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Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 王金光 郑启新 +2 位作者 赵铭 郭晓东 刘国辉 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期792-795,i0001,共5页
目的:观察Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响。方法:将36只SD大鼠以改良Allen法制作大鼠急性脊髓损伤(SCI)模型(脊髓中度损伤),分为对照组(单纯损伤A组18只,按时间段又分为A1,A2,A3),治疗组(应用Z-DEVD-FMK治疗B... 目的:观察Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响。方法:将36只SD大鼠以改良Allen法制作大鼠急性脊髓损伤(SCI)模型(脊髓中度损伤),分为对照组(单纯损伤A组18只,按时间段又分为A1,A2,A3),治疗组(应用Z-DEVD-FMK治疗B组18只,按时间段又分为B1,B2,B3)。损伤后6h,3d,8d对脊髓损伤区进行组织学HE染色,细胞凋亡TUNEL标记,Fas凋亡因子检测,免疫组化检测Caspase-3的表达变化,同时采用BBB评分方法和斜板试验观察神经功能恢复情况。结果:对照组和治疗组均见TUNEL阳性的凋亡细胞和Cas-pase-3表达。Z-DEVD-FMK治疗组神经细胞的凋亡数减少,Caspase-3表达降低,神经功能增强,两组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK能减少继发性脊髓损伤细胞凋亡和促进神经功能的恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 凋亡 CASPASE-3 Z-devd-FMK
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z-DEVD-fmk干预甲基苯丙胺依赖大鼠脑细胞凋亡与Bcl-2蛋白的表达 被引量:1
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作者 李新新 李辉 +2 位作者 陈晓雷 杨秀丽 翟丽颖 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期730-732,741,共4页
目的观察caspase-3抑制剂(z-DEVD-fmk)对甲基苯丙胺(MA)依赖大鼠脑组织细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的影响。方法健康Wistar大鼠40只,随机分为空白对照组、MA依赖模型组、z-DEVD-fmk+MA组和z-DEVD-fmk对照组,每组10只。空白对照组腹腔注射... 目的观察caspase-3抑制剂(z-DEVD-fmk)对甲基苯丙胺(MA)依赖大鼠脑组织细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的影响。方法健康Wistar大鼠40只,随机分为空白对照组、MA依赖模型组、z-DEVD-fmk+MA组和z-DEVD-fmk对照组,每组10只。空白对照组腹腔注射生理盐水;MA依赖模型组、z-DEVD-fmk+MA组按剂量逐日递增法建立MA依赖大鼠实验动物模型,同时脑室注射z-DEVD-fmk进行干预治疗;z-DEVD-fmk对照组脑室注射z-DEVD-fmk(20μg/100 g)。采用TUNEL法观察各组大鼠脑组织细胞凋亡变化,免疫组化法检测Bcl-2蛋白表达的改变。结果 MA依赖模型组脑组织细胞凋亡明显增加,Bcl-2蛋白表达下降;z-DEVD-fmk+MA组脑组织细胞凋亡明显减少,Bcl-2蛋白表达增加。结论 z-DEVD-fmk能够抑制MA依赖大鼠脑组织细胞凋亡,增加Bcl-2蛋白表达,z-DEVD-fmk具有干预与抑制MA致大鼠脑组织的损伤作用。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 CASPASE-3抑制剂 z-devd-fmk 凋亡 BCL-2
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Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡的防护作用
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作者 王凯军 姚克 +3 位作者 徐雯 邱培瑾 申屠形超 孙朝晖 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第4期350-352,共3页
目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase-3)及其抑制剂Ac-DEVD-CHO对过氧化氢(H_2O_2)诱导大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响,为进一步研究晶状体氧化损伤机制及其防护提供实验依据。方法 采用大鼠离体晶状体器官培养的方法,用Western blot法... 目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase-3)及其抑制剂Ac-DEVD-CHO对过氧化氢(H_2O_2)诱导大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响,为进一步研究晶状体氧化损伤机制及其防护提供实验依据。方法 采用大鼠离体晶状体器官培养的方法,用Western blot法分析氧化损伤后晶状体上皮细胞内caspase-3蛋白酶活性,流式细胞AnnexinV-PI双染色法定量检测caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对晶状体上皮细胞凋亡率的影响。结果 氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡过程中,细胞内caspase-3酶活性明显增强,caspase-3特异性抑制剂Ac-DEVD-CHO可有效降低晶状体上皮细胞凋亡率。结论 caspase-3蛋白酶在氧化损伤诱导晶状体上皮细胞凋亡过程中占有重要地位,caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO可有效防护体外晶状体上皮细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 CASPASE-3抑制剂 Ac-devd-CHO 氧化损伤 诱导 晶状体 上皮细胞 防护作用 细胞凋亡
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z-DEVD-fmk对甲基苯丙胺依赖大鼠脑海马组织caspase-3活性及其蛋白表达的影响
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作者 陈晓雷 翟丽颖 +2 位作者 王一然 杨秀丽 李新新 《沈阳医学院学报》 2014年第4期202-204,共3页
目的:观察z-DEVD-fmk(caspase-3抑制剂)对甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)依赖大鼠海马组织caspase-3活性及其蛋白表达的影响。方法:选取健康Wistar大鼠40只,随机分为空白对照组、MA依赖组、MA+z-DEVD-fmk干预组和z-DEVD-fmk组,各10只... 目的:观察z-DEVD-fmk(caspase-3抑制剂)对甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)依赖大鼠海马组织caspase-3活性及其蛋白表达的影响。方法:选取健康Wistar大鼠40只,随机分为空白对照组、MA依赖组、MA+z-DEVD-fmk干预组和z-DEVD-fmk组,各10只。参考文献建立MA依赖大鼠实验动物模型,经侧脑室注射z-DEVD-fmk干预治疗,采用酶标仪法检测caspase-3活性,采用免疫组化法检测Caspase-3蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,MA依赖组和MA+zDEVD-fmk干预组海马组织caspase-3活性明显升高(P<0.01),Caspase-3蛋白表达增多(P<0.01);与MA依赖组比较,Ma+z-DEVD-fmk干预组caspase-3活性明显降低(P<0.05),Caspase-3蛋白表达减少(P<0.05)。结论:z-DEVD-fmk能够抑制MA依赖大鼠海马组织caspase-3活性,降低Caspase-3蛋白表达,z-DEVD-fmk具有干预与保护MA致大鼠脑组织损伤作用。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 z-devd-fmk(caspase-3抑制剂) caspase-3 活性
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Ce^(3+)、VC和Ac-DEVD-CHO浸种对沙葱种子抗氧化系统的影响 被引量:3
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作者 王佳琪 李娜 +3 位作者 魏鹏超 杨忠仁 张东 张凤兰 《北方农业学报》 2021年第4期76-82,共7页
【目的】研究Ce^(3+)、VC和Ac-DEVD-CHO浸种对不同贮藏年限沙葱种子抗氧化系统的影响。【方法】以贮藏3年、5年和7年的沙葱种子为试验材料,用蒸馏水(CK)、CeCl_(3)、VC、Ac-DEVD-CHO、VC+CeCl_(3)和Ac-DEVD-CHO+CeCl_(3)对沙葱种子进行... 【目的】研究Ce^(3+)、VC和Ac-DEVD-CHO浸种对不同贮藏年限沙葱种子抗氧化系统的影响。【方法】以贮藏3年、5年和7年的沙葱种子为试验材料,用蒸馏水(CK)、CeCl_(3)、VC、Ac-DEVD-CHO、VC+CeCl_(3)和Ac-DEVD-CHO+CeCl_(3)对沙葱种子进行浸种处理,测定不同处理、不同贮藏年限沙葱种子SOD、POD、CAT、APX活性以及·O2-产生速率、H2O2和MDA含量。【结果】与CK相比,CeCl_(3)处理显著提高了贮藏5年、7年沙葱种子的SOD活性(P<0.05),不同浸种处理显著提高了贮藏3年沙葱种子的POD活性(P<0.05),Ac-DEVD-CHO处理显著提高了贮藏5年、7年沙葱种子的CAT活性(P<0.05),不同浸种处理显著提高了贮藏7年沙葱种子的APX活性(P<0.05)。与CK相比,不同浸种处理均能降低贮藏5年和7年沙葱种子的·O2-产生速率,其中,VC+CeCl_(3)和Ac-DEVD-CHO+CeCl_(3)处理显著降低了沙葱种子的·O_(2)^(-)产生速率(P<0.05);VC、Ac-DEVD-CHO、VC+CeCl_(3)和Ac-DEVD-CHO+CeCl_(3)处理显著降低了贮藏5年、7年沙葱种子的H2O2含量(P<0.05);CeCl_(3)和VC处理降低了贮藏5年和7年沙葱种子的MDA含量,但差异不显著(P>0.05)。【结论】与其他浸种处理相比,CeCl_(3)处理提高沙葱种子SOD活性的效果最好;从整体来看,VC和Ac-DEVD-CHO与CeCl_(3)共同处理对清除沙葱种子·O_(2)^(-)产生速率的效果更好。 展开更多
关键词 沙葱种子 贮藏年限 CeCl_(3) VC Ac-devd-CHO 抗氧化系统
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Caspase-3 and its inhibitor Ac-DEVD-CHO in rat lens epithelial cell apoptosis induced by hydrogen in vitro 被引量:8
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作者 姚克 王凯军 +3 位作者 徐雯 孙朝晖 申屠形超 邱培瑾 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2003年第7期1034-1038,共5页
Objective To investigate the role of caspase 3 and its inhibitor Ac DEVD CHO in rat lens epithelial cell apoptosis induced by hydrogen peroxide (H 2O 2) in vitro Methods Rat lenses were incubated in modifi... Objective To investigate the role of caspase 3 and its inhibitor Ac DEVD CHO in rat lens epithelial cell apoptosis induced by hydrogen peroxide (H 2O 2) in vitro Methods Rat lenses were incubated in modified Eagle's medium containing 2 mmol/L H 2O 2 to induce apoptosis in vitro Apoptosis in lens epithelial cells was assessed by transmission electron microscopy and annexin V propidium iodide (PI) double staining flow cytometry after 12, 24 and 48 h of incubation The activity of caspase 3 was analyzed by western blotting Results Observations under transmission electron microscopy revealed that 2 mmol/L H 2O 2 could effectively induce lens epithelial cell apoptosis in vitro Caspase 3 activity increased during cell apoptosis and the peak measurement occurred at 24 h after treatment with H 2O 2 Cell apoptosis was blocked by caspase 3 inhibitor Ac DEVD CHO Conclusions The activation of caspase 3 plays an important role in executing apoptosis in H 2O 2 treated lens epithelial cells and in the formation of cataract The caspase 3 inhibitor Ac DEVD CHO may effectively prevent lens epithelial cell apoptosis caused by oxidative injury 展开更多
关键词 caspase 3 LENS epithelial cells hydrogen peroxide Ac devd CHO APOPTOSIS
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Caspase抑制剂对缺氧诱导的心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响 被引量:7
7
作者 赵军 郑世营 +2 位作者 顾振纶 杨吉成 盛伟华 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第4期510-513,554,共5页
目的探讨Caspase-3特异性抑制剂在缺氧诱导的培养乳鼠心肌细胞凋亡中的作用及其相关基因的表达。方法将SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为对照组、缺氧72 h组及Caspase-3抑制剂组(缺氧72 h前加入0.1μmol/L的Z-DEVD-fmk)3组。应用Western b... 目的探讨Caspase-3特异性抑制剂在缺氧诱导的培养乳鼠心肌细胞凋亡中的作用及其相关基因的表达。方法将SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为对照组、缺氧72 h组及Caspase-3抑制剂组(缺氧72 h前加入0.1μmol/L的Z-DEVD-fmk)3组。应用Western blot分析法和RT-PCR技术检测Caspase-3、PARP蛋白及Caspase-3mRNA的表达,同时利用流式细胞仪分析心肌细胞凋亡的变化;借助Caspase-3荧光分析试剂盒,荧光比色法检测心肌细胞凋亡过程中Caspase-3活性的变化。结果Caspase-3抑制剂组细胞凋亡百分率为(14.93±2.47)%,显著低于缺氧72 h组的(48.43±4.18)%,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Caspase-3抑制剂组PARP及Caspase-3蛋白表达显著低于缺氧72 h组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。RT-PCR分析显示,Caspase-3抑制剂组Cas-pase-3 mRNA的表达量较缺氧72 h组降低了62.05%,差异有高度统计学意义,Caspase-3活性检测显示,Caspase-3抑制剂组的Caspase-3活性较缺氧72 h组降低了52.85%,差异有高度统计学意义(均P<0.01)。结论Caspase-3抑制剂能明显抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡、Caspase-3蛋白和mRNA的表达、Caspase-3蛋白酶活性和PARP的裂解。 展开更多
关键词 Z-devd-fmk 缺氧 心肌细胞 凋亡 CASPASE-3
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Caspase-3抑制剂抗新生鼠缺氧缺血脑损伤作用的观察 被引量:1
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作者 张雨平 赵聪敏 +2 位作者 王丽雁 于若谷 温恩懿 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期2068-2070,共3页
目的观察Caspase-3特异性肽类抑制剂AC-DEVD-CHO对新生鼠缺氧缺血脑损伤(hypoxia-ischemiabraininjury,HIBI)模型的作用。方法建立HIBI模型,予AC-DEVD-CHO经脑室注射后通过病理学、原位细胞凋亡检测观察近期效果,通过穿梭箱、自主活动... 目的观察Caspase-3特异性肽类抑制剂AC-DEVD-CHO对新生鼠缺氧缺血脑损伤(hypoxia-ischemiabraininjury,HIBI)模型的作用。方法建立HIBI模型,予AC-DEVD-CHO经脑室注射后通过病理学、原位细胞凋亡检测观察近期效果,通过穿梭箱、自主活动仪、疲劳仪等测试远期学习记忆和运动能力以判断远期效果。结果Ac-DEVD-CHO治疗组HIBI新生鼠较生理盐水对照组脑皮质、海马神经细胞凋亡显著减少,穿梭箱实验中被电击时间(ST)缩短,但在疲劳仪和自主运动实验中无显著差异。结论Ac-DEVD-CHO侧脑室注射可显著减少HIBI新生鼠脑凋亡细胞新生鼠的远期学习记忆能力有所改善,对运动能力却无明显改善。 展开更多
关键词 脑缺血 脑缺氧 CASPASE-3 AC—devd—CHO
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caspase-3特异性肽类抑制剂抗新生鼠缺氧缺血脑损伤量效研究 被引量:2
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作者 张雨平 赵聪敏 +2 位作者 王丽雁 温恩懿 于若谷 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第19期1762-1763,共2页
目的 观察caspase-3特异性肽类抑制剂AC-DEVD-CHO(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-aldehyde)抗新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage, HIBD)的量效关系,为caspase-3抑制剂在HIBD中的应用提供研究基础.方法 建立HIBD模型... 目的 观察caspase-3特异性肽类抑制剂AC-DEVD-CHO(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-aldehyde)抗新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage, HIBD)的量效关系,为caspase-3抑制剂在HIBD中的应用提供研究基础.方法 建立HIBD模型后予新生鼠不同剂量AC-DEVD-CHO脑室注射,24h后用四肽荧光底物法检测鼠脑caspase-3活性,确定最佳剂量.通过病理学、原位细胞凋亡检测等考察AC-DEVD-CHO对HIBD的效果.结果 HIBD新生鼠患侧脑组织caspase-3活性随注射Ac-DEVD-CHO剂量增加而递减,至300~400ng时,差别已不明显.Ac-DEVD-CHO 300ng治疗组HIBD新生鼠脑皮质、海马神经细胞凋亡百分率(30.2±11.2)%较生理盐水(NS)对照组(44.6±12.4)%明显降低.结论 caspase-3抑制剂对新生鼠HIBD具有脑保护作用,300ng/只为最佳治疗剂量. 展开更多
关键词 脑缺血 脑缺氧 CASPASE-3 AC-devd-CHO
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苦参碱诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的相关机制研究 被引量:3
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作者 周美英 魏林珍 +2 位作者 王海琳 张爱笠 甄洁玉 《实用中西医结合临床》 2016年第8期1-4,共4页
目的:观察苦参碱体外诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡效应并对其可能的作用机制进行初步探讨。方法:将不同浓度(0.00、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/ml)的苦参碱分别作用于体外培养的宫颈癌细胞,在不同时间点(24、48、72 h),采用MTT法检测细胞的... 目的:观察苦参碱体外诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡效应并对其可能的作用机制进行初步探讨。方法:将不同浓度(0.00、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/ml)的苦参碱分别作用于体外培养的宫颈癌细胞,在不同时间点(24、48、72 h),采用MTT法检测细胞的增殖情况;采用Annexin-Ⅴ和PI双染法在流式细胞仪上检测细胞的凋亡率;采用Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达。结果:各组苦参碱对SiHa细胞的增殖均有抑制作用,MTT和流式细胞结果显示,不同浓度的苦参碱对细胞生长抑制率与对照组相比存在明显差异(P<0.05),呈剂量效应正相关及时间效应正相关。加入Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK后,各组细胞凋亡率与只加苦参碱组相比凋亡率下降。Western blot检测结果显示Caspase-3蛋白水平随苦参碱浓度的提高而增加(P<0.05)。结论:苦参碱可诱导宫颈癌SiHa细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与提高Caspase-3活性有关。 展开更多
关键词 苦参碱 宫颈癌 细胞增殖 细胞凋亡 Z-devd-FMK CASPASE-3
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新型肿瘤凋亡显像PET探针的制备与表征 被引量:1
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作者 王伟 林建国 +4 位作者 刘桂青 邱玲 吕高超 李珂 罗世能 《南京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第1期107-113,119,共8页
设计合成一种可检测肿瘤凋亡的新型正电子发射断层显像(PET)探针,并对其理化性质和生物学性质进行研究。采用"点击化学"反应将标记基团和含天门冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天门冬氨酸(Asp-Glu-Val-Asp,DEVD)序列的多肽连接得到标... 设计合成一种可检测肿瘤凋亡的新型正电子发射断层显像(PET)探针,并对其理化性质和生物学性质进行研究。采用"点击化学"反应将标记基团和含天门冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天门冬氨酸(Asp-Glu-Val-Asp,DEVD)序列的多肽连接得到标记前体1,通过简便的一步^(18)F标记方法制得放射性分子探针^(18)F-1,分别考察了它在PBS缓冲液和血清中的稳定性,并对其脂水分配系数进行了检测。结果显示,制备^(18)F-1所需放射性标记时间为40 min,放化纯达98%,比活度为1.5 Ci/μmol;4 h内,^(18)F-1在PBS和血清中的稳定性均大于96%;脂水分配系数为log P=-0.995±0.103,表明探针具有较好的水溶性。结果表明^(18)F-1是一个潜在的PET凋亡显像探针,值得进一步研究。 展开更多
关键词 正电子发射断层显像 凋亡显像探针 肿瘤凋亡 分子探针 多肽devd 一步18F标记 点击化学
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体外原代培养大鼠胚胎脊髓神经细胞机械损伤后的凋亡与caspase-3的表达 被引量:1
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作者 刘希伟 齐建国 王廷华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期267-272,共6页
为了研究体外培养大鼠胚胎脊髓神经细胞损伤前后的凋亡变化及caspase-3的表达情况,本实验建立了一个模拟脊髓横断损伤后脊髓组分-原代培养的脊髓神经细胞机械损伤模型,并用Hoechst33342/PI双染法检测脊髓神经细胞的凋亡变化,用免疫荧光... 为了研究体外培养大鼠胚胎脊髓神经细胞损伤前后的凋亡变化及caspase-3的表达情况,本实验建立了一个模拟脊髓横断损伤后脊髓组分-原代培养的脊髓神经细胞机械损伤模型,并用Hoechst33342/PI双染法检测脊髓神经细胞的凋亡变化,用免疫荧光染色方法检测caspase-3的表达。结果显示:(1)损伤前几乎未见凋亡的神经细胞,损伤后6 h凋亡细胞开始出现,损伤后12 h明显增多,1 d时达高峰,但损伤后3 d凋亡细胞开始呈明显下降的趋势,至损伤后7 d又开始增加,一直持续到损伤后14d;(2)相应时刻caspase-3表达趋势的改变与脊髓神经细胞凋亡趋势的变化基本相同;(3)经过caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO干预后,凋亡细胞的数量与caspase-3的表达均减少,并呈剂量依赖性。以上结果提示,机械损伤可以诱发体外培养的脊髓神经细胞凋亡,且此凋亡的发生可能与caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 机械损伤凋亡 easpase-3 Ac-devd-CHO 脊髓 大鼠
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Caspase-l、caspase-3与大鼠脑水肿和脑损伤预后的关系 被引量:3
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作者 郭燕舞 杨鹏飞 徐如祥 《创伤外科杂志》 2004年第5期352-355,共4页
目的 研究天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 1(caspase 1)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 3(caspase 3)在大鼠脑损伤中的作用及其与预后的关系。方法 雄性SD大鼠 30 2只 ,随机分为正常对照组、脑损伤组、二甲基亚砜 (DMSO)假治疗组、人... 目的 研究天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 1(caspase 1)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 3(caspase 3)在大鼠脑损伤中的作用及其与预后的关系。方法 雄性SD大鼠 30 2只 ,随机分为正常对照组、脑损伤组、二甲基亚砜 (DMSO)假治疗组、人工caspase 3选择性四肽底物 (DEVD)治疗组和人工caspase 1选择性四肽底物 (YVAD)治疗组。采用自由落体脑损伤模型 ,伤后经脑室分别注射caspase l、caspase 3选择性抑制剂z YVAD fmk、z DEVD fmk ,分别于脑外伤后不同时间点 ,用干湿重法检测脑含水量 ,用ABC法检测caspase 1、caspase 3活性片断P2 0的表达 ,并在伤后 2 4小时和 1周对大鼠进行神经功能评分。结果 大鼠脑外伤后 ,均存在脑水肿和较高水平的caspase l、caspase 3活性片断的表达及神经功能损害。Caspase 1抑制剂z YVAD fmk可抑制caspase l表达 ,并明显减轻脑水肿 ,减轻神经功能损害。Caspase 3抑制剂z DEVD fmk可抑制cas pase 3表达 ,并减轻神经功能损害。结论 caspase l可能通过介导炎症 ,增加脑水肿而在脑外伤继发性损害中起重要作用 ,适当抑制caspase活性可望为脑损伤治疗提供一种新的途径。 展开更多
关键词 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 颅脑损伤 脑水肿 人工caspase-1选择性四肽底物 人工caspase-3选择性四肽底物 大鼠
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大鼠创伤性脑损伤后神经细胞凋亡的动态变化及其与caspase-3基因表达的关系 被引量:22
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作者 吴思荣 惠国桢 +5 位作者 李向东 王之敏 胡锦 祁震宇 俞文华 王清 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期361-366,共6页
目的探讨创伤性脑损伤(TBI)后神经细胞凋亡的变化规律及其与caspase-3基因表达的关系。方法成年健康封闭群sD大鼠120只,随机分为对照组8只、损伤组和抑制物组各56只。Feeney法致伤,抑制物组伤后脑内注射5/agcaspase-3抑制剂z—DEVD... 目的探讨创伤性脑损伤(TBI)后神经细胞凋亡的变化规律及其与caspase-3基因表达的关系。方法成年健康封闭群sD大鼠120只,随机分为对照组8只、损伤组和抑制物组各56只。Feeney法致伤,抑制物组伤后脑内注射5/agcaspase-3抑制剂z—DEVD—fmk。分别在伤后1,6,24,48h和3,7,14d处死取材(每个分析时相点8只大鼠),采集伤灶中心皮质、皮层下白质、海马、齿状回,以及对侧相应部位脑组织,应用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸(dUrP)标记法(TUNEL法)和流式细胞术检测神经细胞凋亡的变化;免疫组化法、蛋白印迹(westernblot)和半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),检测caspase-3蛋白和mRNA的表达;并借助荧光分析试剂盒检测caspase-3活性的变化。所得数据采用SPSS10.1统计软件包进行Spearman等级相关分析和方差分析(SNK-q检验)。结果伤后伤侧各脑区神经细胞凋亡指数(AI)和细胞凋亡百分率(AP)迅速增高,24~48h达峰值,随后逐渐下降,但伤后14d仍高于正常(P〈0.01)。伤后caspase-3蛋白和mRNA的表达明显增加,caspase-3活性迅速上升,峰值在24~48h。其中伤后24h伤侧海马区caspase-3蛋白谱密度与对照组相比增加1484%,caspase-3mRNA的表达量增加1043%,caspase-3活性增加148%;伤后48h伤灶皮层下白质caspase.3蛋白谱密度增加1690%,caspase-3mRNA的表达量增加1181%,caspase-3活性增加183%。Westernblot显示,伤后caspase-3原酶及p17活性亚单位的表达均增强。抑制物组caspase-3蛋白和mRNA的表达均明显下降,caspase-3活性明显降低;同时,AI值和AP值也明显降低。统计学相关分析发现,伤后神经细胞凋亡与caspase-3mRNA和蛋白的表达间呈正相关(r=0.821和r=0.638,P〈0.01),伤后caspase-3在mRNA和蛋白水平的表达间呈正相关(r=0.945,P〈0.01)。结论急性TBI后神经细胞凋亡的发生与caspase-3的激活有关;神经细胞凋亡与其调节基因easpase,3的表达间具有一致性,TBI对caspase-3的调节发生在转录水平前的某一环节。easpase-3抑制剂能有效地阻断TBI后的神经细胞凋亡。 展开更多
关键词 脑损伤 神经细胞 凋亡 CASPASE-3 z—devd—fmk
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