激动α_(1B)-肾上腺素受体对DDT1 MF-2细胞生长的刺激作用及其途径

目的 研究激动α1B 肾上腺素受体 (α1B AR)对DDT1MF 2细胞生长的影响及其机制。方法 用3H-胸腺嘧啶参入法测定细胞的DNA合成速率 ;用流式细胞计测定细胞周期。结果 去甲肾上腺素 (NE ,0 1～ 1μmol·L-1)可刺激DDT1MF 2细胞DNA的合成。磷脂酶C抑制剂 (U7312 2 ,10 μmol·L-1)、Ca2 +/ATP酶抑制剂 (CPA ,10 μmol·L-1)、胞内Ca2 +络合剂 (BAPTA/AM ,10 μmol·L-1)、PKC抑制剂(RO 31 82 2 0 ,0 1μmol·L-1或calphostinC ,0 1μmol·L-1)、酪氨酸激酶抑制剂 (tyrphostinA2 5 ,10 μmol·L-1或genis tein ,10 μmol·L-1)、MEK1/ 2抑制剂 (PD 980 5 9,10 μmol·L-1)均可阻断NE刺激细胞DNA合成的作用。结论 激动α1B AR可刺激DDT1MF 2细胞增殖 ,其信号转导途径可能与PLC激活、Ca2 +释放、PKC。

质粒转染对HEK293和DDT1-MF2细胞天然β2-肾上腺素受体表达的影响

目的 :观察质粒转染对细胞天然 β2 肾上腺素受体 (β2 AR)表达量的影响。方法 :将不携带外源目的基因的 pREP4质粒和携带α1B AR或 β1 ARcDNA的 pREP4质粒 ,采用脂质体和磷酸钙沉淀法转染HEK2 93和DDT1 MF2细胞。结果 :相同质粒载体 ,无论有无外源目的基因 ,或目的基因是否相同 ,均可使HEK2 93细胞天然表达的β2 AR密度及其介导的cAMP蓄积效应增加。而用同样方法在DDT1 MF2细胞转染 pREP4质粒则对 β2 AR表达无影响。结论 :转染携带或不携带目的基因的质粒对HEK2 93细胞天然表达 β2 AR的密度及其介导的功能效应均有影响 ,且提示这种效应可能具有细胞特异性。