DARS2调控EGFR促进膀胱癌的EMT、迁移及侵袭

目的探讨线粒体天冬氨酰-tRNA合成酶2(DARS2)对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)、迁移及侵袭的作用及其机制。方法利用TIMER和GEPIA数据库分析DARS2在膀胱尿路上皮癌(BLCA)中的表达及其与临床病理分期的关系。RT-qPCR检测人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,膀胱癌细胞5637、T24和TCCSUP中DARS2 mRNA水平。TCCSUP细胞分为:control组(未转染)、si-NC组(转染阴性对照siRNA)、si-DARS2-1组(胞转染DARS2 siRNA-1)、si-DARS2组(转染DARS2 siRNA-2)、si-DARS2+Vector组(转染DARS2 siRNA-2+空载质粒)和si-DARS2+OE-EGFR组(转染DARS2 siRNA-2+EGFR过表达质粒)。Western blot检测DARS2,EMT标志蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及EGFR的表达水平。Transwell侵袭和细胞划痕实验分别检测细胞侵袭能力和迁移能力。结果DARS2 mRNA水平在BLCA中显著上调,并与病理分期正相关(F=3.57,P=0.0289)。与永生化人正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞相比,DARS2在5637、T24和TCCSUP膀胱癌细胞中表达水平显著升高(P<0.05)。与si-NC组相比,si-DARS2组中E-cadherin表达水平显著上调(P<0.05),N-cadherin、Vimentin和EGFR蛋白表达水平显著下调(P<0.05);与si-NC组相比,si-DARS2组细胞侵袭数目和细胞迁移率显著降低(P<0.01)。与si-DARS2+Vector组相比,si-DARS2+OE-EGFR组E-cadherin蛋白表达水平显著下降(P<0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞侵袭数目和细胞迁移率显著增加(P<0.01)。结论敲低DARS2通过下调EGFR表达抑制膀胱癌的EMT、侵袭及迁移。

DARS2在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响

目的探究线粒体天冬氨酰-tRNA合成酶2(aspartyl-tRNA synthetase 2,mitochondrial,DARS2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及生物学意义。方法采用多种数据库分析DARS2在NSCLC的两种亚型肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)和肺鳞癌(lung squamous cellcarcinoma,LUSC)中的表达水平、预后价值、临床病理分期相关性、突变及甲基化水平和富集通路。通过划痕实验和CCK-8实验进一步分析DARS2对NSCLC细胞增殖和迁移能力的影响。结果通过GEPIA、GEO及HPA数据库分析发现,DARS2 mRNA和蛋白质表达水平在LUAD与LUSC中均显著上调,并与LUAD病理分期呈正相关。生存分析结果表明,DARS2过表达可显著缩短LUAD患者生存期。cBioPortal分析结果显示,DARS2在LUAD与LUSC中变异率分别为16%和18%。UALCAN数据库甲基化分析结果显示,DARS2启动子区域甲基化水平在LUAD中显著降低,而在LUSC中显著升高。Metascape数据库富集分析结果显示,与DARS2相关的基因在LUAD和LUSC中均主要在细胞周期通路高度富集。划痕实验和CCK-8实验结果显示,敲低DARS2能显著抑制H1299细胞增殖和迁移能力。结论DARS2在LUAD与LUSC中均过表达,其可能以参与调控细胞周期通路方式促进NSCLC细胞增殖和迁移。

拟南芥DA1-Related Protein2基因参与调控植物对盐胁迫的响应

土壤盐渍化是目前农业生产面临的主要问题之一,同时种子萌发转绿作为植物幼苗形态建成的基础对盐胁迫最为敏感。本研究以Col-0、Ler野生型拟南芥和osr1短根突变体拟南芥为试验材料,通过图位克隆方法得到调控根生长的DAR2(DA1-Related Protein 2)基因。本研究利用RT-PCR方法,发现生长10 d的Col-0幼苗在200 mmol·L 1氯化钠条件下处理6 h和12 h,DAR2基因受盐胁迫诱导;200 mmol·L 1氯化钠处理后,组织化学染色结果显示,萌发1 d的根尖韧皮部和3 d的叶片pDAR2::GUS的表达上升,进一步表明DAR2基因受到盐胁迫的诱导。统计不同MS培养基[0(CK)、100 mmol·L 1氯化钠、150 mmol·L 1氯化钠、200 mmol·L 1氯化钠、150 mmol·L 1氯化钾、200 mmol·L 1甘露醇]上Col-0和dar2-3的萌发率和转绿率发现:随着氯化钠浓度的逐渐增大,突变体无论萌发还是转绿时间明显比野生型晚。在150 mmol·L 1氯化钾和200 mmol·L 1甘露醇培养条件下,萌发和转绿的时间也比野生型要晚。这些结果表明突变体在萌发和转绿期对盐胁迫的敏感性比野生型明显增强,进一步证明了突变体对盐胁迫的敏感性并不是对离子的特异响应。这些研究结果为深入了解逆境胁迫下植物早期生长发育的可塑性调控机制奠定了基础,同时也为通过生物技术改良作物抗逆性提供了理论依据。

伴脑干和脊髓受累及白质乳酸正常的脑白质病一例

1 病例报告 患者女,32岁。以“步态不稳11年,加重6个月”入院。21岁出现步态不稳,左右摇晃易摔倒;22岁感双下肢无力,自卧位和坐位时起立困难,上下楼梯需搀扶;23岁步态不稳较前加重,迈步不知远近、落脚不知深浅,夜晚较白天重。入院前6个月步态不稳再次加重,就诊当地医院考虑“脊髓后索病变”,给予口服B族维生素、叶酸片、辅酶和烟酰胺片等治疗后无好转。无视力、听力和语言障碍,无饮水呛咳、吞咽困难和二便障碍。否认肝炎、肺结核和水痘等传染病史,否认颅脑外伤和脑炎病史,无发热抽搐和夜盲症病史。20岁结婚,顺产两个男孩。父母系近亲结婚,否认其他家庭成员患有类似疾病。入院查体:意识清楚,言语清晰、流利,舌肌纤颤;双下肢肌力5 -级,双下肢膝腱反射和跟腱反射活跃;左侧Hoffmann征和Rossolimo征阳性,下颌反射、双侧掌颌反射阳性,右下肢 Babinski征可疑阳性;双侧指鼻试验、轮替实验、跟-膝胫试验均欠稳准,右下肢显著,Romberg(+);胸6水平以下痛觉减退,双髋以下音叉震动觉减退,双下肢关节位置觉、运动觉稍差,双足弓形足并足下垂,跨阈步态。

一种新的4,6-二氨基间苯二酚盐酸盐的制备方法及与对苯二甲酸的缩合聚合

以间苯二酚为原料 ,通过乙酰化、肟化、 Beckmann重排、水解反应制备 4,6-二胺基间苯二酚盐酸盐( DAR· 2 HCl) ,并用 FTIR,MS,元素分析 ,1 H NMR和 1 3C NMR等对 DAR· 2 HCl及中间体进行了表征 .同时 ,将 DAR· 2 HCl和对苯二酸 ( TPA)成盐 ,然后进行缩聚得到具有较高分子量的 PBO.通过 FTIR和固体 1 3C NMR表征了 PBO的结构 ,并研究了

小鼠腹水型肝癌高低转移细胞株DARS2蛋白表达的差异

[目的]研究具有高、低转移潜能的小鼠腹水型肝癌细胞株Hca-F与Hca-P中线粒体的天门冬氨酰转移核糖核酸合成酶(DARS2)蛋白表达的差异。[方法]将Hca-F细胞与Hca-P细胞分别接种于615小鼠腹腔,抽取腹水,培养后收集细胞;用免疫印迹分析及免疫细胞化学方法检测Hca-F与Hca-P细胞的DARS2蛋白表达。[结果]DARS2在高转移细胞株Hca-F与低转移细胞株Hca-P表达量分别为(0.219±0.016)与(0.473±0.043),二者比较差异有显著性意义(P=0.01)。[结论]DARS2蛋白表达降低可能与小鼠肝癌转移相关。

基于TCGA数据库分析DARS2在膀胱癌中的临床意义

目的 基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库,分析线粒体天冬氨酰-tRNA合成酶2(DARS2)基因在膀胱癌患者和正常组织中的表达差异,研究其与患者临床特征、预后相关性及参与膀胱癌的调节信号通路。方法 从TCGA数据库下载膀胱癌相关的表达资料和临床特征资料,使用R.4.0.3软件和Strawberry Perl 5.32.0.1提取膀胱癌组织和正常组织中DARS2的表达量数据,利用Mann-Whitney U检验比较两组间的表达差异。将DARS2基因表达量按照中位值分为高表达组和低表达组,采用卡方检验分析表达量与临床特征的关系。利用单因素和多因素cox回归分析对预后意义进行评估,使用Kaplan-Meier法进行生存分析并采用在线数据库验证,利用基因富集分析(GSEA)预测DARS2在膀胱癌中参与的信号通路。结果 膀胱癌组DARS2的表达量明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05),DARS2在膀胱癌患者中的表达与Stage分期(P<0.05)和T分期(P<0.05)有关。DARS2(HR=2.08,95%CI:1.34~3.25,P<0.05)可作为膀胱癌的独立预后因素。DARS2高表达组的总生存率显著低于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05),与OncoLnc在线数据库验证结果一致。GSEA富集分析表明DARS2主要参与细胞周期、RNA降解、核苷酸切除修复、错配修复、P53信号通路、DNA复制。结论 DARS2在膀胱癌患者中高表达,与Stage分期和T分期有关,可以作为导致膀胱癌预后不良的独立危险因子,并通过多种信号途径促进膀胱癌的发生发展。

DARS2基因新发突变导致伴脊髓和脑干受累及乳酸升高的脑白质病一例

目的本文报道1例由DARS2基因突变所致伴脊髓和脑干受累及乳酸升高的脑白质病(LBSL),并对患者的临床资料、神经影像学特征以及基因检测结果进行分析.方法收集首都医科大学宣武医院LBSL1例,对其进行病史询问及磁共振(MRI)检查、磁共振波谱(MRS)、基因检测等相关检查.结果患者主要表现为走路姿势异常、行走不稳、足下垂.头颅、脊髓MRI示双侧侧脑室旁、半卵圆中心区、脑干三叉神经、小脑中脚、内囊后肢及脊髓背侧的T2点状、斑片状高信号,C1-T12水平椎管内异常信号.基因检测发现DARS2基因存在意义未明的rs80063322(g.173809956A>G)新发突变,同时检测到DARS2基因12号外显子部分缺失.结论本文报道了1例儿童晚期起病,携带DARS2基因新发突变位点的LBSL患者.临床中对于运动症状伴深感觉障碍,MRI表现为颅内多发及脊髓长节段病变,且影像学损伤重,而临床变现相对轻的慢性病病程特点的患者,应行DARS2基因检查以确认该病.

基于光子计数激光雷达的自适应门控抑噪及三维重建算法

光子计数激光雷达技术具有极高的探测灵敏度与时间分辨率,是极端条件下高精度目标信息获取的重要手段.由于该技术通过探测单光子级的回波能量实现对目标信息的三维重建,因此极易受噪声干扰,导致成像质量严重降低.基于高速电子门控的距离选通技术虽然可以有效抑制噪声,但存在参数设计依靠经验、目标检测区间窄等问题.本文提出一种在宽目标检测区间条件下的目标信息提取及三维重建方法,首先通过对三维回波信息的获取机理及其概率模型进行分析,获取目标信息分布范围并通过算法门控提取有效信息;再采用高效的图像重建算法进一步提升三维重建的质量,从而具有比基于纯硬件的去噪方法更强的抑噪能力.实验结果显示,在平均像素光子数仅为3.020,且信号噪声比仅为0.106的极端条件下,本文提出的目标信息提取方法可将信号噪声比提升19.330倍;再配合高效的图像重建算法,距离图像的重建信噪比相比于传统的互相关算法提升了33.520 d B,大幅提升了强噪声环境下高精度目标信息获取的能力.

高安全等级网络安全防护体系研究与设计

通过对军事网络、党政内网以及军工企业内网等高安全等级网络面临的安全威胁和防御需求进行深入分析,结合对PDRR、P2DR现有安全模型的研究,提出了适用于高安全等级网络安全防御的P2DAR安全模型,并设计了与P2DAR安全模型适配的安全防御体系。该体系聚焦高安全等级网络安全威胁检测、安全威胁识别等关键问题,设计了威胁感知、威胁分析以及威胁处置等安全防御技术,能够为高安全等级网络安全防御提供有效防御。

DARS2在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌中DARS2的表达情况及其临床意义。方法采用生物信息学工具基因表达谱交互分析版本2(gene expression profiling interactive analysis 2,GEPIA2)分析DARS2在结直肠癌组织中的表达情况。采用免疫组织化学方法检测南昌大学第一附属医院的108例结直肠癌组织和30例正常结直肠上皮组织中DARS2的表达情况。以结直肠癌细胞HCT116和SW480为研究对象,通过将小干扰RNA(siRNA)或DARS2过表达质粒转染到细胞中,以检测敲低和过表达DARS2对细胞功能的影响。使用CCK8检测试剂盒检测DARS2对结直肠癌细胞增殖能力的影响,Transwell小室迁移实验检测DARS2对结直肠癌细胞迁移能力的影响,使用蛋白质免疫印迹检测结直肠癌细胞中上皮-间质转化相关蛋白的表达。结果与正常结直肠上皮组织相比,DARS2在结直肠癌组织中的表达显著上调。DARS2在Ⅲ~Ⅳ期结直肠癌组织表达较Ⅰ~Ⅱ期高,临床基线数据表明DARS2表达与N分期、M分期和病理分期相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,DARS2高表达的结直肠癌患者具有较低的总体生存率(P<0.05)。在siRNA转染组检测到细胞增殖能力显著下降(P<0.01),细胞迁移能力也显著下降(P<0.05),而在转染DARS2过表达质粒后细胞增殖和迁移能力均显著增强(P<0.05)。同时,蛋白质免疫印迹结果显示在敲低DARS2后,上皮相关分子E-cadherin的表达上调,而间质相关分子N-cadherin和波形蛋白的表达下调,而过表达DARS2后N-cadherin和波形蛋白的表达上调、E-cadherin的表达下调。结论DARS2高表达与结直肠癌进展相关,敲低DARS2可以抑制细胞增殖与迁移,并影响上皮-间质转化过程。

基于二维激光雷达和多超宽带的图优化融合定位研究

特殊环境下单纯激光雷达的定位方式以及单超宽带(UWB)融合激光的定位方式容易出现定位漂移、精度较差、激光雷达建图时不断的叠图问题。基于激光雷达与UWB超宽带传感器定位模型差异,利用两者优劣互补原则,提出多UWB位姿动态误差补偿算法,利用多UWB定位标签获取移动机器人坐标以及姿态。使用滑动窗口滤波算法和多UWB位姿动态误差补偿算法处理UWB定位数据得到先验位姿,通过图优化算法与激光雷达进行融合得到更加精准的地图、更加精确收敛和航向角更稳定的移动机器人位姿。

一个伴脊髓与脑干受累以及脑白质乳酸升高的脑白质病家系临床及DARS2基因突变分析

目的探讨一个伴脊髓、脑干受累，脑白质乳酸升高的脑白质病（LBSL）家系的临床和影像学特点，并检测其致病基因DARS2的突变情况。方法收集并分析先证者的临床资料，应用PCR方法对DARS2基因的所有17个外显子及其外显子内含子连接区域进行扩增，采用DNA直接测序与DNA限制性内切酶酶切、100条正常染色体对照验证的方法进行DARS2基因突变检测。结果（1）临床特点：先证者发病年龄为14岁，以运动倒退、走路姿势异常起病，下肢运动障碍重于上肢，智力基本正常，头颅核磁及磁共振波谱（MRS）符合LBSL特点。（2）基因突变分析：先证者DARS2基因发现第8外显子C．665G〉A（P．Gly222Asp）与第2内含子C．228—16C〉G，首次证实了我国LBSL患者中存在DARS2基因突变。家系突变分离研究结果表明，c．665G〉A（P．Gly222Asp）来自其父亲，c．228—16C〉G突变则来源于其母亲，其兄携带C．228—16C〉G，父母及其兄均为表型正常的携带者，符合常染色体隐性遗传规律。结论在国内诊断第1例LBSL病，明确了该家系中的致病基因突变及相关个体基因状况，为该家庭进行准确的遗传咨询提供了可能。

伴脊髓与脑干受累以及脑白质乳酸升高的脑白质病研究进展

伴脊髓与脑干受累以及脑白质乳酸升高的脑白质病(LBSL)是一种罕见的常染色体隐性遗传白质脑病,主要表现为缓慢进行性小脑共济失调、痉挛和背柱功能障碍,该病致病基因为DARS2。本文通过对LBSL的临床表现、发病机制、诊断、鉴别诊断、治疗及预后等方面进行阐述,希望能加强广大医师对该疾病的认识并提高诊断率。

早发型伴脑干和脊髓受累及乳酸升高的脑白质病1例

回顾性分析2020年6月于郑州大学第一附属医院确诊的1例婴儿期起病的伴脑干和脊髓受累及乳酸升高的脑白质病(LBSL)患儿的临床资料。患儿,女,1岁2个月,因"发育落后10个月,间断抽搐1个月"就诊;体格检查:四肢肌力Ⅲ级,肌张力稍高,双侧膝腱反射活跃,双侧跟腱反射正常,双侧巴氏征阳性;头颅磁共振成像(MRI)示双侧大脑半球萎缩并弥漫性异常信号;全外显子基因检测结果显示患儿DARS2基因发现2处杂合变异。中国人群尚未见早发型LBSL基因变异患儿的报道,国外文献共检索到6篇相关病例报道,患儿均有精神运动发育障碍及其他脑病表现,均发现头部影像学受累及DARS2基因变异。因此,对发育落后、癫痫及头颅MRI示双侧大脑半球弥漫性异常信号的患儿,建议行基因检测明确诊断,指导产前诊断及遗传咨询。