全风险。

钓鱼竿技术研究与开发的热点分析

文章聚焦钓鱼竿产业专利技术,将产业发展信息与专利技术信息相结合,研究钓鱼竿专利布局情况、国内外主要研究主体等情况,并通过专利布局揭示其设计技术的发展方向。

800Hz Terfenol-D鱼唇式弯张换能器

本文研制了８００Ｈｚ Ｔｅｒｆｅｎｏｌ－Ｄ鱼唇式弯张换能器，换能器设计中采用永磁偏磁场和能有效抑制涡流损耗的闭合磁路结构，最高声源级１８５ｄＢ，－３ｄＢ带宽１８０Ｈｚ。这种鱼唇式弯张换能器克服了连续直流提供偏磁场时发热强的缺点，并且仅需要普通的功率放大器，更适于长时间连续工作，使这一新型低频大功率水声换能器趋于实用化。

亚麻油替代鱼油对鲤鱼生长性能、肝胰脏脂质代谢及抗氧化能力的影响

在一种实用饲料配方的基础上,用亚麻油分别替代0(对照组)、25%、50%、75%、100%)的鱼油配制成5种等氮等能(粗蛋白质含量为35%,总能为15 MJ/kg)的试验饲料,在室内循环养殖系统中饲喂5组鲤鱼[初重(5.81±0.23)g]8周,以研究亚麻油替代不同水平鱼油对鲤鱼生长性能、体组成、肝胰脏脂质代谢和抗氧化指标的影响。结果表明:随着亚麻油替代鱼油水平的升高,鲤鱼的特定生长率(SGR)呈现先升高后降低的趋势,以25%组最高,显著高于75%和100%组(P<0.05);而饲料系数(FCR)则表现出相反的变化趋势,以25%组最低,显著低于100%组(P<0.05)。蛋白质效率(PER)和成活率(SR)在各组间无显著差异(P>0.05)。对照组全鱼粗蛋白质含量显著高于其他组(P<0.05),而粗脂肪含量则显著低于除25%组外的其他各组(P<0.05)。亚麻油替代不同水平鱼油对全鱼干物质和粗灰分含量无显著影响(P>0.05)。随着亚麻油替代鱼油水平的升高,肝胰脏脂蛋白脂酶(LPL)活性和总抗氧化能力(T-AOC)逐渐降低,而肝胰脏苹果酸脱氢酶(MDH)活性则逐渐升高,但对照组与25%组均无显著差异(P<0.05)。各组肝胰脏超氧化物歧化酶(SOD)活性无显著差异(P>0.05)。由此可见,亚麻油替代不同水平鱼油对鲤鱼的生长性能、肝胰脏脂质代谢和抗氧化能力产生的影响不同。以亚麻油替代25%鱼油时鲤鱼的生长效果最好,而完全替代鱼油会阻碍鲤鱼的生长,并危及肝胰脏的健康。

基于线粒体D-loop基因序列研究我国5种虾虎鱼类的系统进化关系

利用PCR技术扩增河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)、鸭绿沙塘鳢(Odontobutis yaluensis)、中华沙塘鳢(Odontobutis sinensis)、葛氏鲈塘鳢(Perccottus glenii)及尖头塘鳢(Eleotris oxycephala)的线粒体D-loop区并测序,获得河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢、中华沙塘鳢、葛氏鲈塘鳢及尖头塘鳢线粒体D-loop区全序列分别为853bp、853bp、1028bp、852bp、848bp,结合GenBank中平头沙塘鳢(Odontobutis platycephala)、刺盖塘鳢(Eleotris acanthopoma)、黑体塘鳢(Eleotris melanosoma)、褐塘鳢(Eleotris fusca)、中华乌塘鳢(Bostrychussinensis)、云斑尖塘鳢(Oxyeleotris marmorata)、溪鳢(Rhyacichthys aspro))等7种虾虎鱼类同源的D-loop区序列,分析了这12种虾虎鱼类的系统发育关系。所使用的同源序列长度为832～846bp,其中保守位点452个,变异位点405个,简约信息位点258个,单态位点145个,转换/颠换平均值为0.8。基于Kimura2-parameter模型的12种虾虎鱼类遗传距离范围为0.043～0.312,在Kimura2-parameter模型构建的邻接树和非加权配对法系统树中,河川沙塘鳢、鸭绿沙塘鳢、中华沙塘鳢、平头沙塘鳢聚为一大支,刺盖塘鳢、黑体塘鳢、褐塘鳢、尖头塘鳢、溪鳢、葛氏鲈塘鳢聚为另一支。

双色FISH检测未培养羊水及培养的外周血染色体标本方法的研究

目的 探讨双色荧光原位杂交 (dual -colorfluorescenceinsituhybridization ,D -FISH)技术在未培养羊水及培养的外周血染色体标本检测方法及实用意义。方法 选择 1 8号染色体计数探针 ,红色标记 ;2 1号染色体特异位点探针 ,绿色标记的双色探针对 30例未培养羊水细胞 ;5例正常者及 5例先天愚型患儿外周血培养标本进行D -FISH检测。结果 成功的 2 3例羊水标本 ,出现 2绿、2红双色杂交信号率 90 .91 %。改进后双色杂交成功率 1 0 0 % (2 3/ 2 3)。 5例染色体正常者 ,4例 2 1三体及 1例 1 8三体在间期细胞及染色体上均出现 2绿、2红 ;3绿、2红 ;3红、2绿杂交信号率分别为 94.6 %、93 .2 5 %、92 %。与羊水及外周血培养分析结果一致。结论 D -FISH技术不仅能检测培养的外周血标本 ,对未培养羊水细胞也是一种快速、简便、直观、成功率高的方法 ,在唐氏筛查中有较好的应用前景。

GC-MS/MS同时测定鱼样中39种多溴联苯醚

目的采用快速溶剂萃取(ASE)、系列固相萃取[SPE,包括分散性固相萃取(D-SPE)和串联SPE柱]和GC-MS/MS,建立一个便捷、高效测定鱼样中39种多溴联苯醚(PBDEs)的检测方法。方法代表性鲈鱼样品(脂肪含量11%)经冷冻干燥后ASE提取,然后采用D-SPE去除脂肪和串联SPE柱净化,最后采用GC-MS/MS检测,同位素内标法定量。结果本方法的检测限(MDLs)为0.16～3.29pg/g;具有良好的线性范围(R2>0.998)、准确度(除BDE30为53%以外,其他组分回收率为62%～139%)和精密度(RSD<20%);测定参考物质的结果均在标准值范围内,与气相色谱磁场电场双聚焦高分辨质谱(GC-HRMS)测定结果一致。结论本方法为鱼样中PBDEs检测提供了一个快速、简便和可靠的方法,以便于日常监测和评估鱼中残留PBDEs对人体健康风险的研究。

淡水鱼类线粒体DNA D-loop基因的引物设计和应用

线粒体DNA测序已广泛应用于鉴定和区分种类以及解决系统进化关系问题。本文选取已测定的主要淡水鱼类的线粒体DNA D-loop基因序列进行同源性比较,寻找保守序列,利用简并性原则设计一对通用的简并引物。利用设计的引物对广东省珠江流域主要的淡水鱼类线粒体DNA D-loop控制区基因进行扩增,均能获得单一的目的DNA片断,特异性扩增产物大小为1 kb左右。经测序及与GenBank同源序列的比较,证实为包含线粒体控制区全序列的扩增产物。本研究所设计的引物和应用的方法可以快速地同时对多种鱼类进行大规模的遗传背景分析,鉴定某些难于鉴别的近缘物种,为我国鱼类的种类鉴定、地理种群鉴别及种质资源的评估提供重要的工具。

D-H坐标系下两栖机器鱼正向运动学分析

应用机器人运动学求解常用方法—D-H法,以自行研制的两栖机器鱼为研究对象,在对机器鱼摆动运动模型简化处理的基础上,建立了机器鱼的机构简图及各个关节坐标参考系,并借助matlab软件求解矩阵,进行典型的正向运动学分析。推导出尾鳍的运动方程,借鉴此方法可以依次求得机器鱼各个关节的位移方程,速度方程,加速度方程。这种方法简化了解析计算,加快了迭代速度;为机器鱼的检验,校准提供依据及为机器鱼做运动仿真提供了运动参考。

内酯鱼肉豆腐的凝胶特性及感官品质研究

选用养殖量大、价值低的鲢鱼为原料,研究葡萄糖酸内酯(GDL)添加量、鱼蛋白质浓度以及盐添加量对内酯鱼肉豆腐凝胶特性和感官品质的影响。结果表明,鱼肉内酯豆腐的凝胶强度随蛋白质浓度和盐添加量的增加而显著增强;GDL添加量对内酯鱼肉豆腐的质构和感官品质影响显著,当GDL浓度低于0.07 g/g蛋白质时鱼肉蛋白不能形成良好的质构;在鱼肉蛋白浓度为0.9%,GDL添加量为0.10 g/g蛋白质,盐添加量为1.5%时,鱼豆腐有较好的感官品质。

鱼肉蛋白-D-木糖MRPs抗氧化活性的研究

为分析实际体系美拉德反应产物(MRPs)的抗氧化活性,采用4种不同品种鱼肉(鲢鱼、草鱼、鲫鱼和鲤鱼)蛋白与D-木糖建立实际体系进行美拉德反应,反应产物通过恒温油浴加热制备,以DPPH自由基(DPPH·)作为美拉德反应产物抗氧化活性的测定指标。单因素试验考察加热温度、时间、p H及反应底物质量比对美拉德反应的影响,优化出MRPs抗氧化活性最强的鲫鱼蛋白-D-木糖为实际反应体系。均匀试验结果表明,鲫鱼蛋白-D-木糖实际体系MRPs对DPPH自由基的清除率最高,抗氧化活性最强。且最佳工艺条件为:反应时间70 min,温度136℃,初始p H 12.0及反应底物质量比(鲫鱼蛋白∶D-木糖)为3∶1。

史氏鲟和达氏鳇养殖亲鱼群体遗传多样性分析

利用线粒体控制区序列片段(史氏鲟,425bp,达氏鳇,434bp)分析检测了两个养殖场留做后备亲鱼的史氏鲟和达氏鳇的遗传多样性。在所检测的养殖史氏鲟后备亲鱼4个年龄群体共34个体中,发现5个单倍型,共有11个多态位点,占碱基总数的2.6%,无简约信息位点。不同单倍型之间有1～10个变异位点,占碱基总数的0.2%～2.4%。各单倍型之间的遗传距离为0.002～0.024。单倍型多样性Hd=0.768,平均核苷酸差异数k=4.367,核苷酸多样性Pi=0.011。而分别来自2个养殖场的2个达氏鳇养殖群体都是1个群体仅1个单倍型,2个单倍型之间仅有2个碱基差异,遗传距离为0.005,遗传变异极度缺乏。结果提示在利用史氏鲟和达氏鳇后备亲鱼进行繁殖育苗时要充分注意近交的影响。

剑尾鱼线粒体DNA D-环及侧翼tRNA^(thr)和tRNA^(pro)序列与结构分析

采用PCR方法从剑尾鱼(Xiphophorushelleri)线粒体基因组中扩增到1段约15.5kb的片段,测定了其中627个碱基的序列。经测序分析表明,该扩增片段包括486bp的D 环的部分序列以及D 环5'端的tRNAthr和tRNApro基因的完整序列。其中486bpD环序列包含3段保守的终止相关序列TAS、与TAS互补的序列以及类似其他鱼类线粒体CSB序列。tRNAthr由线粒体DNA的H链编码,长度为72bp。tRNApro由线粒体DNA的L链编码,长度为69bp。并绘制了这2种tRNA的二级结构图。本研究所测定的基因序列已登录国际GenBank数据库,序号为AF489918。

线粒体DNA序列在沙氏下鱵鱼鱼卵鉴别上的应用

沙氏下鱵鱼与太平洋颌针鱼的产卵期与产卵区相互交叠,卵的形态也十分相似。为了准确鉴别鱼卵种类,本研究利用线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ亚基(COⅠ)基因与控制区(D-loop)片段序列对通过形态学鉴别的沙氏下鱵鱼鱼卵进行了遗传学鉴别。通过鱼卵与沙氏下鱵鱼、太平洋颌针鱼成鱼肌肉组织的COⅠ基因与D-loop片段序列的比对分析,结果表明鱼卵与沙氏下鱵鱼COⅠ基因片段序列间的遗传距离为0%～0.4%,D-loop片段序列间的遗传距离为0%～0.7%,两者差异应为种内水平的遗传分化,其亲缘关系相近;而鱼卵与太平洋颌针鱼COⅠ基因片段序列间的遗传距离为23.1%,其亲缘关系较远。本研究结果确定鱼卵为沙氏下鱵鱼卵,证明遗传学方法可用于准确鉴别鱼卵。

双色荧光原位杂交用于慢性粒细胞白血病干扰素治疗效果的监测

为了探讨双色荧光原位杂交 (D FISH)方法对CML病人干扰素治疗后疗效监测的意义 ,本研究采用D FISH方法对慢性粒细胞白血病 (CML)病人应用干扰素治疗前后骨髓间期核细胞进行bcr abl融合基因的检测 ,并与RT PCR方法检测bcr ablmRNA及传统细胞遗传学方法检测Ph染色体的结果进行比较。结果显示 ,2 2例CML病人D FISHbcr abl融合基因在干扰素治疗前均为阳性 ,其平均检出率在干扰素治疗前后分别为 96 4 %和 5 8.6 % ,其中 2例治疗前Ph染色体阴性病人 ,D FISHbcr abl融合基因在干扰素治疗前后平均检出率分别为 94 .0 %和 70 .1%。D FISH方法检测的 2 2例病人中 ,4例为部分反应 ,4例为微小反应 ,其余 14例为无反应。与传统的细胞遗传学方法相比较具有良好的相关性。结论 :D FISH方法直接检测CML病人间期核细胞的bcr abl融合基因 ,克服了传统的细胞遗传学只能进行分裂中期核细胞分析及RT PCR方法不能定量检测的不足 ,为CML干扰素治疗后克隆缓解程度的评定提供了更方便。

鱼类免疫球蛋白生物合成的遗传控制研究综述

真骨鱼重链IgM恒定区基因由CH1～CH44个外显子所编码,以IgM分泌型表达,其跨膜域由2个外显子所编码,它以淋巴细胞膜受体形式被利用,TM1外显子被直接剪接到CH3外显子,而不是在CH4外显子内,这种不寻常的剪接方式导致产生Cμ4区的膜IgM。真骨鱼IgD重链除包括分泌型或膜结合型的C末端外,这个重组分子还包括1个重组的可变区、μ链的第1个恒定区及7个恒定区。IgD(δ)重链基因恰好位于IgM(μ)基因下游,第1个恒定区μ外显子被剪切形成δ转录本。

淡水鱼加工下脚料中VD和EPA及DHA的测定

采用高效液体色谱（ＨＰＬＣ）和气相色谱（ＧＣ）法分别测定淡水鱼（鲢鱼和鳙鱼）加工下脚料中维生素Ｄ（ＶＤ）的含量为３５．７×１０－２～３７．４×１０－２ｍｏｌ／（ｓ·ｋｇ）和３７．４×１０－２～３９．１×１０－２ｍｏｌ·ｓ－１·ｋｇ－１．二十碳五烯酸（ＥＰＡ）和二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）的相对含量在鲢鱼中分别为８．２ｇ／Ｌ和６．７ｇ／Ｌ；在鳙鱼中分别为３．６ｇ／Ｌ和５．１ｇ／Ｌ．

吕泗上升流观测和动力机制模拟分析

基于2000年8月长江口外现场观测的分析,首次发现在长江口外吕泗附近存在着上升流现象。该上升流将下层的冷水和营养盐带向上层,对海区的环境和生态具有重要的影响。为了解该上升流的动力机制,作者利用基于ECOM_si建立的一个水平球面坐标系的高分辨率湍流闭合的三维环流数值模式研究该上升流现象。该模式计算区域包括东海、黄海和渤海,考虑实际岸线和水深。在综合考虑风应力、开边界体积通量和密度梯度力的情况下,模拟结果再现了吕泗海区的上升流现象,与观测结果较为一致。数值试验结果表明,产生该处上升流的动力机制主要是盐淡水混合产生的斜压效应,风应力的作用较弱,边界水体积通量产生的正压效应不起作用。倾斜的底形与斜压效应、风应力的联合作用使吕泗海区的上升流更明显。