RhD阴性孕妇DEL型的筛查及基因型分析

目的通过对天津滨海新区RhD阴性孕妇进行DEL型筛查及基因型分析,结合不规则抗体鉴定,为RhD阴性围产期妇女提供合理的产前检测。方法收集102例天津滨海新区RhD阴性孕妇外周血标本,应用试管法和微柱凝胶法进行RhD确认,应用吸收放散试验进行DEL型确认,应用RhD血型抗原试剂卡进行RhC、c、E、e表型鉴定,使用PCR-SSP法对确认为RhD阴性的样本进行RHD基因分型检测。结果102例RhD初筛阴性个体中检出DEL RHD 1227A纯合型13例(12.7%),DEL RHD 1227A杂合型2例(2%),其RhC/E抗原分型为Ccee 9例(60%),CCee 3例(20%),CcEe 3例(20%)。全缺失RHD基因型70例(68.6%),RHD-CE(2-9)-D型10例(9.8%),弱D15型5例(4.9%),2例不能用此PCR-SSP方法确定其基因型(2%)。结论本地区RhD阴性孕妇DEL型占有较高比例,血清学检测结合基因分型检测,可准确判定RhD血型,从而指导RhD阴性孕妇预防注射免疫球蛋白和新生儿溶血病的预防。

RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL型红细胞短期内引起高效价抗-D的同种免疫研究

目的通过对1例RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL红细胞后诱发同种抗-D免疫的研究分析,探讨RhD阴性患者输注DEL型策略。方法采用血清学方法进行ABO及Rh系统血型抗原检测、不规则抗体筛查及鉴定,高分辨熔解曲线和基因测序分析检测DEL型的RHD基因分型。结果受血者为O型,RhD阴性。供血者为RHD 1227G>A突变的“亚洲型”DEL,Rh表型为Ccee。受血者输血后抗体筛查阳性,并鉴定为抗D和抗C,抗D效价512,抗C效价128。结论RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL红细胞会引起抗-D同种免疫。因此对于RhD阴性献血者应加强DEL型的筛查,必要时可以增加RHD基因检测以保障输血安全。

汉族DEL型孕妇可免去抗-D产前检查

目的鉴于占我国汉族Rh(D)阴性人群约25%的DEL型红细胞具有基本完整的D抗原表位,临床观察汉族DEL型孕妇妊娠Rh(D)阳性胎儿是否产生同种免疫反应。方法跟踪观察和测定207名有妊娠史的Rh(D)阴性孕妇产前和产后血清抗-D,根据RhCcEe表型和PCR检测RHD1227A等位基因鉴别DEL型和真实Rh(D)阴性表型。结果 207名Rh(D)阴性孕妇中,DEL型个体46名(22.2%)均未检测到血清抗-D,即使5名个体有2次或以上生育史,亦未见同种免疫反应。161名真实Rh(D)阴性个体中检出40例抗-D阳性(24.8%);80名有生育史的真实Rh(D)阴性孕妇中30例抗-D阳性(37.5%);20名有2次或以上生育史的真实Rh(D)阴性孕妇中12例存在抗-D(60.0%)。结论 DEL型孕妇妊娠Rh(D)阳性胎儿发生抗-D同种免疫反应的可能很小,我国Rh(D)汉族阴性孕妇中的DEL个体可免去定期的产前抗-D检测,以及免去预防性Rh免疫球蛋白的使用。

D^u型及Del型献血者的筛查及其ABORh血型分布调查

目的了解Du型及Del型献血者的分布状况,以及其ABORh血型的分布状况。方法用Rh（D）初筛试验及Rh（D）确证试验筛查74476例Rh（D）阳性献血者中的Du型献血者;用吸收放散试验筛查186例Rh（D）阴性献血者中的Del型献血者;用ABO正反定型试验及直接凝集试验,分别鉴定Du型及Del型献血者的ABORh血型。结果在74476例Rh（D）阳性献血者中,共筛出15例Du型献血者,筛出率为0.201%;在186例Rh（D）阴性献血者中,共筛出35例Del型献血者,筛出率为18.817%;15例Du型献血者的ABO血型为A型2例、B型2例、O型10例、AB型1例,其中10例Du型献血者的Rh血型为CCDuee型4例、CcDuEe型3例、CCDuEe型1例、CcDuee型1例、ccDuEE型1例;35例Del型献血者的ABO血型为A型10例、B型5例、O型15例、AB型5例,其中27例Del型献血者的Rh血型为CCDelee型11例、CcDelee型6例、ccDelEe型4例、CCDelEe型3例、ccDelEE型1例、ccDelee型1例、CcDelEe型1例。结论 Du型献血者的分布频率较高,Del型献血者的分布频率较低,Du型及Del型献血者的ABO血型分布特点与随机人群的ABO血型分布特点相类似,Du型及Del型献血者的Rh血型分布各有其特点。

RhD阴性受血者输注DEL型血液诱发抗-D 1例

目的通过血型血清学试验和分子生物学技术鉴定出1例RhD阴性受血者输注DEL型血液后诱发抗-D产生。方法采用血型血清学方法进行血型抗原及抗体检测,PCR-SSP法进行RhD基因分型检测。结果受血者ABO血型为A型,Rh分型为ccdee,直抗阴性。受血者随机输注的3位供者均为DEL RhD1227A纯合型,且受血者输血后2周抗体筛查为阳性,并鉴定为抗-D。结论 RhD阴性受血者输注DEL RhD1227A纯合型血液后可以引起初次免疫反应,并产生不规则抗-D。所以对于RhD阴性供血者应加强阴性确认,必要时可以增加RhD的基因检测以保障临床输血安全。

Del型RHD基因外显子区及启动子区多态性检测

目的检测Del型RHD基因启动子区是否存在多态性。方法对32例Del型样本RHD基因编码区10个外显子扩增并测序;对样本RHD基因启动子区-1--1 246 bp内的4个多态性位点进行检测;对RHD基因启动子区+3--1138扩增并测序。结果 32例Del型样本均携带完整的RHD基因,并且均为RHD基因1227位点G>A的突变;所有样本均检测到4个多态性位点;RHD基因启动子区+3--1138测序未发现突变位点。结论 Del型RHD基因启动子区序列与正常基因一致,未发现新的突变位点,提示Del型D抗原的弱表达与启动子区突变无关。

DEL型个体抗体筛选的调查分析

目的探讨DEL型个体是否对D抗原产生体液免疫应答。方法对经间接抗球蛋白试验确认为Rh(D)阴性的1030名献血者和89名孕妇做抗体筛选,对抗体筛选为阳性的献血者用10个O型谱细胞和筛选特异细胞做抗体鉴定。对产生抗-D的Rh(D)阴性献血者和孕妇用DEL特异性引物鉴定检测DEL型;对117名Rh(D)阴性献血者以吸收放散试验检测DEL型,对DEL阳性的献血者做抗体筛选。结果10名献血者和5名孕妇产生抗-D,他们的DEL基因分型均为阴性;117名Rh(D)阴性献血者DEL吸收放散试验检测阳性24名,并且抗-D阴性。结论在产生抗-D的个体中未检出DEL型,在DEL型的个体亦未检出抗-D。

南昌地区RhD阴性献血者DEL型检测及分析

目的分析南昌地区RhD阴性献血者中DEL表型的分布及RhD基因情况。方法对经间接抗人球蛋白试验确认的RhD阴性献血者进行抗原分型;采用酸吸收放散方法从中筛选DEL型进行分型,并与其它地区进行比较;应用PCR-SSP技术检测DEL献血者RhD基因。结果 107例RhD阴性献血者中ccee 53例(49.53%),Ccee 37例(34.58%),CCee 11例(10.28%),CcEe 3例(2.80%),ccEe 3例(2.80%);检出DEL型30例,占比为28.04%,除上海外与其它地区检出比例无统计学差异;表型分布为Ccee 23例(76.67%),CCee 7例(23.33%),与各地区DEL型献血者表型分布无统计学差异;送检的5例DEL型标本第9外显子均有1227G>A突变,其中杂合子4例(DEL/d),纯合子1例(DEL/DEL)。结论南昌地区DEL型献血者表型分布与其它地区相似,RhD 1227A是南昌地区DEL表型个体的重要遗传标记。

DEL型定量给料机的缺陷及改进建议

本文主要分析了DEL型定量给料机的原理、秤体结构和安装位置缺陷、使用中产生的问题及改进建议。

DEL型血诱导Rh(D)阴性患者产生抗-D并致配血不合

分析1例Rh(D)阴性患者输注DEL型血后产生高效价抗-D致交叉配血不合的原因,为Rh(D)阴性患者安全输血提供策略建议。采用盐水试管法和微柱凝胶抗人球蛋白法进行不规则抗体筛查和性质鉴定,采用微柱凝胶抗人球蛋白法对不规则抗体进行特异性鉴定和效价测定;将配血不合红细胞与患者血清在37℃温吸收后在56℃热放散,对所得放散液采用微柱凝胶抗人球蛋白法进行抗体特异性鉴定,同时采用吸收放散法对献血员红细胞进行DEL型检测。患者血清中不规则抗体筛查结果为阳性,抗体性质为IgG型,抗体特异性为抗-D,效价为2 048,配血不合红细胞吸收放散液抗体特异性鉴定为抗-D,经吸收放散检测该献血员为DEL型(回顾调查该患者在17 d前输注的一袋红细胞也为DEL型)。Rh(D)阴性患者接受DEL型血输注,具有产生抗-D的潜在风险,所产生的抗-D可再次结合DEL型红细胞致配血不合。对于有输血史、妊娠史、有生育要求的女性以及输血依赖等群体输注应持谨慎态度。对已经产生抗-D患者,在非紧急情况不应输注,避免溶血性输血不良反应的发生,提高输血的安全性和有效性。

亚洲型DEL母亲产生抗-c致新生儿溶血病的母子输血救治

目的 探讨1例亚洲型DEL母亲产生抗-c引起的新生儿溶血病的母子输血救治方案。方法 盐水试管法鉴定母子ABO血型、Rh表型;经典抗人球蛋白法进行母亲RhD阴性确认、RhD吸收放散试验;经典抗人球蛋白法、抗人球蛋白卡式法和凝聚胺法进行母亲意外抗体筛查及鉴定、抗体效价检测、交叉配血试验;新生儿溶血3项试验使用抗人球蛋白卡式法;RHD基因分型采用商品化RHD阴性鉴定基因检测试剂盒(PCR-SSP法)进行产妇RHD基因分型。结果 产妇Rh血清学表型CCee, DEL基因检测结果RHD^(*)1227A,产生抗-c;患儿Rh血清学表型DCcEe,直抗阳性,红细胞放散阳性,结合母亲孕产史、患儿临床表现和血液检查结果,诊断为抗-c引起的新生儿溶血病。结论 亚洲型DEL母亲产生抗-c并引起新生儿溶血病的患儿选择Rh表型DCCee红细胞输注,母亲选择Rh表型CCee冰冻解冻去甘油红细胞输注,输血有效。

献血者Rh(D)阴性DEL表型调查研究

目的通过对Rh(D)阴性献血者的试验检测,了解DEL表型。方法用盐水法、木瓜酶法3家试剂检测RhD(-)及其RhCcDE 4个因子;阴性者用谱细胞进行抗体筛查;红细胞用抗-D作吸收放散试验,观察试验结果;吸收前、后抗-D抗体检测其效价。结果无偿献血者16935例,其中Rh(D)阴性75例,占4.42%;吸收放散试验:75例经吸收放散试验检测,阳性标本47例、占62.67%,阴性28例;吸收前、后抗体效价比较:吸收后抗体效价不变的53例,效价下降的有22例。结论在鉴定Rh(D)阴性中,DEL表型应用血型血清学吸收放散的方法正确鉴定;在临床输血中,含有弱D与DEL的个体,反复多次输血后就有产生抗体的可能。含有弱D与DEL的个体,作为供者应该当成阳性,作为受者应该当成阴性,防止因输血产生免疫性抗体,引起输血反应。

蚌埠地区124例RhD阴性献血者的RHCE表型及DEL型的分布与基因研究

目的研究蚌埠地区RhD阴性献血者的RHCE表型,DEL的表型、分布和RHD基因的外显子存在情况。方法通过使用抗-D(IgM)试剂筛查出RhD(IgM)阴性献血者;再使用3个厂家或不同批号的抗-D(IgG)试剂,经间接抗人球蛋白试验(IAT)确认RhD阴性样本;然后采用吸收放散试验筛选其中的DEL型,同时检测其表现型,并对15份DEL型样本采用PCR方法进行基因扩增和产物分析。结果 124例RhD阴性献血者中ccee表型为77例(62.1%),Ccee为38例(30.6%),CCee为8例(3.3%),ccEe为1例(0.1%);DEL型共15例占RHD阴性样本的12.1%,其中ccee 2例,Ccee 11例,Ccee 2例;并检测出15例DEL型样本的3、4、5、6、7、9、10共7个特异性外显子。结论蚌埠地区RhD阴性献血者中Rh表型存在多态性,ccee表型的比例达62.1%;DEL型的比例低于相关报道,DEL型具有全部RHD基因外显子。

RhD(-)无亲缘关系献血者Du和Del变异型分布调查

目的调查RhD(-)无亲缘关系献血者Du和Del变异型分布情况。方法对盐水法初筛为RhD(-)无亲缘关系献血者采用间接抗球蛋白试验检测Du型,采用吸收放散法检测Del型。结果初筛为RhD(-)327例标本中,检出Du 20例,占6.12%,Del型51例,占15.59%,确证RhD(-)256例,占78.29%。确证RhD(-)献血者中ccee表现型最多,占48.32%,其次是Ccee,占23.55%;Du型中ccEe占3.98%,其次是Ccee,占1.53%;Del型中Ccee占10.70%,CCee占1.83%。结论常规检测RhD(-)的献血者应采用更为敏感的试验确证是否为Du型或Del型。为保障输血安全,Du型和Del型献血者应作RhD阳性看待,而作为受血者则应视为RhD阴性。

Del血型研究进展

Rh血型系统在临床输血中的意义仅次于ABO血型系统,而Rh血型D抗原是Rh系统中最重要的红细胞血型抗原,可引起严重新生儿溶血病和溶血性输血反应。Rh血型系统中的D抗原有许多D变异型，Del表型就是其中非常特殊的一种变异型。中国汉族Rh阴性表型人群中Del型常见．Del型是否表达正常的RhD蛋白．Del型是否对D抗原产生免疫应答对我国临床输血以及Rh同种免疫的防治具有重要意义。现对Del血型的研究进展综述如下。

河北地区发现6例RHD(711delC)基因型分布

一直以来RhD血型因其在临床输血和产科学上的重要性及其自身的复杂性而成为研究的热点。RhDel表型是一种变异的极弱RhD阳性血型,长期以来Del型的个体一直被当作RhD阴性对待,随着研究的深入,