前列腺癌特异性基因DD3^(PCA3)的研究进展

DD3PCA3 是一种非编码RNA的基因 ,定位于 9q2 1～ 2 2染色体。它为前列腺癌特异性基因之一 ,DD3PCA3 mRNA仅在前列腺癌细胞中表达 ,而在其他正常组织和癌组织以及细胞系中均不表达。现就DD3PCA3 基因结构和功能、DD3PCA3 mRNA实验室检测技术以及临床意义作一综述。DD3PCA3 mRNA有望成为前列腺癌早期诊断和预后监测的有价值标志物。

前列腺腺癌中DD3(Pca3)基因的表达及其意义

目的评价DD3(Pca3)检测在前列腺腺癌活检标本病理诊断中的应用价值。方法观察DD3(Pca3)基因在196例前列腺腺癌和相关疾病前列腺标本中的原位杂交表达情况。结果在149例前列腺腺癌病例中,DD3(Pca3)染色阳性率为94.6%,染色情况与Gleason评分、患病年龄、血清总PSA值的关系无统计学意义。52例癌周有前列腺上皮内肿瘤(PIN)4,7例DD3(Pca3)阳性;149例腺癌癌巢周18例DD3(Pca3)阳性。在42例良性前列腺增生(BPH)中1例DD3(Pca3)阳性(2.38%)。结论 DD3(Pca3)是诊断前列腺腺癌有价值的阳性标记物。

DD3 mRNA在前列腺癌组织中定量表达分析

目的:探讨DD3基因在前列腺组织中表达的临床意义。方法:用荧光定量RT-PCR方法对21例前列腺癌(PCa)组织、27例非前列腺部位的肿瘤组织、39例良性前列腺增生(BPH)组织和15例正常前列腺组织中的DD3的表达进行了定量分析,用ROC曲线对DD3 mRNA诊断PCa的性能进行了分析。结果:27例非前列腺组织中均未检测到DD3基因的表达。DD3在PCa组、BPH组和正常前列腺组表达量的中位数分别为7.2×106、2.5×104、1.5×104拷贝/mg组织。PCa组较BPH组和正常前列腺组DD3的表达量显著增高(P<0.01),而BPH组和正常前列腺组间则差异无显著性(P>0.05)。DD3表达量与临床分期和分化程度之间均无明显相关性。DD3 mRNA曲线下面积(AUC-ROC)为0.937(95%CI:0.879～0.995)。当临界值为1.4×105拷贝/mg组织时,灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、阳性拟然比(+LR)、阴性拟然比(-LR)分别为90.5%、85.0%、86.7%、76.0%、94.3%、6.03和0.11。结论:DD3 mRNA的表达仅限于前列腺组织,具有良好的组织特异性。DD3 mRNA表达在PCa组织中显著升高,在正常前列腺和BPH组织中差异无显著性。DD3 mRNA可作为PCa诊断的良好标志物,在PCa早期诊断、微转移诊断、预后判断、指导治疗等方面也具有潜在的应用价值。

单晶DD3合金在混合盐介质中的蠕变和断裂特性

应用扫描电镜、剖面分析和ＥＤＡＸ能谱分析，研究了单晶ＤＤ３合金及其带Ｐｔ－Ａｌ涂层试样在空气和混合盐两种不同介质中的高温蠕变及断裂行为。试验表明：在空气环境中，涂层对蠕变性能影响不大；在混合盐介质中，涂层能有效地提高ＤＤ３合金的蠕变寿命和蠕变延伸率，防止合金在热腐蚀环境中的早期失效。本文还提出一个新的断裂模型。

前列腺癌中DD3的表达及意义

目的检测DD3 mRNA在前列腺癌中的表达,探讨其在前列腺癌诊断中的作用,并分析其与前列腺癌临床分期和病理分级之间的关系。方法采用SYBR-Green I实时荧光定量RT-PCR法检测DD3mRNA在34例前列腺癌、20例前列腺增生组织及3种前列腺癌细胞株中的表达,同时收集临床病例数据,分析其表达含量与临床分期和病理分级之间的关系,应用SPSS13.0对数据进行统计分析。结果①DD3 mRNA在前列腺癌组织和前列腺癌细胞株中的表达量明显升高,与其在前列腺增生组织中的表达量相比,差异具有显著性(P<0.001)。②在不同的临床分期与病理分级中,DD3 mRNA的表达量随临床分期和病理分级增加而增加,其差异亦具有显著性(P<0.001)。结论 DD3 mRNA在前列腺癌中呈高表达,可作为前列腺癌的一项特异性早期诊断标记物,其与前列腺癌的临床分期和病理分级具有相关性,提示其有可能在前列腺癌的发生发展中起重要作用。

DD3 mRNA及DD3 mRNA/D定量检测对前列腺特异性抗原灰区前列腺癌诊断的临床价值

目的：研究前列腺组织中DD3 mRNA及DD3 mRNA／D定量检测在前列腺特异性抗原（ PSA）灰区前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法选择sPSA 4～10 ng／ml的前列腺增生（ BPH）患者112例和前列腺癌（ PC）患者25例，进行RT-PCR、PSA检测、B型超声检查及前列腺穿刺活检。观察其DD3 mRNA、DD3 mRNA／D、血清PSA（ sP-SA）、前列腺穿刺活检标本PSA（uPSA）、总PSA／游离PSA比值（f／tPSA）、s／uPSA、PSA密度（PSAD）等参数的差异，并应用ROC曲线分析各参数的诊断价值。结果2组患者年龄、前列腺体积比较差异无统计学意义（ t ＝12滗．87、12．31， P ＞0．05）；tPSA、PSAD比较差异均有统计学意义（ t ＝7．31、6．89， P ＜0．05）；PC组DD3 mRNA／PSA mRNA比值明显高于BPH 组（ t ＝7．86， P ＝0．009）；PC组DD3 mRNA／D比值明显高于BPH组（ t ＝7．28， P ＝0．05）。 ROC曲线分析结果表明，以0．27为截断值，DD3 mRNA／PSA mRNA的曲线下面积为0．841（95％CI 0．666～0．997）；以2．01为截断值，DD3 mRNA／D的曲线下面积为0．907（95％CI 0．790～0．869）。结论 DD3 mRNA含量、DD3 mRNA／D定量检测可以显著提高检出PSA灰区前列腺癌的敏感度，对PSA灰区前列腺癌的早期筛查诊断意义重大，DD3 mRNA／D具有更好的诊断效能。

DD3单晶合金短时液相扩散连接接头组织与性能研究

采用D1P和D1F两种中间层合金在1250℃下分别保温10,30min,1,2,4h扩散连接DD3单晶合金。这两种中间层合金是在DD3合金成分基础上添加了一定量的降熔元素硼,分别以粉和箔带形式使用。对上述规范下获得的DD3接头组织和性能进行了研究分析,结果表明,扩散时间短,D1P中间层合金扩散焊接头组织很不均匀,在中间层合金流入处生成大量光板γ′相,对接头持久性能不利,1250℃下扩散4h接头的980℃持久性能为母材性能的60%;而D1F中间层合金扩散焊接头组织均匀一致,1250℃下扩散4h接头980℃持久性能超过母材性能的70%。

过冷DD3单晶高温合金凝固组织细化的再结晶机制

用复合熔盐净化与循环过热相结合的方法，在 ０—２１０Ｋ过冷度范围内，研究了ＤＤ３单晶高温合金凝固组织形态演化过程．当过冷度△Ｔ超过△Ｔ５（１５３Ｋ）时，枝晶组织开始发生变形、碎断；当△Ｔ超过△Ｔ（１８０ Ｋ）时，组织完全转变为第二类粒状晶．粒化过程中位错及其它晶体缺陷的形态演变表明，△Ｔ以上的晶粒细化是由再结晶机制控制的。

CeF_3闪烁探测器对DD中子的相对灵敏度

用国内近年新研制的CeF3闪烁体和常用闪烁体ST401分别配特性相同的光电倍增管,构成两种闪烁体探测器,在强度不随时间变化的DD中子源场中测量了这两种闪烁探测器的相对灵敏度,测量结果表明:CeF3闪烁探测器对DD中子的灵敏度比同尺寸ST401的灵敏度低一个量级以上。

长链非编码PCA3靶向miR-194影响前列腺癌细胞增殖和凋亡行为

目的:探讨长链非编码PCA3靶向miR-194的表达通过ERK信号通路对前列腺癌细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法:q PCR检测PCA3和miR-194在不同前列腺癌细胞中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测PCA3与miR-194的相互作用;克隆形成实验和凋亡实验检测抑制PCA3后前列腺细胞增殖能力和凋亡行为的变化,及过表达miR-194后前列腺细胞增殖能力和凋亡行为的变化;Western blot检测抑制PCA3后ERK信号通路蛋白的表达水平及过表达miR-194后ERK信号通路蛋白的表达水平变化。裸鼠体内成瘤试验检测PCA3对前列腺癌细胞成瘤能力的影响。结果:与其他前列腺癌细胞相比,LNCa P细胞中PCA3的表达水平最高,miR-194的表达水平较低;双荧光素酶试验证实PCA3可以调控miR-194的表达及活性,抑制PCA3的表达可以减弱前列腺癌细胞的增殖能力,加强其凋亡行为;过表达miR-194后前列腺癌细胞的增殖能力和凋亡行为得到一定的恢复;抑制PCA3的表达可以下调ERK信号通路的蛋白表达,抑制ERK信号通路的激活;同时过表达miR-194后可以逆转PCA3对ERK信号通路的抑制作用。抑制PCA3的表达后可以有效减弱前列腺癌细胞的体内成瘤能力。结论:PCA3可以靶向调节miR-194通过ERK信号通路调控前列腺癌细胞的增殖和凋亡行为。

DD3单晶的Hill屈服准则应用研究

将Hill屈服准则用于DD3单晶不同温度不同取向的屈服应力预测,结果表明:Hill屈服准则中材料参数的选择对计算结果有很大的影响,且不能同时准确预测单晶三个主要承载方向的屈服强度。根据单晶材料的屈服特点,考虑到单晶材料在任意方向上剪应力及其相互作用对屈服强度的影响,通过在Hill屈服函数中加入一修正项建立了适用于单晶的新屈服函数,能对晶体取向为[001],[011]和[111]的屈服强度进行非常准确的预测,在其它方向上结果也比较满意。

熔体超温处理对DD3镍基单晶高温合金凝固组织的影响

在保持固/液界面温度梯度不变的条件下,研究了不同熔体超温处理温度对DD3单晶高温合金凝固组织的影响,并利用DTA研究了合金熔体结构的变化.结果表明:合金熔体在1380—1650℃发生一系列的结构变化;当抽拉速率为50μm/s时,随熔体超温处理温度由1500℃升至1640和1780℃,合金一次枝晶间距由177μm分别减至150和125μm,枝干与枝间γ′相的尺寸减小,且枝间γ′相形貌变得规整.

DD3单晶合金瞬间过渡液相扩散焊接头组织与性能

采用粉状中间层合金D1P和非晶态箔状中间层合金D1F对镍基单晶高温合金DD3进行了TLP扩散焊,并对接头组织与性能进行了分析研究。试验结果表明,D1P粉状中间层合金TLP扩散焊接头中存在明显的组织不均匀现象,经过高温长时间保温才可消除,而采用D1F非晶态箔状中间层合金TLP扩散焊DD3合金更易获得与母材组织一致的接头。在合适的规范下,两种中间层合金扩散焊的DD3合金接头980℃持久强度均达到或超过母材的90%。

热等静压对DD3单晶高温合金组织与性能的影响

选用两种热等静压工艺对DD3合金进行热等静压实验,研究了热等静压对DD3单晶高温合金组织与性能的影响。观察、分析了热等静压及完全热处理后组织,测试了经热等静压并热处理后合金的持久、蠕变及拉伸性能。结果表明:热等静压工艺可部分或完全消除DD3合金的铸造疏松或缩孔,但导致合金γ′强化相的回溶和不规则长大,热处理后γ′相粗大且立方化和规则性差,合金的中、高温持久和蠕变性能有所降低,对900℃拉伸性能无明显影响。

前列腺癌标志物PCA3的研究进展

前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤,患者多数无明显临床症状,常在直肠指检时偶然发现,也可在前列腺增生手术标本中发现。早期诊断、及时治疗是提高前列腺癌患者疗效的重要措施。但目前对前列腺癌的早期筛查仍停留在检测血清前列腺特异性抗原(PSA)水平上,而PSA对于前列腺癌诊断的特异性不高,存在一定局限性。近年研究发现,前列腺癌抗原基因3(PCA3)可能为前列腺癌的特异性标志物。本文就该领域的前沿进展做一小结。

不同取向DD3单晶合金扩散连接接头组织及性能

采用D1F非晶态箔中间层合金对0°+30°,0°+60°取向组合的DD3单晶合金试样进行了TLP扩散焊,研究了被焊单晶合金试样相互之间的取向对接头组织和性能的影响。结果表明:当被焊二母材取向不一致时,由于在焊缝中央存在较大块状γ′相组成的界面,且此界面与外加应力方向垂直,是高温应力作用下的薄弱环节,从而使接头持久性能明显降低,低于母材持久性能的40%,接头断裂均发生在焊缝;而采用同样的中间层合金和连接规范,取向一致配对焊接的单晶合金接头具有均匀的焊缝组织和优良的持久性能,可达到或接近与母材等强。因此为了获得高性能的接头,应尽可能使被焊部件的晶体取向一致。

DD3启动子调控TRAIL过表达载体的构建及腺病毒包装

目的:构建DD3(PCA3)启动子调控的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL过表达腺病毒载体,并对其进行病毒包装及滴度测定。方法:将DD3启动子用分子克隆技术替换掉穿梭质粒p HBAd-U6-GFP原有启动子U6,再用Age I单酶切将制备的重组质粒p HBAd-DD3-GFP线性化,将TRAIL基因片段克隆至线性化p HBAd-DD3-GFP上,经抗性筛选后PCR及测序鉴定为p HBAd-DD3-TRAIL载体。将其连同病毒骨架质粒p HBAd-BHG共同转染至HEK293细胞包装成病毒并扩增,测定病毒感染性滴度。结果:经PCR及测序验证证实成功构建DD3启动子调控的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL过表达腺病毒载体p HBAd-DD3-TRAIL并包装扩增,病毒滴度为1.58×1010PFU/ml。结论:构建DD3启动子调控的凋亡配体TRAIL过表达重组腺病毒,可用于下一步在前列腺癌细胞中特异性地表达及诱导细胞凋亡杀伤靶细胞效应研究中。

熔体过热时间对DD3单晶高温合金凝固组织的影响

在定向凝固固/液界面温度梯度及凝固速率保持恒定条件下,研究了熔体过热时间对Ni基DD3单晶高温合金凝固组织的影响.结果表明,当熔体超温处理温度为1640℃,过热时间由30 min增至60 min时,枝晶间距进一步减小,枝间γ相更加细小且规整,在此温度过热90 min时,将导致凝固组织粗化当熔体超温处理温度为1780℃,随过热时间由30 min延长至60 min时,枝晶间距与枝间γ′相都变大,且枝间γ′相不再规整.

前列腺癌患者尿液中DD3 mRNA检测及临床意义

目的:观察PCa患者尿液中DD3 mRNA的表达,并讨论其临床意义。方法:从48例PCa患者、23例BPH患者和9例健康男性志愿者(对照组)前列腺按摩后初始尿液中分离细胞,采用RT-PCR方法检测其中DD3mRNA的表达情况。结果:BPH和对照组未见DD3 mRNA阳性表达,而PCa患者DD3 mRNA阳性率为81.3%(39/48),两者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:尿液中DD3 mRNA的检测有望成为早期诊断PCa的一种无创、简单、敏感的方法,也有望成为PCa治疗后监测的一种方法。

不同热处理温度对吹砂后DD3合金持久性能的影响

对标准热处理后的第一代单晶高温合金DD3吹砂,然后采用不同温度进行热处理,研究了吹砂后热处理温度对合金1000℃/195 MPa持久性能的影响。结果表明,1050℃时,合金未发生再结晶,但析出粗大γ′相,持久性能有所降低;1150℃时,合金发生再结晶,再结晶使合金的持久性能明显降低;1250℃时,合金也发生再结晶,但由于合金母体组织均匀,γ′相细化且立方化较好,致使该条件下合金持久性能仍然保持在较高水平。