大连RhD阴性献血者中DEL血型的分子生物学背景研究

目的研究大连地区RhD阴性献血者中,DEL血型的频率、Rh表型及DEL血型的分子生物学背景。方法收集大连市血液中心2018年11月~2019年10月,经RhD确认实验为RhD阴性的献血者标本共355份。用单克隆抗体的血清学方法检测标本的Rh C、c、E和e表型;吸收放散实验检测DEL血型;磁珠分离法提取全血DNA;熔解曲线分析法检测DEL血型标本是否存在RHD 1227G>A基因突变;Sanger测序法对RHD基因所有外显子进行测序。结果 355例RhD确认阴性的献血者中,55例(15.5%)为DEL血型,其余300例(84.5%)为RhD真阴性。在55例DEL血型中,Rh表型以Ccee为主(45/55,81.8%);而在300例RhD真阴性中,Rh表型则以ccee为主(210/300,70.0%)。55例DEL血型中,51例(92.7%)存在RHD 1227G>A基因突变,其余4例(7.3%)为RHD基因其它位点突变。结论大连地区RhD确认阴性的献血者中,DEL血型频率为15.5%,DEL血型主要以Ccee表型及RHD 1227G>A基因突变为主。

DAT阳性的DEL血型鉴定及其家系分析

目的:对1例DEL血型合并直接抗人球蛋白试验阳性患者进行血型鉴定并分析其遗传规律。方法:采用常规血清学试剂对先证者及其家系成员RhD血型进行血清学分析,使用PCR-SSP方法对RHD基因10个外显子及侧翼序列进行扩增、测序并分析其杂合性。对先证者家系进行调查并分析DEL血型遗传规律。结果:先证者DAT强阳性,RHD基因9外显子存在1227G>A等位基因(RHD*DEL1),其母亲为RHD*DEL1携带者。RHD合子型鉴定为RHD+/RHD-,提示该个体单倍型为CD1227Ae/Cde。结论:先证者为DEL型(RHD*DEL1)。

Rh血型系统D^(el)型研究进展

Rh血型系统是人类红细胞血型系统中最为复杂且最具多态性的系统，在临床的重要性仅次于ABO血型系统，而且其分子机理又非常复杂。

抗-D免疫球蛋白致敏DEL型孕妇及新生儿红细胞1例

临床资料2017年收检1例新生儿溶血病标本,患儿母亲为O型RhD阴性,无输血史,有2次人工流产史,此为第3胎,孕28周左右进行的不规则抗体筛查结果为阴性,随后自行购买并注射抗-D免疫球蛋白1支。患儿系剖宫产,当天检测非结合胆红素为44μmol/L,2d后出现轻微黄疸。患儿为A型RhD阴性,提示可能有常见的ABO新生儿溶血症。患儿综合治疗19d后出院,出院时非结合胆红素为16.4μmol/L。

等位基因特异性PCR技术在DEL表型基因分型中的应用

目的:建立DEL表型的基因分型方法,用于快速鉴定DEL表型。方法:用RHBox基因分型方法鉴定标本的基因型,用血清学方法确定标本的DEL表型。根据RHD1227A等位基因序列设计等位基因特异性-聚合酶链反应(allele specific-polymerase chain reaction,AS-PCR),用于DEL表型基因分型,结果同血清学的方法作比较,探讨临床应用的可行性。结果:28例RHBox基因分型为RHD-/RHD-的标本,血清学方法、基因分型方法DEL表型鉴定结果均为阴性;在25例RHBox基因分型为RHD+/RHD-或RHD+/RHD+的标本中,用血清学方法检出的11例DEL表型标本,基因分型方法均扩增到867 bp的1227A等位基因条带;1例血清学方法阴性,而基因分型方法检测为阳性,后经测序分析证实RHD1227A为阳性,分析此例标本可能为血清学方法漏检。这说明在鉴定DEL表型的方法中基因分型方法比血清学有更高的灵敏度。结论:AS-PCR方法可用于临床筛选Rh阴性人群中的DEL表型。

应用多重PCR方法鉴定RHD基因型的研究

目的建立一种可靠的PCR方法,用于RHD血型基因型的研究。方法根据RHD血型基因的特点,设计针对不同RHD基因型的特异性引物,建立多重PCR方法,并与商用试剂盒进行对比。结果本研究所建立的用于鉴定RHD血型基因型的多重PCR方法,与商用试剂盒具有相同的试验结果。结论本研究建立的多重PCR方法具有简便、准确和经济的特点,可以用于RHD基因分型。