大孔树脂DA201-C对猪血红蛋白ACE抑制肽吸附性能的研究

以猪血红蛋白的胃蛋白酶水解液为原料,通过静态和动态实验,对适合分离纯化猪血红蛋白ACE抑制肽的大孔树脂进行筛选,并确定最佳的分离纯化工艺参数。结果表明:DA201-C分离纯化猪血红蛋白ACE抑制肽的效果最好;动态实验最佳工艺参数为上样质量浓度40mg/mL、pH5.0、上样流速0.5mL/min、上样量60mL;洗脱液乙醇体积分数75%,洗脱流速1.0mL/min,在此条件下,分离得到的猪血红蛋白ACE抑制肽样品的IC50为0.87mg/mL。同时,对DA201-C大孔树脂进行静态吸附-解吸实验和动态吸附-解吸实验的进行了比较,结果表明:大孔树脂静态吸附率为59.4%,大于其动态吸附量48.1%。

大孔吸附树脂对鱼鳞多肽的分离及吸附特性研究

本文主要从分子极性以及热力学角度研究了大孔吸附树脂对具有血管紧张素转化酶(Angiotensin-I converting enzyme,ACE)抑制活性的鱼鳞多肽的分离及吸附作用。采用不同浓度的乙醇(20%,40%,60%,80%,v/v)对吸附鱼鳞多肽的大孔树脂进行洗脱,得到不同极性的洗脱组分,各组分之间相对分子质量的大小没有显著的差别,但各组分ACE抑制活性差异显著。当乙醇浓度从20%增加到80%时,各洗脱组分对应的IC50值分别为:0.53、0.40、0.27和0.12mg/mL。吸附热力学实验结果表明大孔吸附树脂对具有ACE抑制活性的鱼鳞多肽的吸附过程是热推动的,升高温度有利于鱼鳞肽的吸附,DA201-C大孔吸附树脂对具有ACE抑制活性的鱼鳞多肽的吸附作用力主要是疏水相互作用。

D201大孔吸附树脂对料酒中蛋白质的吸附平衡及热力学与动力学研究

采用静态吸附方法,研究了料酒中蛋白质在D201大孔吸附树脂上的吸附等温曲线以及吸附热力学与动力学。结果表明,料酒中蛋白质在D201大孔吸附树脂上的吸附符合Langmuir模型(R^(2)>0.98),蛋白质在树脂上的吸附为吸热过程,其传质速率随温度的升高而增加,最大吸附量为112.26 mg/g;热力学研究结果表明,整个吸附过程为自发吸热的物理吸附;吸附动力学研究结果表明,料酒蛋白质的吸附动力学符合拟二阶动力学模型,Weber-Morris颗粒内扩散方程进一步表明,D201树脂对料酒中蛋白质的吸附行为可分为薄膜扩散和颗粒内扩散两个阶段。

大孔树脂吸附分离蚕蛹ACE抑制肽的研究

为了找出大孔树脂纯化蚕蛹ACE抑制肽的方法。比较了5种大孔树脂在纯化蚕蛹ACE抑制肽时的吸附率和解吸率,得出DA201-C分离蚕蛹ACE抑制肽的效果最好。再进一步考察上样流速、上样浓度、分级洗脱等对DA201-C大孔树脂吸附及分离效果的影响。最终结果为75%乙醇洗脱下的多肽的ACE抑制率最高,其IC50为0.632mg/mL,并且发现疏水性与ACE抑制率呈正相关。

D201树脂对水杨酸的吸附热力学与动力学

以D201大孔阴离子交换树脂对水溶液中水杨酸的吸附热力学和动力学特性进行了研究。结果表明:在pH=3~12时,吸附能力最好。等温吸附服从Freundlich经验式。在298~318K条件下,水杨酸吸附量为100~120 mg/g的吸附焓变为-7.38^-5.00 kJ/mol、自由能变为-8.46^-9.37 kJ/mol、吸附熵变为3.62~13.74 J/(K.mol)。吸附动力学符合Lagergren一级速率方程,吸附速率常数为0.0472~0.124/min,吸附活化能为38.1 kJ/mol。颗粒内扩散是速率控制步骤之一,膜扩散也共同影响着吸附过程。303 K下用5%NaCl+2%NaOH溶液可定量洗脱,洗脱率达99%。

大孔吸附树脂吸附分离谷氨酸的研究

对D201型大孔强碱性阴离子交换树脂从谷氨酸溶液中交换分离谷氨酸进行了研究。该法是利用特定的有机高分子树脂对谷氨酸盐的高选择性将谷氨酸从发酵液中提取出来。实验证明,在中性条件下树脂对谷氨酸具有良好的吸附性能,吸附速度很快,在10 min左右就可以达到吸附平衡,谷氨酸溶液浓度为100 g.L-1时,静态吸附率可达到97.9%,最大静态吸附量为1704.7 mg,并且其它离子对吸附的干扰很小,为从谷氨酸发酵液中分离回收谷氨酸方法提供了实验依据。

土鳖虫酶解液DA201-C不同洗脱部位溶栓活性药效学筛选

目的:通过对土鳖虫酶解液不同DA201-C大孔树脂洗脱部位进行溶栓活性的药效学筛选,筛选其强活性部位。方法:以凝血块体外溶解率;角叉菜胶血栓模型24、48 h黑尾长度及黑尾形成率及72 h眼眶取血凝血时间为检测指标,利用角叉菜胶诱发小鼠血栓模型进行筛选。结果:75%乙醇洗脱部位能够显著地增加凝血块体外溶解率、缩短大鼠黑尾长度、延长小鼠凝血时间。结论:土鳖虫酶解液DA201-C型大孔树脂75%乙醇洗脱部位具有明显的溶栓活性。

大孔吸附树脂分离魔芋飞粉中ACE抑制肽工艺研究

采用大孔吸附树脂对魔芋ACE抑制肽进行分离,比较3种大孔吸附树脂对魔芋飞粉中ACE抑制肽的静态吸附和解吸效果,从中筛选出适合该魔芋ACE抑制肽分离纯化的树脂。结果表明,DA201-C型树脂最适合魔芋飞粉中ACE抑制肽的纯化。通过对影响树脂吸附解吸的各种因素进行系统地研究,确定工艺参数。最佳工艺参数为上样浓度8 mg/mL、pH 2.0、上样量8 mL、洗脱液乙醇体积分数80%、洗脱流速1.0 mL/min、洗脱时间2 h,在此条件下,分离得到的魔芋ACE抑制肽的抑制率为95.19%。

茶多糖脱色的研究

研究了7种离子交换树脂和吸附树脂对茶多糖溶液中的色素脱除的影响,筛选出3种树脂非极性大孔吸附树脂DA201C、大孔弱碱性的阴离子交换树脂D301G和D315,通过单因素试验和正交试验对脱色条件进行优化。研究发现,采用树脂D315,在pH=45,T=55℃下,茶多糖溶液的脱色率可达到8982%,多糖保留率为6486%,蛋白质去除率9395%。茶叶中的色素可能主要以带负电荷的非极性小分子色素为主。

油橄榄叶中羟基酪醇的提取及分离纯化

对油橄榄叶中的羟基酪醇进行提取及分离纯化。采用酶法对油橄榄叶中的羟基酪醇进行提取,大孔吸附树脂分离纯化。通过单因素实验和正交实验得到酶法提取羟基酪醇的最佳工艺为:酶解时间80 min,pH值为7,温度40℃,酶浓度为30μg/mL,在此条件下得到的羟基酪醇含量为3.72 mg/g。静态吸附实验筛选出DA-201大孔吸附树脂为分离纯化羟基酪醇的最佳树脂,动态吸附-脱附实验得到羟基酪醇分离纯化的最佳工艺为:上样液质量浓度为60μg/mL,上样流速为3 BV/h,脱附剂为体积分数80%的乙醇,脱附流速为3 BV/h,脱附剂用量为2 BV。按照以上最佳实验条件操作,1 g油橄榄叶可得到羟基酪醇总油状物为3.85 mg,纯度为87.01%。

蜣螂中间体的大孔树脂纯化工艺优选及检测

目的:优选蜣螂提取物的DA201-C型大孔树脂纯化工艺。方法:采用单因素试验考察DA201-C型树脂的吸附性能和影响纯化工艺的pH、洗脱剂、上柱流速等因素;采用氨基酸自动分析仪检测纯化后的中间体。结果:最佳纯化工艺条件为上样液质量浓度17.60 g.L-1,吸附流速2 BV.h-1,pH 4.0,依次用1 BV水和4 BV 70%乙醇洗脱,脱盐率达98.81%,多肽回收率达87.39%,所得醇洗脱物含结合型氨基酸(多肽)32.26%。结论:该工艺分离效果较好,可用于蜣螂中间体的脱盐与纯化。

地龙酶解液纯化工艺研究

目的:采用3种大孔树脂对地龙酶解液进行纯化,筛选出最佳纯化树脂,并建立最佳纯化方法。方法:采用双酶酶解方法对地龙进行酶解得到地龙酶解液,同时对DA201-C、AB-8、D1013种大孔树脂进行考察,得到最佳吸附树脂,同时对树脂进行系统考察得到最佳吸附条件。结果:通过考察得出3种树脂的吸附率顺序为DA201-C>AB-8>D101,说明DA201-C树脂对地龙酶解液活性肽吸附效果最佳,同时对DA201-C树脂进行静态和动态吸附考察,得出最佳吸附条件为:酶解液浓度为20 mg/mL,调节pH至6.0,以2 BV/h的流速往DA201-C树脂上上样,以A220nm>0.10为上样终点,静态吸附3 h,最终有效成分吸附率为89.65%。结论:采用DA201-C树脂对地龙酶解液进行处理方法科学合理,利于后期实验进行。