不同种源药用菊花、野菊和菊花脑的ISSR分子标记及遗传关系分析

采用ISSR分子标记技术对来源于不同地区的19份药用菊花(Dendranthe mamorifolium Ramat.)种源、4份野菊(D.indicum L.)种源、1份菊花脑(D.nankingese Hand.-Mazz.)种源和1份杂交菊花‘黄金菊’(D.indicum×D.morifolium‘Gongju’)种源进行了遗传关系分析。从38条引物中筛选出6条引物,共扩增出66条带,平均多态性条带百分率达95.5%。聚类分析结果表明,取λ=16,25份种源可分成2大组,即野菊、菊花脑和杂交菊花归为一组,19份药用菊花种源归为一组;19份药用菊花种源又可根据原产地进一步分成2组,大部分原产北方的药用菊花种源的遗传关系较近,而大部分南方栽培的药用菊花种源也有相对较近的遗传关系。

菊花中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定

目的 :测定菊花中木犀草素 7 O β D 葡萄糖苷的含量。 方法 :采用高效液相色谱法 ,使用SymmetryshieldTMRP8柱 ,甲醇 水 (4 9∶5 1)为流动相 ,检测波长为 348nm。结果 :该方法线性关系良好 ,平均加样回收率为 99.74%。结论 :本法测定时间短 ,分离度良好 。

八大品种菊花中不同成分的含量比较

目的 研究八大品种菊花中不同成分的含量。方法 以绿原酸、木犀草素-7-O-β-葡萄糖苷及芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷为指标,采用高效液相色谱法对不同品种的菊花进行了含量测定。结果 绿原酸含量以济菊和祁菊最高,川菊最低;木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量以济菊最高,而毫菊最低;芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量以济菊最高,而最低为贡菊、毫菊和怀菊。结论 绿原酸和黄酮类成分均高者才是优良品种。

圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷改善血管内皮细胞损伤作用机制研究

目的:探讨河南道地药材怀菊花中圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷对血管内皮细胞损伤的干预作用及作用机制。方法:血管内皮细胞饥饿处理12 h后,以2.5μg/mL LPS诱导24 h,建立血管内皮细胞损伤模型。采用ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β、VCAM-1、ET-1水平,TBA法检测MDA水平,羟胺法检测SOD水平,一步法检测NO水平,Western blot法检测细胞内MAPK信号通路p-MEK1/2、MEK1/2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-JNK、JNK、p-P38、P38蛋白表达。结果:怀菊花中圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷对该模型有明显的干预作用,可显著升高SOD、NO水平,降低TNF-α、IL-6、IL-1β、VCAM-1、ET-1、MDA水平,并显著下调p-MEK1/2、p-ERK1/2的表达。结论:圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷可能通过调节ERK/MAPK信号通路,降低炎症因子、细胞因子及氧化应激水平,从而抵抗LPS诱导的血管内皮细胞损伤。

6-BA与2,4-D混合保鲜剂对菊花切花保鲜效果研究

以菊花切花为试材,以蒸馏水为CK,研究了不同浓度的细胞分裂素6-BA和生长素2,4-D混合保鲜剂对菊花切花的寿命及各项生理指标的影响。结果表明:生长素2,4-D和细胞分裂素6-BA对延长菊花切花瓶插寿命均有促进作用,其中生长素2,4-D和细胞分裂素6-BA的混合保鲜剂处理优于单一的2,4-D或6-BA的处理;以6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.2mg/L+蔗糖20g/L+AgNO330mg/L的处理效果最佳,其次为6-BA 10mg/L+2,4-D 2mg/L+蔗糖20g/L+AgNO330mg/L。

杭白菊的化学成分研究:正戊基果糖甙的结构测定

从杭白菊(Dendranthema morifolium(Ramat.)Tzvel.)的极性部分中分离出12个化合物。经波谱技术和化学方法证明其中之一为新成分,命名为正戊基-β-D-呋喃果糖甙。两个已知化合物咖啡酸丁酯和乙酯为5-lipoxygenase强拮抗剂。

酶水解对亳菊总黄酮中黄酮苷元的影响

目的体外研究烘干过程中酶对亳菊总黄酮成分的影响,为亳菊产地加工和炮制工艺提供前期研究基础。方法模拟亳菊烘干过程,采用β-D-葡萄糖苷酶酶解亳菊总黄酮,以金合欢素、芹菜素、木犀草素3种黄酮苷元含量为指标,分析酶解反应对3种黄酮苷元含量变化的影响。结果酶解反应后,亳菊总黄酮中木犀草素、芹菜素、金合欢素3种黄酮苷元的含量升高。结论β-D葡萄糖苷酶可酶解亳菊中黄酮类成分,使其中黄酮苷元含量升高,β-葡萄糖苷酶水解亳菊总黄酮是烘干过程中黄酮苷元含量升高的原因之一。

菊花中黄酮苷的含量分析

目的 测定菊花中金合欢素 - 7- O- β- D-葡萄糖苷的含量。方法 高效液相色谱法。结果 亳菊和滁菊中金合欢素 - 7- O-β- D-葡萄苷含量为 0 .0 82 6 %～ 0 .12 49% ,杭菊和贡菊为 0 .0 15 7%和 0 .0 335 %。芹菜素 - 7- O-β- D -葡萄糖苷的含量 ,滁菊和亳菊为 0 .0 12 6 %和 0 .0 2 74% ,而贡菊和杭菊为 0 .1177%和 0 .5 877%。结论 不同产地的菊花

HPLC测定不同干燥方法亳菊中5种成分的含量

通过高效液相色谱法建立测定不同干燥方法亳菊中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、木犀草苷和金合欢素的含量的方法。采用菲罗门C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速:1.0m L·min^(-1),检测波长325 nm,柱温30℃。绿原酸41.50~0.83×103μg·m L^(-1)木犀草苷2.45~122.50μg·m L^(-1)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸15.78~1.58×103μg·m L^(-1)、木犀草素327.33~1.96×103μg·m L^(-1)、金合欢素7.62~762μg·m L^(-1)浓度范围内呈良好线性关系,回归方程分别为y=3.3257x-10.6227(r=1.0000)、y=0.9865x+0.1356(r=1.0000)、y=3.6681x-27.6275(r=0.9999)、y=1.2538x-4.3563(r=1.0000)和y=3.6216x-1.2515(r=1.0000)。加样回收率分别为97.97%、97.49%、97.79%、98.27%、98.90%,RSD均小于5%。该方法快速,简便,重复性好,适合于同时测定亳菊中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、木犀草苷和金合欢素的含量。

亳菊花中β-葡萄糖苷酶的提取和酶学性质研究

目的测定亳菊花中β-葡萄糖苷酶的活性，研究亳菊花中β葡萄糖苷酶的基本酶学性质。方法采用对硝基苯酚-β-D葡萄糖苷（4-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside，pNPG）法考察亳菊花中β-葡萄糖苷酶活性测定的最佳条件及其酶学性质。结果当0．2mL酶液、20mmol／L pNPG0．2mL、0．6mL pH值为4．0的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液在温度为50℃的水浴中反应45min时，酶活性最高。在此条件下对亳菊花的粗酶液中8I葡萄糖苷酶的基本酶学性质进行初步研究，结果表明该酶在30～50℃时，随着温度升高，酶活力有上升趋势，其热稳定性较好；pH值在3．2～5．4之间时，相对酶活性均在80％以上；酶在4℃下的保存稳定性较好。结论本研究所测定的亳菊花中β葡萄糖苷酶活性的最佳条件及酶学性质可为亳菊花炮制原理研究奠定基础。

杭白菊对衰老小鼠肝组织SOD、GSH-PX和MDA表达的影响

目的:研究杭白菊对衰老模型小鼠肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)表达的影响,探讨其对肝组织的保护作用。方法:以D-半乳糖建立人工致衰老小鼠并给予杭白菊灌胃处理,ICR雌性小鼠64只,每组16只,随机分成4组,空白对照组、D-半乳糖对照组、维生素E处理组和杭白菊处理组,检测小鼠血清和肝组织中SOD、GSH-PX活性及MDA的含量。结果:杭白菊处理组血清、肝中SOD、GSH-PX含量均高于D-半乳糖对照组(P<0.01),血清MDA低于D-半乳糖对照组(P<0.01)。杭白菊处理组血清、肝中SOD、GSH-PX、血清MDA含量与维生素E处理组及空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:杭白菊主要通过提高抗氧化酶活性,清除或减少氧自由基和脂质过氧化物而实现其保护肝组织的作用。

Two New Flavonoid Glycosides from Chrysanthemum morifolium

Two new flavonoid glycosides were isolated from the flowering heads of Chrysanthemum morifolium. Their structures were determined to be luteolin 4＇-methoxy-7- O-（6＂-O-acetyl）-β-D-glucopyranoside （1） and acacetin 7-O-（3＂-O-acetyl）-β-D-glucopyranoside （2） by means of 1H and 13C NMR spectroscopic analysis, including 2D NMR technique.

Box-Behnken效应面法优化亳菊中4种黄酮类成分提取工艺

目的:采用Box-Behnken效应面法,优选亳菊中黄酮类成分提取工艺条件。方法:在单因素试验的基础上,采用三因素三水平Box-Behnken试验设计对亳菊中黄酮类成分提取工艺参数进行优选。以乙醇浓度、料液比、提取时间为自变量,以金合欢素、木犀草素、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷及木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量为因变量,采用Hassan方法计算总评"归一值",建立总评归一值与自变量之间的数学关系,经效应面法预测最佳工艺条件。结果:最佳提取工艺为乙醇浓度72%、料液比1:26、提取时间152min,提取三次;金合欢素、木犀草素、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷及木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量分别为1.8190,0.1550,0.5320,0.6240mg·g^-1。结论:实测值与预测值接近,表明采用Box-Behnken响应面法优化后得到的综合提取工艺参数可用于亳菊中黄酮类成分金合欢素、木犀草素、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷及木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的提取。

不同产地菊花多糖的抗氧化活性研究

目的用水提醇沉法提取菊花中的多糖,对比研究不同产地菊花多糖的抗氧化活性。方法采用铁氰化钾还原法测定总还原能力、水杨酸法测定清除羟自由基能力和邻苯三酚法测定清除超氧阴离子能力,从以上3个方面来评价4种产地菊花多糖的抗氧化活性。结果菊花多糖的抗氧化活性与多糖浓度成正比例关系,在10 mg·mL^-1时抗氧化活性最强,但4种产地菊花多糖的抗氧化活性均不如抗坏血酸。其中,总还原能力:杭白菊>亳菊>黄山贡菊>滁菊;羟自由基清除能力:杭白菊>黄山贡菊>滁菊>亳菊;超氧阴离子清除能力:杭白菊>亳菊>黄山贡菊>滁菊。结论杭白菊的抗氧活性最好,具有一定科学研究价值。