黄芪甲苷对Th2型淋巴细胞D10.G4.1体外作用的研究

目的探讨黄芪甲苷对Th2型淋巴细胞株(D10.G4.1,D10)体外的干预作用。方法体外培养D10细胞,采用ConA作为刺激剂,分别予以2、4、8×10-5mol·L-1剂量黄芪甲苷体外干预,并用地塞米松作为对照。CCK-8法检测药物对D10细胞的增殖影响;流式细胞术检测药物对D10细胞凋亡和周期的影响;ELISA法检测药物对细胞培养上清IL-4、IL-5、IL-13及TNF-α水平的影响;Western blot法检测D10细胞gata-3表达水平。结果黄芪甲苷各剂量组对D10细胞增殖及凋亡均无明显影响(P>0.05);但黄芪甲苷高剂量组IL-13与gata-3表达水平明显下降(P<0.01),而低剂量组TNF-α明显下降(P<0.01)。结论黄芪甲苷体外具有抑制Th2反应的作用,但与药物细胞毒性或诱导凋亡无关。

当“马甲线”遇上大行BOARDWALK D10,复古风潮也要一“马”当先

随着生活水平的提高,人们对折叠自行车的需求早已跳脱出实用性的范畴。在复古潮流风行的今天,爱好骑行的年轻人更希望能拥有一辆既有复古质感又不失时尚气质的折叠车。

lncRNA NEAT1调节miR-15a-5p/HOXD10轴对子痫前期滋养细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)核富集转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,NEAT1)对子痫前期(preeclampsia,PE)滋养细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及分子机制。方法体外培养人绒毛膜滋养细胞HTR-8/Svneo,分为正常对照(NC)组、si-NC组、si-NEAT1组、si-NEAT1+anti-NC组和si-NEAT1+anti-miR-15a-5p组。采用四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞术和Transwell小室实验检测细胞增殖活性、凋亡和侵袭能力;实时定量聚合酶链反应检测细胞中NEAT1、miR-15a-5p和同源盒基因D10(homeobox D10,HOXD10)mRNA表达;蛋白质印迹法检测细胞中HOXD10和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白[钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和神经钙黏素(N-cadherin)]的表达;双荧光素酶报告基因和RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)实验验证HTR-8/Svneo细胞中NEAT1、miR-15a-5p和HOXD10的调控机制。结果敲减NEAT1可显著促进HTR-8/Svneo细胞增殖、侵袭和EMT,抑制细胞凋亡,并上调miR-15a-5p表达,抑制HOXD10的mRNA和蛋白表达(P<0.05);下调miR-15a-5p的表达可明显逆转NEAT1敲减对滋养细胞增殖、凋亡和侵袭的影响(P<0.05)。双荧光素酶和RIP实验证实NEAT1可靶向结合并负调控HTR-8/Svneo细胞中的miR-15a-5p,且HOXD10是miR-15a-5p的靶标。结论敲减NEAT1可通过上调miR-15a-5p抑制HOXD10表达,进而促进滋养细胞的增殖和侵袭,并抑制滋养细胞的凋亡。

D10-86cDNA片段在人食管癌中的表达

目的:D10-86cDNA片段是通过mRNA差异显示技术分离的在食管癌中低表达的cDNA片段。由于mRNA差异显示技术具有较高的假阳性,故需进一步鉴定其在食管癌中的表达情况。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁粘膜和食管癌细胞系EC9706和肺癌细胞系GLC82中D10-86cDNA片段的表达。结果:D10-86cDNA片段在41.5%(17/41)食管癌组织中的表达明显低于相应的癌旁粘膜,未检测到表达和微弱表达的分别为9.8%(4/41)和31.7%(13/41),食管癌组织中的表达高于相应的癌旁粘膜7.3%(3/41),表达无差别的51.2%(21/41);在食管癌细胞系EC9706和肺腺癌细胞系GLC82未检测到表达;D10-86cDNA片段表达下调与食管癌临床病理因素无显著相关性(P>0.05)。结论:D10-86cDNA片段在人食管癌中表达下调。

食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达

目的:研究食管癌组织中cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达及相关性。方法:采用RT-PCR方法检测了41对食管癌组织及配对食管癌旁正常黏膜cystatin B基因、D10-86 cDNA片段的表达。结果:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段各在82.9％(34/41)、41.5％(17/41)食管癌组织中的表达水平低于配对的食管癌旁正常黏膜,cystatin B基因的表达下调情况显著高于D10-86 cDNA片段(P<0.05),但2者的表达无相关性(JD>0.05)。结论:cystatin B基因、D10-86 cDNA片段在食管癌中表达下调,可能源于不同的机制。2者可能分别是由不同的机制而导致在食管癌组织中表达下调。

根结线虫16D10基因与花生FAD2基因RNAi载体构建

针对根结线虫16D10基因和花生Δ12脂肪酸脱氢酶(FAD2)基因的核酸序列设计了两条含有GUS内含子的RNA干扰结构序列。以pBS-T质粒为中间载体,将这段序列连接进植物转化载体pRI 101-AN中,获得针对两个基因的RNAi载体。经SalⅠ和KpnⅠ双酶切验证,目的序列已准确插入目标载体。此载体可用以培育抗根结线虫病和高油酸花生新品种。

华东地区汉族群体D10S2325基因座的遗传多态性研究

目的研究D10S2325基因座等位基因和基因型频率在华东地区汉族群体的分布情况,评价该基因座在华东汉族人群的法医学应用价值.方法用PCR扩增、非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳、银染显色方法检测D10S2325基因座的遗传多态性.结果在华东地区汉族人群中共检出12个等位基因(6～17),其CE值和DP值分别为0.628和0.948.结论D10S2325等位基因频率分布好,提供的信息量大,对华东地区汉族人群具有较高的非父排除率和个人识别能力,是群体遗传学研究和法医学应用理想的STR位点.

广东汉族人群D22S1045、D1S1656、D2S441和D10S1248基因座的遗传多态性分析

目的调查广东汉族人群D22S1045、D1S1656、D2S441和D10S1248等4个短串联重复序列(STR)基因座的遗传多态性。方法采用德国Qiagen公司的Hexaplex ESS试剂盒复合扩增169个广东汉族个体的4个STR基因座。扩增产物经美国ABI公司的3100遗传分析仪电泳分析其基因型,在各基因座均符合Hardy-Weinberg平衡的基础上计算其遗传学参数:基因频率、杂合度(H)、多态信息含量(P1C)、个体识别能力(PD)和非父排除率(PE)。结果169名无关个体4个STR基因座中共检出40个等位基因,4个基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P】0.05),

人TBC1D10C基因过表达慢病毒载体的构建及功能鉴定

目的构建人TBC1D10C(hTBC1D10C)基因过表达慢病毒载体,并对其进行功能鉴定。方法利用PCR技术扩增hTBC1D10C基因片段,构建pLVX-hTBC1D10C-mCMVZsGreen-PGK-Puro过表达载体质粒,将构建的过表达载体质粒和系统包装质粒应用高效转染试剂盒转染至293T细胞,以包装rLV-hTBC1D10C-zpp,在HEK293细胞中检测病毒滴度。rLV-hTBC1D10C-zpp感染H9C2心肌细胞,蛋白免疫印迹法检测hTBC1D10C蛋白表达。结果 pLVX-hTBC1D10C-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro过表达质粒构建成功,rLV-hTBC1D10C-zpp包装顺利,滴度为1×10^8 TU/ml,感染H9C2心肌细胞后,hTBC1D10C蛋白表达上调(P<0.05)。结论 rLV-hTBC1D10C-zpp构建成功,在心肌细胞中具有高效表达hTBC1D10C的效应。

产黄青霉S-3-25的硫酸二乙酯诱变突变株3d10-01的次级代谢产物研究

目的阐明产黄青霉S-3-25的硫酸二乙酯(DES)诱变突变株3d10-01的次级代谢产物及其抗肿瘤活性。方法利用各种色谱技术分离纯化代谢产物。根据理化和波谱数据鉴定化合物结构。采用MTT法测试其抗肿瘤活性。采用HPLCUV检测方式确定所得化合物是否为突变株新产。结果从突变株发酵产物中分离鉴定了2,4-二羟基-3,5,6-三甲基苯甲酸甲酯(1),6-羟甲基-2,2-二甲基-苯并二氢吡喃-4-酮(2),regiolone(3),(3S,4S)-3,4-二氢-3,4,8-三羟基-2H-萘酮(4),脑苷脂C(5),脑苷脂D(6)和dankasterone A(7)7个化合物。化合物1、4和7对受试5种癌细胞均有较强抑制作用;2、3和6对受试HL-60细胞有一定抑制活性。HPLC-UV的检测结果表明,化合物1~4和7为原始菌不产而突变株新产的次级代谢产物。结论化合物1~7均为首次从产黄青霉发酵产物中分离得到。化合物1~4、6和7对部分受试肿瘤细胞的抑制活性为首次研究并报道。

水平井优快钻井技术在大牛地气田D10PH-5井的应用

D10PH-5井是大牛地气田施工的一口水平段长达1200m水平井，为了提高该井的机械钻速，在分析该区储层工程地质特征及钻井难点的基础上，通过采取水平井优快钻井技术，如优化井身结构、合理设计井眼轨迹、优选钻头类型和优化钻具组合、分井段采取相应钻井液技术等，提高了钻井速度，缩短了钻井周期，因而具有实际应用价值。

D10汽轮机的高压通流受阻运行分析

根据某D10型汽轮机组出现的带负荷能力下降情况,通过各类试验数据分析,运用排除法,确认因故障造成高压缸内通流面积减小、通流受阻,导致机组不能带到额定负荷,提出了相应的预防监测措施。

Mi基因过表达载体和16D10基因RNAi载体的构建及转化

文中采用PCR技术从番茄中克隆获得了Mi基因,采用反转录PCR(RT-PCR)技术从来源于红橘(Citus reticulate)的根结线虫中克隆获得了16D10基因,采用DNA重组技术构建了Mi基因的过表达载体和16D10基因的RNAi载体,分别命名为pB-Mi和pB-16DR.通过根瘤农杆菌介导的遗传转化,获得了经PCR检测为阳性的沙田柚转基因植株.这一结果将为研究Mi基因过表达和16D10基因的RNA干扰对柑橘根结线虫病的抗性影响提供试材和技术支持.

大牛地气田D8-D10井区水平井上返层位潜力分析

D8-D10井区为大牛地气田首个规模开发的水平井井区,存在部分高产井产量压力衰减过快、低产井积液减产甚至水淹停产的问题。从沉积相有利位置、连片砂体储量未控制区域、砂体连通性及纵向层位动用情况几方面,对D8-D10井区水平井的开发层位进行分析,给出水平井开发层位调整建议,并对措施后效果进行动态预测。

S109FA燃气-蒸汽联合循环机组D10型汽轮机性能诊断分析

根据某电厂S109FA燃气-蒸汽联合循环机组D10型汽轮机的结构特点,对比分析各个试验期的性能数据,发现该机组经过10多年运行性能下降明显。结合机组检修发现的问题,诊断D10型汽轮机热力性能下降的主要原因是高压缸动、静叶部分受损和通流部分结垢导致通流面积减小,提出了相应的预防措施及相关建议,该性能分析结果可为国内同类机组的优化运行提供参考。

D10N推土机冷却系统的优化改进

美国卡特彼勒公司生产的D10N履带式推土机在使用过程中出现防冻液溢失和空气进入冷却系统等显现,为了能保证设备的正常运行,提出在冷却系统中加装补偿水桶的方法解决问题,从而起到节约成本,提高设备运行经济性的目的。

Bio-Rad D10全自动糖化血红蛋白仪初步评价

目的初步评价Bio-Rad D10全自动糖化血红蛋白仪测定糖化血红蛋白(HbA1c)的临床应用性能。方法根据美国临床实验室标准化委员会颁布的《定量临床检验方法的初步评价:批准指南(EP10-A)》提供的方法,按照特定顺序连续5d测定低、中、高浓度标准品中的HbA1c,计算偏差、总不精密度,及其截距、斜率、非线性、携带污染和漂移,并进行t检验。结果偏差:低值-0.01%、中值-0.09%、高值-0.11%,均在允许偏差的范围内。总不精密度(用CV表示):低值1.148%、中值0.886%、高值0.727%,均小于美国糖尿病协会(ADA)允许误差5%的范围。截距、漂移、非线性和携带污染均无显著性差异(P>0.01),斜率有显著性差异(P<0.01)。结论 Bio-RadD10全自动糖化血红蛋白仪测定HbA1c的准确度和精密度良好,性能指标符合临床应用要求。

卡特D10R型推土机柴油机故障两例

卡特D10R型推土机采用3412E型高压共轨式柴油机,柴油机HEUI型喷油器的喷油正时和喷射压力由柴油机控制器(ECM)根据柴油机曲轴转角、柴油机温度、涡轮增压器输出压力、负荷等进行控制。当活塞接近上止点时,控制器(ECM)向喷油器电磁阀发出控制信号,电磁阀将喷油器喷油孔打开,开始喷油。喷油器的喷射压力由高压机油泵输至高压机油共轨管的压力控制。

D10汽轮机液压控制阀工作原理及故障处理

电厂D10汽轮机液压控制阀的工作原理,通过对机组运行过程中发生的液压控制阀故障进行分析处理,总结液压控制阀故障处理的方法。