多重聚合酶链反应用于D-K型沙眼衣原体基因分型的研究

目的摸索一套泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型的多重聚合酶链反应法。方法选择某一型与其它各型均不同的可变区部位作为下游引物，以恒定区 1区的高度保守区作为各型的公用上游引物，优化反应条件，进行标准株和临床野生株的多重聚合酶链反应扩增，并与聚合酶链反应－限制性内切酶片段多态性方法比较。结果用摸索出的反应系统和条件，对 8个标准株进行扩增，扩增出与理论值一致的片段，并可直接在普通水平琼脂糖凝胶进行电泳。特异性检测证明：①衣原体各型之间没有非特异性交叉扩增，②对泌尿生殖道病原和寄生微生物进行扩增，未扩出任何 DNA带。对临床野生株分型结果证明：复合聚合酶链反应阳性率为 100％，而聚合酶链反应－限制性内切酶片段多态性为 94.44％。结论本套衣原体基因分型的多重聚合酶链反应法特异、敏感、快速、实用，最终能用于临床分型。