血清VEGF、G-CSF、sTREM-1与急性心肌梗死患者PCI术后支架内再狭窄的相关性研究

目的探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)与急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后支架内再狭窄(ISR)的关系。方法选取商丘市第一人民医院2020年2月—2021年3月行PCI术治疗且完成随访的100例AMI患者为研究对象,根据PCI术后12个月造影复查结果分为ISR组(n=24,支架内狭窄程度≥50%)和非ISR组(n=76,支架内狭窄程度<50%)。比较两组一般临床资料、术后1 d及7 d血清VEGF、G-CSF、sTREM-1水平,Logisitc回归分析影响ISR发生的危险因素,以及各指标不同水平对发生ISR的危险度。结果ISR组糖尿病率、冠状动脉多支病变率较非ISR组高(P<0.05);ISR组术后1 d、7 d血清VEGF、G-CSF较非ISR组低,sTREM-1水平较非ISR组高(P<0.05);Logistic回归分析显示,糖尿病、冠状动脉病变支数、术后1 d及7 d血清VEGF、G-CSF、sTREM-1水平均是影响AMI患者PCI术后发生ISR的因素(P<0.05);术后1 d、7 d,血清VEGF、G-CSF、sTREM-1高水平患者发生ISR的危险度均较低水平者高。结论监测AMI患者PCI术后血清VEGF、G-CSF、sTREM-1表达水平对预测ISR发生具有一定价值。

G-CSF、PLGF和PTX3在肺炎患儿血清中的表达及与肺通气功能的关系分析

目的 探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、胎盘生长因子(PLGF)和血清正五聚蛋白3(PTX3)在肺炎患儿血清中的表达及与肺通气功能的关系。方法 本研究以河南大学第一附属医院2021年1月~2023年3月进行治疗的小儿肺炎患者110例作为研究对象,设为观察组,并按照《儿童社区获得性肺炎管理指南(2013修订)》标准,分为轻症组(46例)和重症组(64例)。另选取同期进行健康体检志愿者110例作为对照组,分别对两组的肺活量(FVC)、第一秒用力呼气容积(FEV1)、第一秒用力呼气容积百分比(FEV1%)、G-CSF、PLGF和PTX3进行比较。进一步比较轻症组及重症组患儿之间的FVC、FEV1、FEV1%、G-CSF、PLGF和PTX3差异。采用spearman相关性分析FEV1、FEV1%、FVC与G-CSF、PLGF、PTX3的相关性。结果 观察组患儿的FEV1、FEV1%、FVC均显著低于对照组(P<0.001);重症组患儿的FEV1、FEV1%、FVC均显著低于轻症组(P<0.001);观察组患儿PTX3、G-CSF均显著高于对照组,PLGF低于对照组(P<0.001);重症组患儿PTX3、G-CSF均显著高于轻症组,PLGF低于轻症组(P<0.001);spearman相关性分析显示患儿FEV1、FEV1%、FVC与PTX3、G-CSF呈负相关,与PLGF呈正相关。结论 G-CSF、PLGF和PTX3在肺炎患儿血清中的表达与肺通气功能呈现显著的相关性,可作为病情严重程度判定以及治疗效果分析的重要参考。

DA-EPOCH化疗联合G-CSF有效动员非霍奇金淋巴瘤患者自体外周血造血干细胞

目的:探讨CTX+G-CSF和DA-EPOCH+G-CSF方案对非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者外周血干细胞动员采集及造血恢复的效果。方法:回顾性分析我科收治的40例NHL患者分别采用CTX+G-CSF及DA-EPOCH+GCSF方案进行外周血造血干细胞(PBSC)动员、采集,并予BEAM方案预处理后回输自体外周血干细胞,分析动员效果、不良反应及自体移植后造血恢复情况。结果:CTX+G-CSF组动员期间1例患者外周血白细胞(WBC)计数降至0.8×10~9/L,其余WBC数最低值均>2.0×10~9/L,3例血小板数降至80×10~9/L左右,其余患者血小板数均正常,单次采集物CD34^+细胞比例中位数0.99(0.35-1.30)%,共采集单个核(MNC)数(3.80±2.05)×10~10~,累计MNC(5.84±2.48)×10~8/kg,CD34^+细胞数中位数3.84(3.91-6.5)×10~6/kg。DA-EPOCH+G-CSF组动员期间患者外周血白细胞(WBC)计数最低降至(0.2-1.4)×10~9/L,1例血小板(Plt)数最低为8×10~9/L,其余均在40×10~9/L以上,单次采集物CD34^+细胞比例中位数0.85(0.34-1.2)%,共采集MNC中位数(3.68±1.56)×10^(10),累计MNC数(6.01±2.26)×10~8/kg,CD34^+细胞数中位数4.44(2.7-7.10)×10~6/kg。2组患者采集物CD34^+细胞比例中位数、总MNC中位数,累计每公斤体重MNC数及CD34^+细胞数中位数比较无统计学差异(P>0.05)。CTX+G-CSF组自体干细胞移植后粒细胞植活平均时间为10.00(9.00-11.00)d,血小板植活平均时间为12.00(11.00-13.50)d;DA-EPOCH组自体干细胞移植后粒细胞植活平均时间为10.00(9.00-11.00)d,血小板植活平均时间为12.50(11.00-17.25)d,2组比较无统计学差异(P>0.05),在移植过程中无死亡病例。结论:DA-EPOCH联合G-CSF方案可有效动员NHL患者的外周血干细胞,安全性高,且经济实惠。

G-CSF联合GM-CSF及高剂量G-CSF治疗急性髓系白血病化疗后中性粒细胞缺乏的疗效观察

目的:探讨高剂量G-CSF方案和G-CSF联合GM-CSF方案治疗及预防急性髓细胞白血病化疗后粒细胞减少的临床疗效与安全性。方法:回顾性分析53例接受化疗的急性髓系白血病患者,对比常规剂量G-CSF、高剂量G-CSF以及G-CSF联合GM-CSF在化疗后的应用,观察中性粒细胞绝对值、中性粒细胞减少持续时间、中性粒细胞减少伴发热发生概率及各组治疗不良反应的区别。结果:高剂量G-CSF组与G-CSF联合GM-CSF组较标量G-CSF组中位ANC减少的持续时间明显缩短,中性粒细胞减少合并感染的发生率明显减少,高剂量G-CSF组与G-CSF联合GM-CSF组之间无统计学差异,三组之间安全性相仿。结论:G-CSF联合GM-CSF方案以及高剂量G-CSF方案治疗及预防急性髓细胞白血病化疗后粒细胞减少安全有效。

细菌性肺炎患儿肠道微生态及其与血FOXP3、G-CSF水平的关系

目的 研究细菌性肺炎患儿肠道微生态及其与血清转录因子叉头蛋白(FOXP3)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(G-CSF)水平的关系。方法 选择细菌性肺炎患儿120例为肺炎组,其中轻度组55例,重度组65例,另选取同期健康体检患儿120例为对照组。比较各组肠道微生物、血清FOXP3、G-CSF水平,分析肠道微生物与FOXP3、G-CSF水平的相关性。结果 肺炎组乳杆菌、双歧杆菌、肠球菌及真杆菌水平低于对照组;重度组乳杆菌、双歧杆菌、肠球菌及真杆菌低于轻度组;肺炎组FOXP3、G-CSF高于对照组,重度组FOXP3、G-CSF高于轻度组(P<0.05)。双歧杆菌、肠球菌、乳杆菌及真杆菌与FOXP3、G-CSF呈负相关(P<0.05)。结论 细菌性肺炎患儿肠道微生态与肺炎病情程度有关,且与血清FOXP3、G-CSF呈负相关。

G-CSF动员循环间充质干细胞及其对小鼠颅脑损伤修复的可行性分析

目的建立小鼠严重颅脑创伤模型探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)动员循环间充质干细胞(mesenchym alstem cells,MSCs)的可行性,并观察G-CSF动员的修复效应。方法以G-CSF作为动员剂,培养骨髓和外周血来源的MSCs,计数动员前后的CFU-F。制作小鼠严重颅脑创伤模型,致伤后采用G-CSF对MSCs进行动员,在2、24、48、96、120、144、192、264、336h进行神经行为学评分、运动功能评分,并观察小鼠死亡率和病理组织切片。结果从小鼠外周血培养出MSCs,G-CSF动员后骨髓和外周血MSCs的CFU-F数量显著高于正常对照组(P<0·01)。致伤后小鼠神经行为学和运动功能评分显著低于正常对照组(P<0·01),创伤治疗组在144～192h期间评分显著高于创伤组(P<0·05)。致伤后小鼠死亡率增高,病理切片可见创伤处有出血和空泡。结论成功培养及用G-CSF动员了外周血MSCs,在成功建立小鼠严重颅脑创伤模型的基础上,显示G-CSF动员可以降低严重颅脑创伤小鼠死亡,参与了创伤修复。

G-CSF动员的骨髓及外周血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

采用G CSF动员的骨髓以及外周血造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血 (SAA)。共有 10例重型再生障碍性贫血患者接受了G CSF动员的骨髓以及外周血造血干细胞移植 ,回顾性分析植入情况、植入速度及急慢性移植物抗宿主病 (GVHD)发生率等。所有患者移植后均获得造血重建。中性粒细胞计数 (ANC) >0 5× 10 9L- 1 的中位时间为 13 2d(8～ 18) ,血小板 >2 0× 10 9L- 1 的中位时间为 2 2 2d(10～ 10 8)。 8例获得异体植入的患者中 3例发生Ⅰ Ⅱ度皮肤急性GVHD ,发生 5例慢性GVHD。至随访截止 ,中位随访 775d(2 10～ 14 2 9) ,所有 10例患者均无病存活(DFS)。因此我们认为G CSF动员的骨髓及外周血干细胞移植是治疗SAA的有效方法 ,可获得快速、持久植入 ,而不增加急性和慢性GVHD的发生率。

供者使用G-CSF与受者加用ATG和霉酚酸酯的单倍体相合骨髓移植

为了探讨供者应用G CSF与受者加用抗胸腺细胞球蛋白 (ATG)与霉酚酸酯 (MMF)HLA单倍体相合未去T细胞骨髓移植的可行性 ,对 1 7例白血病病人进行HLA 2 - 3个位点不匹配的相关供者的骨髓移植。 1 7例病人中 1 1例急性淋巴细胞白血病 (CR2 6例 ,>CR2 4例 ,复发状态 1例 ) ,2例急性非淋巴细胞白血病 (CR1 1例 ,CR21例 ) ,4例慢性粒细胞白血病 (慢性期 2例 ,加速期 2例 )。预处理方案是阿糖胞苷 3 0 g/m2 ,2次 /日 ,连用 3天 (于移植前 7至 5天 )、环磷酰胺 45mg/ (kg·d) ,连用 2天 (于移植前 5天和移植前 4天 )和全身照射 1 0Gy ,分 2次 (于移植前 2天和移植前 1天进行 )。供者应用G CSF 2 50 μg/d ,连用 7日后采髓 ;预防GVHD除应用CSA和MTX外 ,在移植前 4至 1天应用ATG 5mg/ (kg·d) ,移植后 7天开始每天加用霉酚酸酯 1 0 g ,连用 1 0 0天。结果表明 :1 7例移植后均取得植入 ,中性粒细胞 >0 5× 1 0 9/L的中位天数是 1 8(1 3 - 2 3)天 ,血小板 >1 0× 1 0 9/L的中位天数是 2 0 (1 6 - 32 )天。Ⅱ -Ⅳ度急性GVHD病人 5例 (2 9 4% ) ,其中 2例肠道Ⅱ度急性GVHD ,2例肠道Ⅲ度急性GVHD ,1例肝和肠道Ⅳ度GVHD。可评价的慢性GVHD病例 9例 ,均发生慢性局限性GVHD。未发生移植方案相关Ⅲ级以上的毒性。中位随访?

PEG-rhG-CSF与G-CSF预防及治疗化疗后中性粒细胞缺乏的效果比较

目的:回顾性分析PEG-rhG-CSF与G-CSF在淋巴瘤化疗后中性粒细胞缺乏预防中的作用,及其不良反应对比。方法:回顾性选取诊断明确的淋巴瘤患者共78例,其中在淋巴瘤化疗后立即给予PEG-rhG-CSF预防中性粒细胞缺乏的患者42例(实验组),另外36例患者则是在出现中性粒细胞缺乏后给予G-CSF治疗(对照组),直至粒细胞>2.0×10^(9)/L。对比PEG-rhG-CSF与G-CSF在化疗后粒细胞缺乏中的预防及治疗作用,观察中性粒细胞平均最低值,中性粒细胞缺乏的持续时间,以及4级FN的发生概率,并观察两组发热、肺内感染、感染相关指标以及不良反应的发生概率。结果:两组患者的化疗前KPS评分无统计学差异,中性粒细胞平均最低值在对照组明显低于实验组,中性粒细胞缺乏的持续时间在实验组明显缩短,4级FN的发生率在实验组明显降低,并且不良反应在两组无明显差异。结论:PEG-rhG-CSF与G-CSF比较,在不增加不良反应的同时,缩短了中性粒细胞缺乏的持续时间及4级FN的发生概率,降低了感染的概率,减轻了患者的痛苦,增加了患者的依从性。

IL-3、G-CSF拮抗Ara-c诱导的白血病细胞凋亡的研究

目的：研究不同Ａｒａｃ浓度时白血病细胞凋亡的情况和ＧＣＳＦ、ＩＬ３＋ＧＣＳＦ对其的拮抗作用。方法：分别用不同剂量Ａｒａｃ诱导白血病细胞凋亡，同时加ＧＣＳＦ、ＩＬ３＋ＧＣＳＦ作为拮抗剂，分ＧＣＳＦ、ＩＬ３＋ＧＣＳＦ、Ａｒａｃ三组。通过形态学、ＤＮＡ电泳、蛋白电泳免疫印迹法观察白血病细胞的凋亡情况。结果：随着Ａｒａｃ剂量的增加，凋亡细胞数增高。ＧＣＳＦ能拮抗低剂量及常规剂量Ａｒａｃ诱导的凋亡，但不能完全拮抗中剂量Ａｒａｃ，而ＩＬ３＋ＧＣＳＦ能拮抗中剂量Ａｒａｃ。Ｂｃｌ２表达蛋白ＩＬ３＋ＧＣＳＦ组高于ＧＣＳＦ组，ＧＣＳＦ组高于Ａｒａｃ组。结论：ＩＬ３、ＧＣＳＦ能拮抗Ａｒａｃ诱导的白血病细胞凋亡。调节Ｂｃｌ２基因的表达是细胞因子拮抗凋亡的机制之一。临床应合理、适时地使用细胞因子。

G-CSF预处理供者的HLA相合同胞异基因骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病研究(英文)

为了评价供者应用G-CSF的骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病的临床疗效,用HLA相合的、混合淋巴细胞培养阴性的同胞供者骨髓,对单一病种慢性粒细胞白血病行移植治疗.供者应用G-CSF 250微克/天,连用7天后供髓的32例为研究组,对照组18例常规采髓移植,在预处理方案,GVHD预防和支持治疗方法相同的情况下,比较研究组和对照组移植后在加速造血重建,降低GVHD发生和延长无病生存的疗效.移植结果显示,供者应用G-CSF在慢性粒细胞白血病移植中造血重建加速,中性粒细胞＞0.5×109/L和血小板＞20×109/L的中位天数分别是第15(10-22)天和第17.5(13-28)天,对照组是第21和24天(P＜0.01),研究组发生急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD2例(6.3%),对照组5例(27.8%),通过比较,两组差异有显著性(P＜0.05),慢性GVHD发生分别是24%和33.3%(P＞0.05).研究组移植相关死亡、复发和无病生存与对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论:使用G-CSF动员供者的HLA相合的异基因骨髓移植,造血重建加快和重度急性Ⅱ-Ⅳ度GVHD减轻,有可能提高CML移植的无病生存率.

G-CSF基因治疗及配合大剂量化疗对结肠癌小鼠的治疗作用

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)具有明显的促进粒系造血祖细胞分化成熟、有效地提高外周血白细胞数量的作用;体内单独应用还具有抑制肿瘤的生长、抗肿瘤转移的作用。为了探讨G-CSF基因治疗及其配合大剂量化疗后的体内抗肿瘤效果,我们以C-26结肠癌小鼠为模型,研究腹腔内移植成纤维细胞介导的G-CSF基因治疗,rhG-CSF直接注射治疗,以及分别配合化疗后对肿瘤的治疗作用。结果发现,rhG-CSF直接注射疗法可明显抑制早期结肠癌小鼠肿瘤的生长(P<0.01),明显延长早期荷瘤小鼠的存活期;G-CSF基因治疗可明显抑制早期、中期结肠癌小鼠肿瘤生长(P<0.01),明显延长早期、中期结肠癌小鼠的存活期(P<0.01)。配合大剂量化疗后,rhG-CSF注射疗法及G-CSF基因疗法可更明显地抑制结肠癌小鼠肿瘤的生长,更明显延长结肠癌小鼠的存活期。结果表明,G-CSF基因疗法可有效地延长结肠癌小鼠的存活期,配合大剂量化疗能更有效地发挥抗肿瘤作用,提高结肠癌小鼠的存活期;同时表明,G-CSF基因治疗具有比应用rhG-CSF更显著的体内抑制肿瘤的效果。

G-CSF促进造血功能恢复及其机理的研究

研究了粒细胞集落生长因子（G－CSF）促进受辐射小鼠造血功能恢复的作用，并对机理进行了初步探讨。结果表明：G－CSF不仅可以促进受辐射小鼠外周血细胞的恢复；促进脾脏内源性脾结节的形成，而且可以增加骨髓细胞含量和促进骨髓细胞巨噬系造血祖细胞（CFU－GM）的形成，提高受辐射小鼠的生存率，其促进辐射后机体造血功能恢复的机理是通过刺激照射后残余造血于细胞的增殖、分化，该过程需要一段较长的时间，而不是抑制照射后即刻细胞的程序性死亡。

有氧运动和G-CSF干预对心梗大鼠心肌细胞再生的影响及其机制探讨

目的:探讨有氧运动和G-CSF干预对心梗(MI)大鼠心肌细胞再生和心功能提升的影响及其可能机制。方法:雄性SD大鼠,体重180～220g,建立MI模型。术后1周将存活大鼠随机分为假手术组(Sham组)、心梗组(MI组)、心梗+运动组(ME组)、心梗+动员剂组(MG组)和心梗+动员剂+运动组(MGE组),每组15只。ME和MGE组进行8周跑台有氧运动。8周后测定心功能,进行组织学染色,检测细胞增殖和干细胞趋化相关因子的表达。结果:与Sham组比较,MI组心肌出现替代性纤维化,心功能显著下降,心肌中PCNA、Ki-67和VLA-4表达增多(P<0.01),GATA 4mRNA和蛋白表达下降(P<0.01,P<0.05);与MI组比较,ME、MG和MGE组梗死区心肌纤维化程度减轻,心功能显著提升,梗死面积显著缩小(P<0.05),心肌中PCNA、Ki-67、c-kit、CD29、CXCR4和VLA-4蛋白的表达显著增加;且二者联合干预使LVEDP下降和梗死面积缩小更为显著(P<0.05),细胞增殖和干细胞趋化相关因子表达增加优于单一因素。结论:有氧运动和/或G-CSF干预均可缩小梗死面积,有效提升大鼠心功能;发现有氧运动和G-CSF干预可有效促进MI后心肌细胞增殖及成体干细胞动员、归巢和分化,且二者联合干预效果更为显著。

牛乳腺直接注射重组质粒表达人G-CSF的研究

以乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因５′区为调控序列，人基因组ＧＣＳＦ基因为目的片段，构建成转基因动物乳腺表达载体，将其直接注射到泌乳牛乳腺，在乳汁中表达出人ＧＣＳＦ。表明乳腺直接注射质粒的方法可以作为暂时性的一种表达系统，对开发新的重组蛋白生产体系有一定指导意义。

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)在大肠杆菌中的高效表达及快速纯化工艺的建立

基因工程重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）主要用于癌症患者化疗后的粒细胞减少症．在正确克隆人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ的基础上，重点对Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ的５′端进行了较为彻底的修饰，修饰后的基因插入ｐＢＶ２２０载体组建成功ｐＢＶ２２０／Ｇ－ＣＳＦ／２－１７４高效表达载体．表达后ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析其表达最高达５０％以上．根据Ｇ－ＣＳＦ表达形成包涵体这一特性，建立了一条简便、稳定，适用于大规模生产的分离纯化工艺流程．首先分离纯化包涵体，８ｍｏｌ／Ｌ尿素裂解包涵体，稀释复性蛋白，之后一步ＳＰ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ柱层析至均质．纯化的Ｇ－ＣＳＦ比活性达３．４×１０８Ｕ／ｍｇ蛋白，每升表达菌液回收的Ｇ－ＣＳＦ总活性达１．０６×１０１１Ｕ．纯化产物的Ｎ－端氨基酸序列分析表明，对甲硫氨酸的去除彻底。

瘤体内注射G-CSF基因诱导肿瘤细胞凋亡及局部病理分析

目的：探讨瘤体内脂质体直接介导的Ｇ－ＣＳＦ基因治疗的抗肿瘤机制。方法：将脂质体包裹的Ｇ－ＣＳＦ基因直接注射结肠癌瘤体内，通过流式细胞仪（ＦＡＣＳ）分析Ｇ－ＣＳＦ基因治疗后肿瘤细胞ＤＮＡ的变化，并对瘤体进行病理分析。结果：瘤体内注射脂质体包裹的Ｇ－ＣＳＦ基因后，可诱导结肠癌细胞凋亡；瘤体中有大量炎性细胞浸润，以淋巴细胞和中性粒细胞为主。结论：瘤体内脂质体直接介导的Ｇ－ＣＳＦ基因治疗能有效地诱导肿瘤细胞的凋亡，并能明显提高肿瘤局部浸润的免疫细胞数量。

人G-CSF转基因鼠的稳定遗传与表达

利用人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）基因组基因作为目的片段，将其受控于２．６ｋｂ的小鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的调控区下，通过显微注射法获得了两只整合有人Ｇ－ＣＳＦ转基因小鼠，通过繁殖建立了稳定的转基因系．一些表型参数测定表明转基因鼠与正常鼠无明显差别．通过ＲＴ－ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测，在乳腺表达出人Ｇ－ＣＳＦ，为乳腺表达外源蛋白质及今后大动物研究奠定了基础．