1例弱D24型的血清学表型与分子背景研究

目的分析鉴定1名RhD抗原弱阳性个体的血型血清学表型及分子背景。方法对1名常规RhD血型初筛为阴性的无偿献血者,采用间接抗球蛋白试验检测D抗原,并用常规血清学方法检测其RhC、c、E、e抗原表型;采用特异性PCR技术测定其RHD合子型,并作RHD基因全长编码区10个外显子序列测序。结果血型血清学鉴定该个体存在有弱的D抗原,其他Rh血型抗原为ccEe;RHD合子型为D/d;对RHD基因10个外显子的测序结果显示编码区存在1 013 T>C的突变,证实该个体为弱D24型。结论中国人群中的弱D型有待于进一步的发现和研究。

框架桥顶进中D24m施工便梁的改进应用

在铁路既有线框架桥顶进施工中,当线间距较小时,D24 m施工便梁无法采用标准的组装方法进行线路加固。通过对D24 m施工便梁组装技术的改进,即采用D24 m施工便梁超低位组装,以满足铁路限界要求,确保了框架桥安全顶进到位。

TBC1D24基因的致聋机制研究进展

TBC1D24基因编码含TBC结构域和TLDc结构域的蛋白质。该基因具有基因多效性,所涉及的基因型-表型关联复杂,不同突变可分别导致重度-极重度先天性耳聋、迟发性/渐进性耳聋等不同听力表型及在神经、骨骼等系统的不同发育障碍。在内耳中,TBC1D24表达于螺旋神经节及毛细胞静纤毛,具有特异的表达位置和表达时间。对该基因的功能学研究有助于人们了解听觉及神经系统的发育及相关遗传性疾病的分子发病机制。

RSB D24c型并条机自调匀整原理及分析

探讨RSB D24c型并条机自调匀整原理。介绍了RSB D24c型并条机自调匀整系统的组成和工作原理。分析了电子装置、检测罗拉、匀整点、匀整强度、低速优化等影响自调匀整功能的关键要素。认为:实际应用中需根据原料、工艺等情况,及时检查匀整电子装置的正确状态,选择最合理的检测罗拉,认真做好优化匀整点、匀整强度和低速优化系数等工作,才能保证RSB D24c型并条机匀整功能的精准运行。

新型重组IL6D24PE40KDEL外毒素融合蛋白的理化分析

为了对构建成功的新型重组IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白的部分物化表征进行分析鉴定 ,采用Edman法、SDS PAGE法、胰蛋白酶消化的MALDI TOF MS质谱法、蛋白印迹法和MTT法分别测定该融合蛋白的N 末端 6个氨基酸、相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性。结果表明 :所构建表达纯化的新型重组IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白N末端 6个氨基酸序列为Met Ile Asp Lys Gln Ile ,而IL 6缺失 2 4个氨基酸后的原序列为Ile Asp Lys Gln Ile ,由于采用了大肠杆菌表达系统 ,因此在N末端第 1位多出了 1个Met,经12 %SDS PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算 ,其相对分子量为 5 8.75kD ,与理论值 5 6.9kD相比误差在5 %之内。MALTI TOF MS质谱测定共获得 10个与理论预测值相符的肽段 ,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明 ,在分子量为 5 7kD左右的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白 ,证明本融合蛋白为全新蛋白 ,与预测的目的蛋白相符。WB实验显示IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白能与IL 6及PEA抗体特异性结合。MTT生物活性测定表明 ,该融合蛋白对表达IL 6R的多发性骨髓瘤细胞系U2 66产生特异性杀伤 ,而对不表达IL6R的CEM淋巴细胞系无任何杀伤。结论

新型重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白的表达优化及下游纯化

目的优化提高重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白在原核细胞中的表达量,并建立有效的下游纯化路线。方法对IL6D24-PE40KDEL的受体菌、菌体生长状态及诱导表达时间等进行优化,经反复筛选确定了高效简捷的纯化路线:即将Q型强离子交换树脂与DEAE弱离子交换树脂相结合的两步纯化法。结果宿主工程菌HB101的优化表达条件为2%接种量,30℃培养3h,42℃再诱导4h,可使目标蛋白的表达量由最初的13.5%提高到23.8%;经12%SDS-PAGE蛋白电泳证实,特异性表达产物为包涵体形式,占包涵体蛋白的40%,分子量约为60kD,与所预测的IL6D24-PE40KDEL融合蛋白的分子量相吻合。两步纯化法可获得纯度>95%的IL6D24-PE40KDEL融合蛋白,纯化蛋白的回收率为8.7%,经Western-blot实验证明,它可同PEA多抗和IL6单抗特异性的结合。MTT试验检测证实,该融合蛋白能特异性的杀伤高表达IL6R的U266多发性骨髓瘤细胞,ID50为180ng/ml;而对IL6R的T淋巴白血病细胞CEM则无杀伤,ID50>1000ng/ml。结论获得了高表达重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白的菌株并建立了高效简捷的下游纯化路线,融合蛋白能特异性的杀伤表达IL6R的多发性骨髓瘤细胞系U266。

TBC1D24基因突变致癫痫及发作性共济失调一例

目的 探讨TBC1D24基因突变致病的临床特点。方法 分析河北省儿童医院收治的1例TBC1D24基因突变致癫痫及发作性共济失调患儿临床资料、实验室检查和影像学表现,并采用高通量二代测序及Sanger验证技术进行基因检查。结合相关文献对其致病特点进行分析。结果 患儿主要表现为癫痫,肌阵挛,发作性共济失调,耳聋。使用奥卡西平治疗肌阵挛无加重,肌阵挛同期视频脑电图(VEEG)未见明显锁时关系的放电。头颅影像学表现为进行性小脑萎缩伴异常信号。基因检测提示:TBC1D24基因复合杂合突变,两个等位基因突变均为可能致病性突变。结论①TBC1D24基因应作为儿童癫痫、发作性共济失调、耳聋等表现的候选筛查基因之一;②TBC1D24基因突变所致肌阵挛可能为皮质下肌阵挛。

D24梁串联架空铁路复线顶进大跨地道桥施工设计技术

市政环线干道采用大跨度地道桥穿越既有铁道复线线路时,铁道线路架空的安全可靠性要求非常高。若采用传统型钢纵横抬梁法,则安拆复杂、线路线形难保证、施工期间维护工作量大,无法满足既有线施工防护要求;现有的铁路制式D24梁架空线路为单跨架空,跨度无法满足大跨地道桥防护要求;阐述用八三式军用墩杆件组拼横抬梁作中支点,将铁路制式D24梁串联架空线路,不间断铁路行车,顶进双幅分离式斜交大跨度框构桥,为满足类似工程线路架空安拆快速、安全可靠的要求提供了一种新方法。

TBC1D24突变相关家族性婴儿肌阵挛癫痫伴发育迟缓1例及其家系报道

目的探讨1例因TBC1D24基因突变所致的家族性婴儿肌阵挛癫痫患儿的临床表现及其家系研究并进行相关文献回顾。方法收集武汉儿童医院神经内科收治的1例TBC1D24基因突变导致家族性肌阵挛癫痫伴发育迟缓的家系,复习文献资料,总结其临床特征及诊治进展。结果先证者,女,6岁9个月,因"间断抽搐6年余"于2018年7月就诊,患儿2个月大时出现抽搐,抽搐形式为阵发性面色及四肢末端青紫,每天均有发作,3岁时抽搐形式为肌阵挛发作,2~3个月发作1次,多种抗癫痫药物均控制不佳,合并严重智力障碍。查体未见阳性体征,辅检:头颅MRI正常,脑电图示EPC。先证者之弟,男,3岁6个月,抽搐主要表现为双上肢及颜面部不自主抖动,睡眠后缓解,未用抗癫痫药治疗,合并轻度智力障碍。对先证者及其家系进行基因检测发现,先证者有1个基因突变,TBC1D24为复合杂合错义突变(c.1207(exon 6)G>T,p.V403L)、(c.1499(exon 7)C>T,p.A500V),其中前者遗传自父亲,后者遗传自母亲,先证者弟弟具有TBC1D24的相同位点突变。结论TBC1D24是先证者及其弟弟主要致病基因,对于难治性肌阵挛癫痫伴有严重智力障碍的,建议行TBC1D24基因筛查。

陇海铁路立交桥D24便梁施工动力监测试验

陇海线上架设D24施工便梁施工中,采用动力测试的方法对施工进行监测,通过对经过列车的动力响应测试,分析便梁的动力响应,掌握设备的实际工作状态,对施工进行指导,确保加固施工顺利完成。

SY-Z13D24电能表检定装置常见故障及处理

电能表检定装置主要是对电能表进行检定的剂量标准器具,该装置的功能直接影响到电能表检测结果。因此,尤其需要对电能表检定装置的功能与准确性进行检查,以便确保电能表检定的准确性与标准性。目前,SY-Z13D24电能表检定装置的应用比较广泛,但是在运用的过程中通常会出现各种故障以及问题,急需要对其故障进行分析研究,以便制定出解决方案。本文就SY-Z13D24电能表检定装置几种常见故障进行分析,探讨SY-Z13D24电能表检定装置故障的处理措施,从而提高其功能与效率。

D24m施工便梁在小线间距地段的架空顶进施工技术

采用D24m施工便梁在小线间距地段架空顶进大跨度框架桥过程中不能满足限界要求,对便梁安装方式进行改进,在横梁下面事先安装下托牛腿,以确保施工安全。结合实例介绍了采用改进型D24m便梁架空顶进施工方案及关键技术,为D型便梁架空顶进大跨度框架桥施工技术提供了新的思路,达到既安全、可靠又经济的目的,可为类似工程提供指导和借鉴。

KOF(Z)DI8II and KQF(Z)D24II automobile air-conditioner

TheYueyangHengliRefrigeratingEquipmentCo.Ltd.inHunanProvinceobtainedin1997itsIS09001certificationfromChinaandGermanYTheKQF(Z)D2411automobileair-conditioneriscomposedoftWoparts,itscoldvolumeis24KWandcanbeusedforpassengercarswith5to60seats.Theproductsi...

二叔丁基过氧化物的热分解动力学分析及T_(D24)的获取

为研究二叔丁基过氧化物-甲苯体系的热分解特性及其热危险性,采用质量分数20%二叔丁基过氧化物为研究对象,利用绝热加速量热仪(ARC)探究不同升温速率和样品质量对其热分解行为的影响;并分别利用Townsend方法和外推法获取了混合体系达到最大反应速率所需的时间为24 h对应的温度T_(D24),并分析对比了两种方法计算结果的不同之处,为二叔丁基过氧化物的储存、运输和使用安全提出有效参考。

地铁线路下D24低高度便梁施工

本文结合宝城路下穿上海地铁一号线施工实例,总结在地铁线路上施工D24钢便梁的经验,为同类工程提供借鉴。

分析铁路箱涵顶进及D24m便梁线路加固技术

随着经济发展,铁路运输的作用日益凸显,传统的线路加固技术已经不能满足铁路运输事业的发展需求。近年来,国内多条既有线路增建立交桥的加固施工中,均采用D24M便梁加固顶进箱桥技术,并取得了良好的工程实效,不但取得预期效果,还保证了既有线路的行车安全。以下本文对此种技术展开系统分析,希望能为相关工程起到借鉴作用。

TBC1D24基因突变的婴儿局灶性肌阵挛癫痫一例并文献复习

目的探讨TBC1 D24基因突变的婴儿局灶性肌阵挛癫痫患儿的临床特征和基因突变。方法对复旦大学附属儿科医院诊治的1例TBC1D24基因突变的婴儿局灶性肌阵挛癫痫患儿的临床资料进行分析。以“TBC1D24”“癫痫”及“TBC1D24”“Epilepsy”为关键词，对中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据知识服务平台及美国国家生物技术中心（NCBI）、生物医学文献数据库（ Pubmed ）建库至2016年4月收录的论文进行检索。总结TBC1 D24基因突变患儿临床表现及基因突变特点。结果患儿男，入院时2岁3月龄。因“反复抽搐2年”于2015年9月入院，发育较同龄儿迟缓。患儿于3月龄出现局灶性肌阵挛发作，不伴意识障碍，多在入睡后数分钟缓解，持续几小时至十几小时不等，每3-7天发作1次。6月龄出现局灶性肌阵挛继发全面性肌阵挛发作，伴有意识水平下降但未完全丧失，入睡后约半小时左右发作可缓解，每3-4个月发作1次。两种抽搐方式中左右两侧均不固定。入院体格检查发现患儿行走不稳，肌张力偏低，指鼻欠稳、欠快。视频脑电图显示发作期未见明显异常放电。基因突变分析发现患儿TBC1D24基因存在复合杂合错义突变：c．730G〉A，p．A244T和c．1571G〉C，p．R524P，其中前者遗传自父亲，后者遗传自母亲，均为新发突变。应用Polyphen－2和MutationTaster预测显示前者氨基酸序列高度保守和后者氨基酸序列相对保守，均显示潜在的致病性。文献检索共收集9篇文献（均为英文）包括本例患儿共24例患者，共发现10个TBC1D24突变，其中1个为移码突变，1个为终止突变，剩余8个均为错义突变；11例为复合杂合突变，13例为纯合突变。结论不伴意识障碍的婴儿期长程的局灶性肌阵挛发作，病因未明时，建议进行TBC1D24基因检查。

TBC1D24基因相关癫痫的临床表型特点

目的总结TBC1D24基因突变相关癫痫的临床特点。方法回顾性收集2015年3月至2017年7月在北京大学第一医院儿科就诊的TBC1D24基因复合杂合突变的癫痫患儿，总结其临床表现、脑电图及影像学特点。结果共收集TBC1D24基因复合杂合突变的癫痫患儿18例，起病年龄为1日龄~8月龄，中位起病年龄为90日龄。癫痫发作表现中全面强直阵挛发作3例；局灶性发作18例；肌阵挛发作18例，其中17例为局灶性肌阵挛发作且有持续状态。局灶性肌阵挛可表现为一个部位或多个部位同步或不同步快速节律性抽搐，持续时间数分钟至数天不等，所有患儿均有入睡或镇静药物诱导睡眠使发作缓解的特点。11例患儿在感染或发热时易出现发作，其中2例感染期间发作呈持续状态，严重时伴意识障碍。7例患儿头颅磁共振成像有异常，包括大脑皮层或小脑萎缩及小脑异常信号，10例脑电图监测到局灶性肌阵挛发作，但同期未见与发作存在锁时关系的痫样放电。10例患儿有不同程度的智力、运动发育落后，7例正常，1例4月龄因癫痫持续状态死亡。3例患儿有听力障碍。18例患儿中，表型符合婴儿癫痫伴游走性局灶性发作4例，进行性肌阵挛癫痫2例，Dravet综合征和DOORS综合征各1例，不能分类的癫痫性脑病3例。结论TBC1D24基因突变相关癫痫的临床特点为局灶性肌阵挛发作，易发生持续状态，感染时发作易加重，使用镇静剂或睡眠可终止发作；智力、运动发育可正常或落后；影像学可表现为大脑皮层或小脑萎缩及小脑异常信号。

新型重组IL-6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白复性及纯化

目的 :对高效表达的重组IL 6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白进行包涵体的分离、变性与复性以及纯化。方法 :对表达菌体进行超声破碎、洗涤、氧化还原法变性及复性 ,经离子交换层析。结果 :工程菌HB10 1/ pE0 1T的表达产物是以包涵体形式存在 ,菌体的破碎以高渗蔗糖溶液进行预处理后 ,再超声破碎效果最好 ;包涵体的洗涤则先用Triton X 10 0洗 2次 ,再用 8mol/L尿素洗涤一次效果更优 ;最佳变性条件为在 7mol/L盐酸胍中加入0 .0 6 5mmol/L的DTT和 0 .2mol/L的盐酸精氨酸 ;最佳复性条件为在 10℃复性保持 2 4h ,蛋白浓度保持在 30～80 μg/ml,并需加入 0 .2mol/L盐酸精氨酸 ;利用谷胱甘肽的氧化还原法 ,当氧化型谷胱甘肽与还原型谷胱甘肽的浓度比在 2∶1时所获得的活性成分得率最高 ;利用强弱离子交换结合的方法能获得纯度为 95 %的目的蛋白 ,所得融合蛋白可与IL 6及PEA抗体相结合并能特异性地杀伤高表达IL 6R的人多发性骨髓瘤细胞。结论 :本研究获得重组IL 6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白包涵体的分离、变性与复性条件和一条能获得大量高纯度该融合蛋白的纯化路线。

生酮饮食治疗TBC1D24基因相关婴儿癫痫伴游走性局灶性发作二例并文献复习

目的探讨生酮饮食治疗TBC1D24基因相关婴儿癫痫伴游走性局灶性发作(EIMFS)的疗效与安全性。方法回顾性收集2019—2020年就诊于福建医科大学附属协和医院儿科的2例TBC1D24基因相关EIMFS患儿的临床资料,总结其临床特点及生酮饮食治疗情况,并进行文献复习。结果2例癫痫患儿均在6月龄前发病,表现为多灶性的局部肌阵挛发作、癫痫持续状态,临床发作频繁,伴有明显的精神运动发育落后。发作间期脑电图可见少量局灶性尖波、棘波、尖慢复合波、棘慢复合波发放。基因检测结果为TBC1D24基因突变,1例为复合杂合突变(c.1025C>T,p.S342L;c.229_c.240delATCGTGGGCAAG,p.I77_K80del),1例为纯合突变[c.119G>A,p.R40H(Arg40His)]。2例患儿经多种抗癫痫药物治疗效果不佳,为药物难治性癫痫。生酮饮食治疗4~17个月后,癫痫得到有效控制,未出现明显不良反应。通过文献复习,发现在6例TBC1D24基因相关EIMFS患儿中,4例经生酮饮食治疗有效或部分有效,1例因生酮比例不足而中止,1例未见明显效果而中止,均无明显不良反应。结论TBC1D24基因相关EIMFS多为药物难治性癫痫,尽早采用生酮饮食治疗可能有助于癫痫控制。