探针D13S319和D13S25检测慢性淋巴细胞白血病13q14缺失

为了探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)中13q14的缺失情况,采用SpectrumOrangeTM直接标记的位于13q14的序列特异性DNA探针D13S319、D13S25和应用间期荧光原位杂交(I-FISH)技术检测24例CLL患者13q14缺失[del(13q14)]情况。结果显示:24例CLL中用D13S319探针检测,del(13q14)异常10例(41.7%);用D13S25探针检测,del(13q14)异常11例(45.8%),两个位点同时存在del(13q14)异常者9例(37.5%)。del(13q14)在不同的Binet分期中分别为A期4/7(57.1%),B期3/7(42.9%),C期5/10(50%),在各组间无显著性差异(P>0.05)。结论:CLL患者13q14缺失区域可能位于D13S319和D13S25之间,FISH是一种检测del(13q14)异常快速而准确的方法。

中国南方汉人D13S316位点多态性及Wilson病基因诊断的研究

目的 评估中国南方汉人Wilson病 (WD)基因 (WND)侧翼微卫星DNA(STR)位点D13S3 16的基因多态性及在WD基因诊断中的价值。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)、变性聚丙烯酰胺凝胶电脉和银染法分析 84名无血缘关系中国南方汉人D13S3 16的片段长度多态性 ;并对 19个WD家系进行STR连锁分析。结果 D13S3 16有 19个等位片段 ,长度范围为 13 4～ 170bp ,多态信息含量 (PIC)为 0 93 1。共检出 8例症状前患者 ,10例致病基因携带者及 15例正常人 ,3例未能确定 ,基因诊断率达 91 67%。结论 D13S3 16大致代表中国南方汉人的多态性标记 ,对WD基因诊断有重要价值。

LSI-RB1和LSI-D13S319荧光探针联合检测分析112例多发性骨髓瘤患者染色体13q14缺失

染色体13q14缺失是多发性骨髓瘤(MM)常见的遗传学异常,也是荧光原位杂交(FISH)检测的常规指标。目前针对该片段缺失的商品化序列特异性DNA探针有LSI-RB1(针对13q14.1-14.2区域)、LSI-D13S319(针对13q14.3区域)和LSI-D13S25(针对13q14.3区域)3种。本研究联合应用LSI-RB1、LSI-D13S319探针和间期FISH方法同时检测112例MM患者对应区域的缺失,比较MM患者上述区域缺失率和缺失细胞比例是否存在差异,总结我国MM患者13q14缺失片段大小的特点,以更好地指导临床检测和治疗。结果表明:①LSI-RB1和LSI-D13S319两种探针对MM患者13q14缺失的检出率均为47.3%,检出相符率为100%;如果将缺失的阈值提高至20%,则13q14缺失检出率分别为46.4%和47.3%,检出相符率为98%;②RB-1缺失组缺失细胞比例中位数为72.5%(18%-98%),D13S319缺失组缺失细胞比例中位数为76.5%(22%-98.5%),2种探针检测得出的13q14缺失细胞比例无统计学差异(P=0.38);如果分别将缺失细胞比例≥65%和≥85%定为高比例缺失,比较两种探针对高比例缺失患者的检出率,结果 RB1组有36例(67.9%)和14例(26.4%)为高比例缺失,D13S319组有35例(66%)和19例(35.8%)为高比例缺失,统计学分析显示两种探针对高比例缺失患者的检出率也无显著差异(P分别为0.188和0.439);③53例13q14缺失MM患者均为杂合型缺失,且同时具有上述两个区域缺失,即均为较大片段缺失。结论:本研究中112例MM患者13q14.1-14.2和13q14.3区域缺失、缺失细胞比例和高比例缺失检出率无明显差异,不能根据检测上述两个位点将MM患者划分为不同亚型,在检测13q14缺失时,仅需选择LSI-RB1和LSI-D13S319中1种探针即可。53例13q14缺失MM患者均同时存在13q14.1-14.2和13q14.3两个区域的缺失,提示较大片段缺失是MM患者13q缺失的重要特点之一。

中国人D13S316位点CA重复序列的多态性分析

应用ＰＣＲ方法扩增Ｄ１３Ｓ３１６位点的ＣＡ重复序列，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增产物，测定８０名正常中国人的多态频率，结果得到９种不同的等位片段，ＰＩＣ值为０．８０，表明该位点在中国人群中具有长度多态性；正常家系连锁结果呈孟得尔分离，因此，可用于Ｗｉｌｓｏｎ病家系的基因诊断。

应用D13S296位点多态性对肝豆状核变性家系的基因诊断

目的评估中国人群肝豆状核变性（Ｗｉｌｓｏｎ ｄｉｓｅａｓｅ，ＷＤ）基因（ＷＮＤ）侧翼徽卫星ＤＮＡ（ＳＴＲ）位点 Ｄ１３Ｓ２９６的基因多态性及在ＷＤ基因诊断中的价值。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 和银染法分析９８名无血缘关系中国人Ｄ１３Ｓ２９６的片段长度多态性；并对１９个ＷＤ家系进行ＳＴＲ连锁分析。结果 Ｄ１３Ｓ２９６有１８个等位片段，长度范围为１０６－１４０ｂｐ，多态信息含量（ＰＩＣ）为０．９０６。共检出８例症状前患者，１０例 基因携带者及１４例正常人，４例未能确定，基因诊断率达８８．８７％。结论 Ｄ１３Ｓ２９６在中国人群是优秀的多态性标 记，对ＷＤ基因诊断有重要价值。

广东汉族人群D13S631位点的多态性

【目的】调查D13S6 31位点在广东汉族群体的多态性。【方法】PCR扩增短串联重复 (STR)位点D13S6 31后 ,用不连续电泳系统进行分型。【结果】在 2 2 7个无关个体中共发现了 6个等位基因 ,扩增片段为 197～ 2 17bp ,等位基因频率最高为 0 2 90 7(2 0 1bp) ,最低为 0 0 90 3(197bp)。杂合率、个体识别率和非父排除率分别为 0 7885 ,0 92 31,0 5 5 43。家系分析表明按孟德尔规律遗传。【结论】结果表明D13S6 31是一个具有重要法医应用价值的位点。

江西地区汉族人群D13S317、D5S818和D19S400基因多态性分布

遗传学研究发现人类基因组DNA某些部位含有短串联重复序列(short tandem of repeats,STR),STR的高度多态性可为人类基因组DNA的识别提供重要标记,适用于民族演变、法医学个体指认与亲子鉴定以及骨髓移植等研究领域.

中国人D13S314位点STR的多态性特征及其价值探讨

D13S314位于Wilson’s病（WD）基因近端侧，其短串朕重复序列（STR）具有高度多态性，应用PCR方法结合变性聚丙烯酸胺凝胶电泳可迅速加以检测。本研究检测了8o名正常中国人该位点的等位片段，探讨其多态性分布特征并与西方人进行比较，表明该位点在中国人群中具有长度多态性，多态信息含量（PIC值）为o．89，有较高的应用价值。

CpOGA^(D298N)与核心链霉亲和素Stv13融合表达用于检测蛋白质O⁃GlcNAc修饰

氧连接的β-N-乙酰葡萄糖胺修饰(O-GlcNAc修饰)是一种发生在蛋白质丝氨酸、苏氨酸羟基上的一种动态、可逆的翻译后修饰。O-GlcNAc修饰在细胞的许多关键过程中发挥重要作用,也是研究阿尔茨海默病和糖尿病等的重要途径,但是常用于O-GlcNAc蛋白检测的抗体特异性或者检测分子量范围仍存在问题且耗时(~36 h)过长,对后续研究造成困扰。在本研究中,我们设计构建了产气荚膜梭菌OGA(O-GlcNAcase)突变体(CpOGA^(D298N))与核心链霉亲和素Stv13融合表达质粒pET28a-CpOGA^(D298N)-Stv13。将质粒pET28a-CpOGA^(D298N)-Stv13转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,获得了融合蛋白质CpOGA^(D298N)-Stv13。通过CpOGA^(D298N)特异性结合O-GlcNAc的能力及生物素-亲和素特异性亲和作用,设计了Far-Western blot(Far-WB)用于检测蛋白质O-GlcNAc修饰,利用sOGT(short form O-GlcNAc transferase)、去O-GlcNAc修饰sOGT、细胞裂解液样本及人肝细胞核因子1A(hepatocyte fuclear factor 1A,HNF1A)对该方法进行验证。本研究成功构建了一种蛋白质O-GlcNAc修饰检测方法,耗时相对O-GlcNAc特异性抗体缩短至5~7 h,丰富了蛋白质O-GlcNAc修饰的检测方法,为其后续研究奠定了基础。

温州地区汉族群体D13S317基因座的遗传多态性研究

目的研究STR位点D13S317在温州地区的遗传多态性,获得相应的群体遗传学数据。方法在温州地区随机抽取128名无血缘关系汉族个体的静脉血,EDTA抗凝,用chelex-100法提取DNA。用Beckm an CEQ 8800毛细管测序仪测定序列,应用PCR技术和聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分型。结果温州地区汉族群体D13S317基因座发现7个等位基因及19种基因型,其基因型分布符合Hardy-W e iberg平衡(P>0.05)。其个人识别能力(Dp)、其杂合度(H)、非父排除率(PE)和多态性信息含量(PIC)分别为0.921、0.875、0.745和0.77。其重复序列为[TATC]n。结论D13S317在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值。

D13S133位点CA重复序列在正常中国人群的多态性分布

目的研究Ｄ１３Ｓ１３３位点ＣＡ重复序列在正常中国人群的多态性分布。方法：应用ＰＣＲ扩增该位点的ＣＡ重复序列，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增产物，测定６０个正常中国人的等位片段。结果：共检测到１５种不同长度的等位片段，多态信息含量（ＰＩＣ值）为０．８８１。结论：该位点在中国人群中具有长度多态性，且其多态性分布与西方人群存在明显差异。

痘苗病毒D13L基因在BHK_(21)细胞系中的稳定表达

目的建立稳定表达痘苗病毒D13L基因的细胞系。方法克隆D13L基因并将其插入真核表达质粒pEGFP-C2中构建重组质粒pEGFP-D13L,利用脂质体法转染BHK21细胞,G-418进行筛选,有限稀释法获取亚克隆细胞株。荧光显微镜观察和RT-PCR分析表达效果。结果D13L基因在细胞中稳定表达,连续传代10次后仍然能检测到其表达,荧光显微镜下能看到绿色荧光,RT-PCR可以得到1650bp大小的目的条带。结论筛选到了稳定表达D13L基因的细胞株,为下一步构建缺陷型痘苗病毒以及研究D13L基因的功能奠定基础。

S1D13A05芯片在图形驱动中的硬件加速技术

简述了爱普生S1D13A05芯片的架构特征,并且介绍了其中的2D硬件加速引擎的工作模式和相关的寄存器设置,最后以VxWorks操作系统作为开发环境,基于风河公司WindML图形开发包,对S1D13A05芯片的图形驱动软件开发中的硬件加速技术进行了解析。

莺歌海盆地D13区新近系黄流组大型海底扇地震识别及含气性预测

通过层序地层学和地震沉积学方法,对莺歌海盆地D13区新近系黄流组大型海底扇逐级解剖,并通过多属性融合地震切片技术对海底扇内水道进行雕刻识别,利用地震剖面上的“平点”反射特征预测含气甜点。研究结果表明:(1)研究区大型海底扇为古蓝江三角洲再次搬运而形成,发育了自南东向北西依次退积的4期扇体,并识别出11期砂体,早期扇的顶部地层被晚期扇不同程度侵蚀,相邻扇砂体间纵向局部连通。(2)海底扇中优质储层主要分布在沉积能量强、高水动力条件下形成的海底扇水道中,扇体内发育串珠状、复合型、曲流河形等类型的水道,其中“大、厚、宽”的水道为厚层优质“甜点”储层发育区;(3)地震剖面上的“平点”反射特征可用于识别水道沉积中的含气甜点,莺歌海盆地D13区平点具有水道内部近水平反射、水道底面反射能量变弱、平点向构造低部位略倾斜等基本特征。

中国武汉汉族群体STR D13S325基因座的多态性研究

应用PCR ,聚丙稀酰胺凝胶垂直电泳及银染技术对 2 16例中国汉族人群STRD13S32 5基因座进行了多态性研究 ,首次获得了中国武汉汉族人群基因频率分布资料。检出 11个等位基因 ,30个基因型 ,基因频率分布符合Hardy Weinberg平衡。DP值为 0 92 92 ,三联体PE值 0 6 137,二联体PE值为 0 4370 ,PIC值为 0 775 5。观察 2 0 0次减数分裂未发现突变基因。研究证实D13S32 5是一个高多态性STR基因座标记系统。

D13S317基因座“off-ladder”等位基因分析

目的:确证在DNA数据库构建过程中一样本D13S317基因座出现的稀有分型标准物外off-ladder(OL)等位基因。方法:AGCU 17+1 STR荧光检测试剂盒进行STR分型时,D13S317基因座检出OL等位基因;利用Chelex-100法提取血样DNA进行荧光PCR,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳和ABI 3130电泳检测并由上海生工进行测序。结果:OL等位基因只含有6个[TATC]重复,不在D13S317基因座Allelic Ladder范围之内,是一个新的等位基因。结论:新的等位基因的出现,对扩大DNA数据库的覆盖范围及全面性和提高基因座个体识别能力等具有重要的借鉴意义。

爱普生S1D13A05芯片图形驱动开发中的双缓冲技术

本文简述了爱普生S1D13A05芯片的架构特征,并且介绍了其中的双缓冲工作模式和相关的寄存器设置,最后以VxWorks操作系统作为开发环境,基于风河公司WindML图形开发包,对S1D13A05芯片的图形驱动软件开发中的双缓冲技术进行了解析。

曼罗兰CD13型纸架常见故障分析

供纸部的连续运行是高效印刷的关键,在报纸印量日益下滑的今天,成本节约显得更加重要,少断纸、不断纸是我们共同的目标。我公司4条曼罗兰COLORMAN生产线中配有20台曼罗兰CD13型纸架,这些纸架至今已稳定运行十余年。在此,笔者总结了该纸架的常见故障及处理办法,与同行分享。装纸类故障生产前,

杭州湾跨海大桥D13墩2#钻孔桩施工综述

杭州湾跨海大桥南航道桥施工地理环境恶劣，地质条件复杂。D13#主墩钻孔桩钢护筒直径大，长度长，壁厚薄，在沉放过程中出现了罕见的大面积护筒变形，钻孔施工非常艰难，整个D13#主墩38根钻孔桩历时一年才完成。本文详细介绍了D13—2#钢护筒水下切割、漏浆处理方法以及成孔的施工方法。由于该钻孔桩钢护筒变形长度长，水下切割处理后漏浆严重，采用了多种方法进行漏浆处理，具有很强的代表性。