DEAD盒解旋酶10(DDX10)通过增强黑素瘤缺失基因2(AIM2)蛋白稳定性促进AIM2炎性体激活

目的研究DEAD盒解旋酶10(DDX10)对黑素瘤缺失基因2(AIM2)炎性体通路的调控机制。方法通过在HEK293T-caspase-1-ASC-IL-1β(HEK293T-CIA)细胞系中过表达DDX家族成员和AIM2表达质粒,检测上清中的白细胞介素1β(IL-1β)的释放,筛选对AIM2炎性体通路有调控作用的分子。在DDX10缺失的THP-1细胞系,利用佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,用脂多糖(LPS)预处理,再用poly(dA:dT)刺激巨噬细胞激活AIM2炎性体。采用ELISA检测IL-1β的释放,Western blot法检测胱天蛋白酶1(caspase-1)蛋白的切割和DDX10蛋白水平。采用免疫共沉淀法检测DDX10和AIM2的相互作用,利用免疫荧光细胞化学染色法结合共聚焦显微镜技术确定DDX10和AIM2在HEK293T细胞的共定位情况。结果过表达DDX10显著促进AIM2炎性体通路的激活,缺失DDX10显著降低AIM2炎性体通路的激活,DDX10与AIM2的带有200个氨基酸重复序列的造血性干扰素诱导核蛋白(HIN-200)结构域存在相互作用,并增强AIM2的蛋白稳定性。结论DDX10通过提高AIM2的蛋白稳定性促进AIM2炎性体通路的激活。

结直肠癌组织和细胞中DEAD盒解旋酶10和Bystin样蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨结直肠癌(CRC)组织及结肠癌细胞DLD-1中DEAD盒解旋酶10(DDX10)与Bystin-like(BYSL)的关系及其临床意义。方法:收集2017年3月至2018年3月间福建医科大学附属第二医院手术切除的78例CRC组织和配对癌旁组织,采用免疫组织化学Envision法检测癌组织和癌旁组织中DDX10和BYSL的表达水平,采用卡方检验、Pearson相关性分析和Kaplan-Meier法分别分析CRC组织中DDX10、BYSL蛋白表达与其患者的临床病例特征的关系,两者表达的相关性,以及与患者PFS和OS的关系。利用瞬时转染技术在DLD-1细胞中分别转染siDDX10和siNC,用qPCR法检测DLD-1细胞中敲减DDX10的表达对BYSL表达的影响,用CCK-8及Transwell实验验证DDX10及BYSL表达对结肠癌细胞增殖迁移及侵袭的影响。结果:免疫组织化学Envision法检测显示,与癌旁组织相比,DDX10和BYSL在CRC组织中呈高表达(73.08%和74.36%)。CRC组织中DDX10与BY肿瘤分期、是否发生淋巴结转移及复发等临床病例特征均有关联(均P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,DDX10与BYSL的表达呈正相关(r=0.636,P<0.001)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,DDX10与BYSL的高表达与患者更差的预后相关。Logistic回归分析发现,DDX10与BYSL均是CRC复发的独立风险因素。CCK-8法及Transwell实验检测结果显示,敲降DDX10的表达可使BYSL表达降低,且可抑制DLD-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力(均P<0.05)。结论:DDX10和BYSL在CRC组织中呈高表达,两者表达水平呈正相关,且与患者更差的预后相关,是CRC复发的独立风险因素。可调控结直肠癌DLD-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力。

DEAD-box RNA解旋酶3在肿瘤中作用机制的研究进展

DEAD-box RNA解旋酶(DEAD-box helicase,DDX)在RNA代谢过程中发挥多种功能,对转录、剪切、mRNA转出、翻译、核糖体合成及miRNA的调控均有一定影响,其对RNA代谢的影响可引起一系列疾病的产生。DEAD-box RNA解旋酶3(DDX3)是DDX家族重要的成员,在细胞周期阻滞、细胞增殖和凋亡中起重要作用。DDX3可在多种肿瘤组织中发生异常表达,影响肿瘤患者的生存和预后。本文就DDX3在肿瘤,如肺癌、结直肠癌、乳腺癌及肝癌中作用机制的研究进展作一综述。