DDAH2基因多态性与冠心病的相关性研究

目的:研究中国人群二甲基精氨酸二甲基氨基酸水解酶(Dimethyl arginine dimethyl amion acid hydrolase,DDAH2)基因单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法:从山西医科大学第二医院选取冠心病患者165例和匹配的对照组192例。并记录所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其它流行病学资料,采取连接酶检测反应(Ligase detection reaction,LDR)-测序分型方法检测各组基因rs2272592位点C/T的基因型并统计各组的基因型频率。结果:冠心病组rs2272592基因型频率与对照组之间相比较无统计学意义(P>0.05)。结论:DDAH2基因rs2272592点C/T多态性可能与中国人冠心病发病不相关。

社区老年人DDAH2基因多态性与高血压的相关性研究

目的探讨二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)基因rs2272592、rs805035位点多态性及基因-环境交互作用与内蒙古包头地区人群高血压易感性之间的关系。方法选取内蒙古包头包钢社区老年高血压患者及健康人群各282例,使用统一问卷收集研究对象的基本信息并采集外周血。外周血血细胞提取研究对象DNA,利用多重高温连接酶检测反应技术(iMLDR)检测rs805305、rs2272592位点基因多态性。采用SNPstats在线软件进行遗传模型分析;多因素条件Logistics回归法分析DDAH2基因多态性及基因-环境交互作用与高血压易感性之间的关系。结果rs2272592位点超显性遗传模型、rs805305位点显性遗传模型为较优遗传模型(P<0.05);多因素条件Logistics回归提示rs2272592位点G/A基因型与高血压易感性有关(P<0.05);单因素条件Logistics回归发现rs2272592位点超显性遗传模型*睡眠总分与高血压易感性有关(P<0.05),但调整其他环境因素后关联消失(P>0.05)。结论rs2272592位点G/A基因型可能是高血压发生的危险因素;暂未发现DDAH2基因rs805305、rs2272592位点多态性与环境因素间存在基因-环境交互作用,影响高血压的发生。

牦牛DDAH1和DDAH2基因的克隆测序及其在牦牛和犏牛睾丸中的表达差异

为了测定牦牛DDAH1和DDAH2基因序列并比较其在牦牛和雄性不育犏牛睾丸中的表达,以探究该基因与犏牛雄性不育的联系,试验从牦牛睾丸中提取总RNA,采用RT-PCR技术克隆并测序获得牦牛DDAH1和DDAH2基因的c DNA序列;利用实时荧光定量RT-PCR技术检测这两个基因在牦牛与犏牛睾丸中的表达。结果表明:克隆获得的牦牛DDAH1和DDAH2基因序列分别长959 bp及1 091 bp,均包含858 bp的CDS区。DDAH1基因序列与普通牛相比有4个碱基差异,序列同源性为99.58%,而推导的氨基酸序列仅存在1个氨基酸残基差异;DDAH2基因序列与普通牛比较相差1个碱基,序列同源性为99.91%,推导的氨基酸序列存在1个氨基酸残基差异。DDAH1和DDAH2基因在牦牛和犏牛睾丸组织中均有表达,DDAH1基因在犏牛睾丸组织中的表达量显著高于牦牛(P<0.05),是牦牛睾丸组织中表达量的1.5倍;DDAH2基因在犏牛睾丸中的表达量与牦牛相比差异不显著。说明DDAH基因表达在犏牛睾丸中上调可能与其雄性不育有关。

二甲基精氨酸二甲胺水解酶2基因启动子区-个NF-κB反应元件的鉴定

目的鉴定二甲基精氨酸二甲胺水解酶2（DDAH2）基因启动子区的一个NF-κB反应元件，证明其在DDAH2转录激活中的作用。方法应用多种软件分析DDAH2启动子区，寻找潜在的转录因子结合位点；构建系列截短的DDAH2基因启动子荧光素酶报告基因载体，转染人胚肾HEK293细胞，通过荧光素酶活性检测分析各段启动子的活性；应用电泳泳动迁移实验（electrophoresis mobility shift assay，EMSA）和染色质免疫沉淀（chromatin immunoprecipitation，CHIP）方法分别在体外及体内鉴定NF-κB反应元件；构建NF-κB位点突变的DDAH2基因启动子荧光素酶报告基因载体，转染细胞，比较其与野生型启动子活性差异。结果DDAH2基因启动子区存在多种潜在的转录因子结合位点；DDAH2的各段启动子具有高转录活性，其中-530～-437区域为一个正调控区域；DDAH2基因启动子-476～469区为NF-κB反应元件，NF-κB可特异性结合于该位点；该NF-κB元件突变使DDAH2基因启动子活性显著下降。结论DDAH2基因启动子-476～469区为NF-κB反应元件，该元件在DDAH2转录激活中具有重要的作用。