大剂量过敏原对致敏小鼠DC表面共刺激分子表达及调节性T细胞极化的作用

目的观察和比较致敏小鼠及正常小鼠DC表面共刺激分子表达及CD4+CD25+Foxp3+T数量的差异及大剂量过敏原在体外的作用。方法流式细胞仪检测致敏及正常对照小鼠脾脏DC表面分子CD11c、MHCⅡ、CD80、CD86表达。分离致敏及正常对照小鼠CD4+T细胞,流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+T细胞的数量。致敏小鼠脾脏DC、CD4+T细胞与10 mg/ml OVA或生理盐水共培养后,流式细胞仪检测并比较CD80、CD86等共刺激分子的表达及CD4+CD25+Foxp3+T细胞的数量。结果致敏小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86、MHCⅡ表达显著高于正常对照小鼠。10 mg/ml的OVA作用后,致敏小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86的表达明显降低。致敏小鼠脾脏细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞数量显著低于正常对照小鼠。10 mg/ml的OVA作用后,致敏小鼠CD4+CD25+Foxp3+T细胞数量显著上升。结论大剂量过敏原在体外诱导致敏小鼠T细胞的不反应性,其机制与降低致敏小鼠DC共刺激分子表达,诱导调节性T细胞极化等有关。

Adr型HBV全基因转基因小鼠DC和T细胞功能的研究

目的方法 :通过对分离Adr型HBV全基因转基因小鼠的脾脏淋巴细胞和树突状细胞 ,并研究其对ConA ,HBeAg ,ConA +HBeAg刺激的应答能力。结果 :发现HBV转基因小鼠对ConA的应答基本正常 ,但对HBeAg ,ConA +HBeAg的应答明显低于对照组 ,说明HBV转基因小鼠DC和T细胞对HBV存在特异性的免疫耐受。

补肾、健脾、解毒法对慢性乙型肝炎患者外周血DCs介导的T淋巴细胞的影响

目的:比较健脾、补肾与解毒法对慢性乙型肝炎患者外周血DCs介导T淋巴细胞的影响。方法:分别收集10例HBV慢性乙型肝炎患者和8例健康者外周血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),体外培养DCs,用大鼠健脾、补肾、解毒药物血清进行干预,并建立DCs、T细胞相互作用的模型,检测T细胞的表面分子CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD8+CD28+T细胞、CD8+T细胞PD-1受体的表达,并检测T细胞上清液中IFN-γ的分泌水平。结果:经补肾、健脾、解毒药物血清处理,HBcAg负载DCs孵育的T淋巴细胞,CD3+T细胞、CD4+T细胞表达率升高,CD8+T细胞、CD8+T细胞PD-1表达率减低,IFN-γ水平提高,六味地黄丸组与模型组间差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,四君子汤组、六味地黄组CD8+CD28+T细胞表达率升高(P<0.05)。结论:补肾、健脾、解毒法在一定程度上通过调节慢性乙型肝炎患者外周血DCs的功能,恢复DCs下游T淋巴细胞功能,其中以补肾法最优。

大细胞肺癌中VEGF的表达与DCs Treg分布的相关性研究

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在大细胞肺癌(large cell lung cancer,LCLC)肿瘤组织中的表达及树突状细胞(dendritic cells,DCs)、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)在肿瘤组织和癌旁正常组织中的分布情况,探讨VEGF的表达情况、DCs与Treg的分布情况之间的相关性,及DCs、Treg分布与患者临床特征间的关系。方法:收集天津医科大学附属肿瘤医院自2000年5月至2010年10月手术切除的原发性LCLC标本75例,其中27例癌旁正常组织作为对照。采用免疫组织化学法检测LCLC标本中VEGF的表达、未成熟DC细胞(CD1a^+DC)、成熟DC细胞(CD83^+DC)及Treg细胞(Foxp3^+T细胞)的分布,并分析它们之间的相关性及与患者临床特征的关系。结果:75例癌组织中VEGF的阳性率为94.7%(71/75);CD1a^+DC、CD83^+DC在癌组织中的分布均显著低于癌旁正常组织(P=0.005、P<0.001);Foxp3^+T在癌组织中的分布显著高于癌旁正常组织(P<0.001)。CD83^+DC的分布在VEGF阳性组明显低于VEGF阴性组(χ~2=7.802,P=0.020);CD1a^+DC与Foxp3^+T的分布呈正相关(r_s=0.246,P=0.033)。CD83^+DC的分布在不同T分期间存在差异,随着T分期增高其数量降低(χ~2=11.043,P=0.011)。结论:LCLC组织中VEGF高表达与成熟DC数量的减少相关,而未成熟DC的分布与Treg细胞的分布呈正相关。

DC-CIK对胃癌合并腹水患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞增殖及功能的影响

目的:探讨DC-CIK对胃癌合并腹水患者外周血CD4^+CD25^+调节性T胞(Treg细胞)比例及功能的影响。方法:60例胃癌合并腹水患者,于输注DC-CIK前1天及DC-CIK治疗结束后1周分别采集外周血。流式细胞术检测外周血Treg细胞的比例,RT-PCR法检测其Foxp3mRNA表达情况;将分选出的Treg细胞和CD4^+CD25^-T细胞分为单纯Treg细胞组(A组)、1∶1混合培养(B组)、单纯CD4^+CD25^-细胞组(C组)进行培养,~3H-TdR掺入法检测Treg细胞抑制CD4^+CD25^-细胞增殖的能力。结果:治疗后外周血Treg细胞占CD4^+T细胞的比例较疗前显著下降[(6.21±1.37)%vs(9.38±1.06)%,P<0.05]。治疗后Treg细胞Foxp3mRNA表达水平较治疗前显著下降[(56.18±13.25)%vs(85.26±11.58)%,P<0.05]。治疗后Treg对CD4^+CD25^-T细胞抑制增殖能力较治疗前明显下降[(37.31±4.16)%vs(48.92±5.25)%,P<0.05]。结论:输注DC-CIK免疫治疗,可显著降低胃癌合并腹水患者外周血Treg细胞比例,下调Foxp3mRNA表达水平,降低Treg细胞免疫抑制功能,有利于诱导抗肿瘤免疫效应。

T型三电平DC-DC变换器PWM脉冲调制方式

高效DC-DC变换器是直流网电能汇聚与传输的关键部件,本文提出一种基于T型三电平技术的单相全桥DC-DC变换器。在分析主电路拓扑及工作原理的基础上,开展了换流过程的开关模态详细分析,同时深入讨论了矢量组合关系对中点电压偏移的影响,并针对性地提出一种周期内电压自平衡型PWM调制策略,且进一步推导了适用于工程实际的脉宽时间简化计算公式。此外,还设计了一套外环电压调节和内环电流调节的双闭环控制策略。最后,在Matlab/Simulink中构建了系统仿真模型,仿真结果表明论文所提PWM脉冲调制模式和DC-DC控制策略均具有良好的控制效果。

基于DC-t-MSV模型的套期保值研究

利用多元随机波动率模型确定最优套期保值率:首先建立动态相关系数多元随机波动率模型(DC-MSV),再建立基于t分布的动态相关系数多元随机波动率模型(DC-t-MSV)。以沪深300股指期货数据为样本,利用以上两种模型分别结合方差最小套期保值模型计算最优套期保值率,结果表明,利用DC-t-MSV模型的套期保值效果优于DC-MSV模型。DC-t-MSV模型引入t分布,充分考虑了金融数据尖峰厚尾的特性;同时,参数估计部分采用马尔科夫链蒙特卡罗模拟方法(MCMC),克服了MSV模型参数估计困难的缺点。

T-exo负载DC诱导抗肝癌细胞免疫效应研究

目的：观察肝癌细胞来源的外泌体（T-exo）负载DC体外诱导细胞毒T细胞（CTL）对肝癌细胞的杀伤作用。方法：采用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从肝癌Huh-7细胞培养上清液中分离外泌体（T-exo）,透射电镜鉴定形态,Western blot检测外泌体相关蛋白CD9、CD63、HSP70及肿瘤抗原分子AFP的表达;分离健康供者外周血单个核细胞（PBMC）培养DC,流式细胞术鉴定负载T-exo的DC细胞表型;用2-（4-碘苯）-3-（4硝基苯）-5-（2,4-磺苯基四氮唑）-2H-四唑单钠盐-1（WST-1）法检测负载T-exo的DC刺激T淋巴细胞增殖情况;流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测负载T-exo的DC诱导CTL分别对AFP阳性Huh-7细胞及AFP阴性的SMMC7721细胞的杀伤作用。结果：透射电镜下可见T-exo为圆形或椭圆形双层膜囊泡状小体,大小不等,平均直径50～100 nm,表达外泌体膜相关分子及肿瘤抗原分子。负载T-exo的DC可促进初始T细胞增殖,T-exo致敏DC对AFP阳性的Huh-7肝癌细胞系杀伤活性明显高于AFP阴性的SMMC7721肝癌细胞组（P〈0.05）及未负载T-exo的对照组DC（P〈0.05）。结论：负载T-exo的DC能促进T细胞增殖,提高CTL细胞的细胞毒活性诱导特异性的抗肝癌效应。经T-exo抗原致敏DC诱导的CTL对肝癌细胞有明显的细胞毒作用,明显高于DC对照组（P〈0.05）。

结核性胸膜炎患者胸水和外周血Treg细胞及DC细胞亚群的检测

目的:探讨CD4+CD25+CD127-调节性T细胞及DC细胞亚群在结核性胸膜炎患者外周血及胸腔积液中的表达变化及其临床意义。方法:采集30例健康正常者的外周血以及30例结核性胸膜炎患者的外周血和胸水,应用流式细胞术检测各标本中DC1、DC2亚群、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞数量的变化。结果:患者外周血的DC1/PBMC、DC2/PBMC明显低于健康正常外周血(P<0.05);患者胸水中检测到DC细胞,与患者外周血间具有正相关(r=0.503及0.437,P<0.05);患者PBMC中的Treg细胞值明显高于健康正常PBMC(P<0.05);患者胸水中检测到Treg细胞,与患者外周血间具有正相关(r=0.672,P<0.05)。结论:结核性胸膜炎患者外周血中树突状细胞数量比正常对照组低,而Treg的数量较正常对照组高,与正常对照组相比存在显著性差异,表明CD4+CD25+CD127-调节性T细胞和DC细胞亚群可能在结核性胸膜炎中发挥着重要的作用。

下调DC-SIGN-ManLAM结合信号恢复树突状细胞活化初始T细胞的能力

目的探讨利用RNAi下调DC-SIGN与ManLAM结合信号对树突状细胞(dendritic cells,DCs)活化初始T细胞能力的影响。方法利用筛选出的人DC-SIGN分子RNAi有效靶点,构建并包装产生慢病毒表达载体。实验分为:干扰组、空载体组和空白对照组。利用慢病毒表达载体下调DCs表面DC-SIGN分子水平,流式细胞仪、RT-PCR及Westernblot检测各组DCs DC-SIGN分子水平变化,在LPS存在下,与ManLAM共培养18 h后,流式细胞仪检测DCs表面成熟标志物,ELISA方法检测DCs刺激CD4+CD45RA+初始T细胞向Th1分化能力,以了解下调DC-SIGN与ManLAM结合信号对DCs活化初始T细胞的能力的影响。结果①包装慢病毒产生浓缩病毒悬液的滴度为1×109TU/ml。②流式细胞仪检测干扰组DCs表面DC-SIGN分子表达水平较其余2组显著降低(F=14.19,P<0.05),RT-PCR检测干扰组DC-SIGN目的条带灰度值/内参灰度值(0.252 5±0.139 6)与空白对照组(0.572 2±0.190 9)及空载体组(0.548 7±0.119 3)相比灰度值显著下降(F=8.142,P<0.05),Western blot检测干扰组DCs内DC-SIGN蛋白水平均显著低于空载体组和空白对照组(F=51.376,P<0.05)。③干扰组DCs的成熟标志物CD86(F=15.59,P=0.004)、CD83(F=18.03,P=0.003)、HLA-DR(F=7.684,P=0.022)水平较空载体组和空白对照组明显增高。④DCs与初始T细胞共培养,干扰组分泌IFN-γ(F=18.434,P=0.003)、IL-2(F=31.08,P=0.001)水平较空载体组和空白对照组显著增高。结论利用RNAi慢病毒载体下调DCs表面DC-SIGN水平,减弱DC-SIGN与ManLAM结合信号,能够恢复DCs的成熟受阻,最终使得DCs活化初始T细胞的能力恢复。

肝癌DC疫苗诱导CTL的效应与机理研究

目的 探讨肝癌DC疫苗诱导肝癌特异性淋巴细胞的效应与机理。方法 用流式细胞术检测肝癌细胞表面HLA-DR的表达;用CM-CSP和IL-4从健康人外周血诱导DC,使之负载肝癌相关抗原,并在BCG HSP-70作用下活化,制成肝癌DC疫苗;用流式细胞术检测BCG HSP 70活化的负载肝癌抗原DC对自身淋巴细胞的活化;分别用MIT法和ELISA检测肝癌DC疫苗活化的淋巴细胞培养上清中TNF和IL-12水平;用原位杂交检测淋巴细胞内IFN-γmRNA表达;用流式细胞术检测经DC疫苗活化后淋巴细胞表面Fas-L表达;最后检测肝癌DC疫苗活化的淋巴细胞对肝癌细胞的特异性杀伤。结果 肝癌DC疫苗在体外诱导活化的淋巴细胞对肝癌细胞的杀伤以CD4^+ T CTL为主,不但可以杀伤SMMC-7721细胞,同时对其它3种肝癌细胞也有不同程度的杀伤。CTL培养上清液和细胞中可分别检测到T_(HI)型细胞因子TNF和IFN-γ mRNA。Fas和Fas配体途径发挥了重要的作用。结论 为肝癌DC疫苗的进一步深入研究及今后的临床应用奠定了良好的基础。

抗原浓度和DC数量对OT-I小鼠CD8^+T细胞分化与增殖的影响

【目的】探讨细胞毒性T细胞(CTL)表位肽SIINFEKL浓度和树突状细胞(DC)数量对CD8+T细胞活化和增殖的影响。【方法】用小鼠重组粒细胞集落刺激性生物因子(GM-CSF)和IL-4诱导骨髓细胞来源的DC增殖和分化,将所得成熟树突状细胞(maDC)和SIINFEKL抗原肽,与免疫磁珠法分离的OT-I小鼠CD8+T细胞共培养。用不同质量浓度的SIINFEKL(100,10,1,0.1,0.01和0.001 ng/mL)或不同数量的DC(DC/T比例分别为1/20和1/5)与CD8+T细胞共培养,刺激CD8+T细胞增殖分化。于共培养不同时间收集细胞,流式细胞术测定CD8+T细胞的数量、分裂速度、细胞表面活化分子的表达丰度,碘化丙叮(PI)染色测定细胞活力。【结果】在任一DC/T比例下,SIINFEKL浓度过低,均不能引起CD8+T细胞的充分增殖,而高于CD8+T细胞最佳增殖浓度的SIINFEKL则导致CD8+T细胞数量减少;在SIINFEKL质量浓度为0.001~0.1 ng/mL时,增加DC数量能促进CD8+T细胞的扩增;而SIINFEKL质量浓度为1~100 ng/mL时,提高DC数量反而导致CD8+T细胞数量减少;高浓度抗原和DC数量能有效诱导CD8+T细胞的活化和分裂增殖,但过量刺激会使细胞死亡,导致CD8+T细胞数量减少。【结论】CD8+T细胞的增殖受DC数量和抗原肽浓度的共同调节,要获得持久有效的CD8+T细胞免疫,必须保证CD8+T细胞得到足够的抗原信号,同时避免抗原信号过强导致的细胞活化后死亡。

论GB/T 24347电动汽车DC/DC变换器与实际应用的不符之处

简单介绍电动汽车DC/DC变换器的基本概念;结合笔者所开发的DC/DC变换器(高压变低压)在高速电动汽车上工作模式的实际应用,与GB/T 24347-2009所建议的工作模式进行比较,着重探讨了不同工作模式的优缺点。

DC-CTL免疫细胞对卵巢上皮癌细胞的靶向性治疗研究

目的探讨经树突状细胞(DC)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫细胞靶向性的抑制卵巢上皮癌细胞的机制,为临床上DC-CTL治疗卵巢癌提供理论基础。方法无胸腺BALB/C/nu/nu裸小鼠48只,分为4组,每组12只,裸鼠人卵巢癌SKOV3移植瘤模型成功后用未经DC诱导的CTL免疫细胞和经DC诱导的CTL免疫细胞进行治疗,比较各组裸鼠移植瘤体积和重量、抑瘤率、移植瘤miRNAlet-7表达和HMGA2蛋白表达的差异。结果 DC-CTL组和CTL组裸鼠的移植瘤体积和移植瘤重量低于模型对照组(F值分别为8.175、6.823,均P<0.05),DC-CTL组裸鼠的移植瘤体积和移植瘤重量低于CTL组,且差异具有统计学意义(t=13.244,P<0.05);DC-CTL组裸鼠的抑瘤率(69.57±10.81)%高于CTL组(42.35±8.15)%,且差异具有统计学意义(t=6.965,P<0.05);DC-CTL组和CTL组裸鼠的移植瘤miRNAlet-7表达均高于模型对照组(F=7.528,P<0.05),DC-CTL组裸鼠的移植瘤miRNAlet-7表达(1.69±0.40)高于CTL组(1.17±0.39),且差异具有统计学意义(t=2.964,P<0.05);DC-CTL组和CTL组裸鼠的HM GA2蛋白表达的ISH评分均低于模型对照组(F=6.419,P<0.05),DC-CTL组裸鼠的HM GA2蛋白表达的ISH评分(15.31±1.72)低于CTL组(17.18±1.86),且差异具有统计学意义(t=3.143,P<0.05)。结论经DC诱导的CTL免疫细胞能够明显抑制裸鼠卵巢癌移植瘤的生长,其机制可能为促进let-7表达和抑制HMGA2蛋白表达有关。

化疗联合DC-CTL治疗不同分期非小细胞肺癌的疗效分析

目的:分析化疗联合树突状细胞诱导的细胞毒性T淋巴细胞(dendritic cells and cytotoxic lymphocytes,DC-CTL)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的疗效及安全性。方法:收集我院2013年5月至2015年12月期间住院病理确诊为Ⅰb(具有高危因素)、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲa、Ⅲb、Ⅳ期的NSCLC患者114例,其中接受肺癌根治术的患者分为术后化疗联合DC-CTL组20例和术后化疗组32例,未行手术患者分为化疗联合DC-CTL组23例和化疗组39例。回顾分析了114例患者的临床特点、疾病控制率(disease control rate,DCR)、中位无疾病生存期(median-disease free survival,M-DFS)、中位无进展生存期(medianprogression free survival,M-PFS)、副作用等资料。随访截止至2016年11月。结果:1年DCR:术后化疗联合DC-CTL组(75.0%)vs术后化疗组(43.8%)(P=0.044)。M-DFS:术后化疗联合DC-CTL组(19.5个月)与术后化疗组(11.5个月)相比,差异具有明显统计学意义(P=0.025 5)。化疗联合DC-CTL治疗与化疗组相比,DCR及M-PFS不具有统计学差异。DC-CTL治疗的副作用显著低于化疗。结论:术后化疗联合DC-CTL治疗可显著提高DCR及延缓NSCLC患者的疾病进展,且安全性高。

DC-CIK细胞联合厄洛替尼对EGFR基因突变阳性的晚期肺腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群影响研究

目的探讨DC-CIK细胞联合厄洛替尼对EGFR基因突变阳性的晚期肺腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群的影响。方法选取我院2012年6月~2016年8月间收治的EGFR基因突变阳性的晚期肺腺癌患者42例,按随机数字表法分为两组,每组21例。对照组采用厄洛替尼治疗;实验组采用DC-CIK细胞联合厄洛替尼治疗;治疗1个月为1周期,共治疗3个周期。治疗前后分别采血检测血清T淋巴细胞亚群、CEA、CA125、IFN-γ、IL-2及VEGF等,同时对比临床疗效及安全性。结果对照组有效率[57.14%(12/21)]低于实验组[85.71%(18/21)](P<0.05);与治疗前比较,两组治疗后CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+升高,CD8^+降低,治疗后血清IL-2、IFN-γ升高,CEA、CA125降低,治疗后血清VEGFA、VEGFB、VEGFC降低(P<0.05);与对照组比较,实验组治疗后CD4^+、CD4^+/CD8^+较高,CD8^+较低,治疗后血清IL-2、IFN-γ较高,CEA、CA125较低,治疗后血清VEGFA、VEGFB、VEGFC较低(P<0.05);对照组不良反应发生率为38.10%(8/21),与实验组不良反应发生率42.86%(9/21)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DC-CIK细胞联合厄洛替尼对EGFR基因突变阳性的晚期肺腺癌疗效确切,降低IL-2、IFN-γ等炎症因子及CEA、CA125等肿瘤标志物,提高免疫功能。

DC-CIK治疗对晚期卵巢癌患者肿瘤标志物和T细胞亚群的影响

目的:探讨树突状细胞(DC)、细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)免疫治疗对晚期卵巢癌患者外周血肿瘤标志物及T细胞亚群的影响。方法:选择在本院妇瘤科住院并经手术病理确诊的100例晚期卵巢癌患者,随机分为实验组和对照组,对照组采用单纯化疗TC(紫杉醇+顺铂),实验组采用DC-CIK联合化疗治疗。检测治疗前、后外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、CD4^+CD25^+T调节性T细胞、NK细胞及血清肿瘤标志物(CA125、CA19-9、HE4)的变化。结果:两组治疗前T细胞亚群各表型间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);实验组治疗后CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8、NK细胞比例上升,而CD4^+/CD25^+以及CD8^+细胞比例出现下降,与治疗前相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);对照组治疗前后T细胞表型变化比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后两组CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、CD4^+/CD25^+、NK细胞比例比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前HE4、CA125、CA19-9比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后两组各项肿瘤标志物均降低,与治疗前比较差异显著(P<0.05);治疗后实验组CA125、CA19-9及HE4与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:DC-CIK治疗能提高晚期卵巢癌患者T淋巴细胞免疫能力及抗肿瘤作用。

口腔癌组织中VEGF与DC成熟及Treg关系的临床观察

目的探讨口腔癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)、树突状细胞(DC)分化成熟和调节性T细胞(Treg)表达,并分析影响口腔癌复发的因素。方法收集2015年1月至2015年6月间的67例患者的临床病例资料,随访患者复发情况。采用免疫组化SP法检测口腔癌组织中VEGF、CD83、CD1α+、Foxp3的表达情况,分析其表达与口腔癌术后复发的关系,采用Cox回归模型分析影响口腔癌复发的独立因素。结果口腔癌组织中VEGF阳性表达率为59. 7%(40/67),与肿瘤发生部位、TNM分期和肿瘤体积有关(P<0. 05)。CD83和Foxp3阳性表达率分别为52. 2%(35/67)和38. 8%(28/67),与TNM分期和淋巴结转移有关(P<0. 05)。CD1α阳性表达率为41. 8%(26/67),与TNM分期有关(P<0. 05)。术后平均随访(31. 45±6. 23)个月,其中21例(31. 34%)患者复发,复发患者和未复发患者TNM分期、淋巴结转移、VEGF表达情况、CD83+、CD1α+树突状细胞分布情况以及Foxp3+T细胞分布情况之间差异存在统计学意义(P<0. 05)。经Spearman秩相关分析,VEGF表达与CD83+树突状细胞分布呈负相关,而与Foxp3+T细胞分布呈正相关(P<0. 05); CD83+和CD1α+树突状细胞分布呈负相关(P<0. 05); Foxp3+T细胞分布与CD1α+树突状细胞分布呈正相关(P<0. 05)。多因素Cox回归模型分析显示,TNM分期晚、淋巴结转移、VEGF阳性表达、CD1α+低分布、Foxp3+高分布是术后复发的独立危险因素(P<0. 05)。结论肿瘤微环境中VEGF与成熟DCs数量减少有关,而不成熟DCs与Treg细胞的分布呈正相关,可作为判断口腔癌患者预后的参考指标。

DC-CIK辅助治疗对老年晚期卵巢癌病人T细胞亚群和生活质量的影响

目的探讨DC-CIK辅助治疗对老年晚期卵巢癌病人T细胞亚群和生活质量的影响。方法选择本院收治的62例老年晚期卵巢癌病人作为研究对象,随机将其分为观察组和对照组,每组各31例,其中对照组给予TP化疗方案,观察组在对照组基础上联合DC-CIK辅助治疗方法,对比2组病人T细胞亚群和生活质量的情况。结果治疗后观察组CD3^+、CD3^+/CD4^+、CD4^+/CD8^+和NK细胞的水平显著高于对照组和治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05),而CD4^+/CD25^+和CD3^+/CD8^+水平显著低于对照组和治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组近期有效率为87.10%,显著优于对照组的54.84%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后有15例病人卡氏评分提高>20分,显著优于对照组的3例;观察组不良反应中骨髓抑制(主要以Ⅲ度和Ⅳ度为主)及肝功能损害发生率显著低于对照组,2组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论老年晚期卵巢癌病人在术后应用DC-CIK细胞免疫辅助治疗不仅可提高其Th1类因子的抗肿瘤作用,有效提高T淋巴细胞的免疫学功能,而且还能显著改善病人生活质量,在临床应用过程中安全性较高,值得推广应用。

自体DC-CIK细胞治疗晚期肺癌患者前后T淋巴细胞亚群表面分子的表达

目的探讨自体DC-CIK细胞治疗晚期肺癌患者前后T淋巴细胞亚群表面分子表达情况。方法抽取63例肺癌晚期患者的外周血分离获得外周血单个核细胞(PBMC),将与患者病理分类相同的肺癌细胞株经反复冻融处理获得可溶性抗原,制备肿瘤相关抗原肽负载DC-CIK细胞,并进行质量控制后回输。应用流式细胞术检测DC-CIK细胞治疗晚期肺癌患者前后T淋巴细胞表面CD3^+HLA-DR^+、CD3^+CD25^+、CD3^+CD4^+CD25^+、CD3^+CD8^+HLA-DR^+、CD3^+CD8^+CD38^+细胞百分比及对比治疗前后表达情况。结果成功获得成熟DC细胞,流式细胞术检测证实DC细胞成熟的标志分子CD11c、CD83、CD86及HLA-DR的表达均较高,分别为51.6%±10.3%、50.8%±9.7%、48.9%±11.4%、61.2%±6.5%;成功获得CIK细胞细胞,流式细胞术结果显示,CD3^+CD56^+双阳性细胞比例占21.3%±7.6%。与治疗前相比,DC-CIK细胞治疗后CD3^+HLA-DR^+(12.71±1.54 vs 11.44±4.13,P<0.05)、CD3^+CD8^+HLA-DR^+(7.48±1.01 vs 5.20±1.01,P<0.01)、CD3^+CD8^+CD38^+(8.27±1.71 vs 6.47±1.99,P<0.01)表达明显升高,CD3^+CD4^+CD25^+(5.38±1.47 vs 6.12±0.67,P<0.05)表达明显降低。结论采用自体DC-CIK免疫细胞治疗晚期肺癌可以明显提高患者免疫力。