以DCAP-P为底物的酸性磷酸酶连续监测法的建立

目的 :建立以2,6 -二氯 -4 -乙酰基苯基磷酸盐(DCAP -P)为底物的一种新的酸性磷酸酶(ACP)的测定方法。方法 :在BTS -310半自动生化分析仪上研究连续监测法 ,建立实验参数。结果 :本法测定DCAP吸收峰为326nm ;ACP的Km=0.139mmol/L ;340nm时DCAP的摩尔消光系数为14440L/(mol×cm) ;缓冲液浓度0.1mol/L ,最适pH5.4 ,底物浓度2.0mmol/L ,延滞期60s,线性反应期15min ;线性范围为0～1188u/L ;血红蛋白(Hb)<115.62mg/L对测定结果无影响 ;黄疸对测定结果无影响 ;本法总ACP与PAP(前列腺酸磷酶 )的参考值范围分别为12.58～19.42u/L、2.52～9.04u/L。结论 :此方法重复性好 ,线性反应期长 ,线性范围广 ,干扰因素少 ,适用于自动生化分析。

血清酸性磷酸酶测定法的实验研究

目的 建立以 2 ,6 -二氯 - 4-乙酰基磷酸盐 (DCAP -P)为底物的一种新的酸性磷酸酶 (ACP)的测定方法。方法 在ISP半自动生化分析仪上研究测定法的试剂配方与实验参数。结果 本法测定DCAP -P吸收峰为 :32 6nm ;Km =0 .139mmol/L ;340nm时DCAP -P的摩尔消光系数为 14 4 4 0L/(mol .cm) ;缓冲液浓度 0 .1mol/L ,最适条件 :pH 5 .4 ,底物浓度 2 .0mmol/L ,延滞期 30s ,线性反应期 15min ;线性范围为 0～ 1188u/L ;高、低值回收率均在 95 %～ 10 5 % ;高、中、低值批内CV分别为 :2 .6 %、1.9%、1.2 % ,批间CV值分别为 :2 .8%、2 .1%、1.2 % ;血红蛋白 (Hb) <115 .6 2mg/L对测定结果无影响 ;黄疸对测定结果无影响 ;与长征试剂盒相比r =0 .978;试剂在 - 2 0℃可稳定一个月 ;本方法的参考值范围为 9u/L～ 2 6u/L。结论 此方法重复性好 ,线性反应期长 ,线性范围广 。