用扫描电镜观察DFRKN-1分离物菌体的方法研究

[目的]选择合适的样品处理方式,在扫描电镜下清晰地观察DFRKN-1分离物菌体的表面结构特征。[方法]以不经过固定液处理的菌体为对照,将使用戊二醛、卢戈氏碘液、福尔马林固定的DFRKN-1分离物菌体细胞采用离心法、直接干燥法收集,进行酒精梯度逐级脱水,干燥并真空喷金后在扫描电镜下观察。[结果]不经过固定液处理的菌体形态脱水变形,经过固定液固定后的样品仍然保持原细胞形态,且戊二醛的固定效果优于其他2种固定剂;离心法不能收集到游动孢子,而直接干燥法收集则弥补了这一缺陷。使用戊二醛固定,直接干燥法收集菌体是处理DFRKN-1分离物样品的最优选择。在电镜下观察到DFRKN-1分离物表面的假根、游动孢子以及孢子囊的释放孔。[结论]通过扫描电镜观察DFRKN-1分离物的结构特征,为研究其与根结线虫的作用机制提供参考。

水稻条纹病毒中国分离物和日本分离物RNA1片段序列比较

首次测定了我国水稻条纹叶枯病常年流行区的云南楚雄(CX)及病害暴发区的江苏洪泽(HZ)的RSV 2个分离物RNA1片段的全长序列,这2个分离物RNA1片段的全长序列均为8970 nts。同源性分析结果表明,HZ与日本T分离物的亲缘关系较CX与T分离物的亲缘关系更为接近。通过对纤细病毒属病毒RNA1编码的依赖于RNA的RNA聚合酶(RdRp)氨基酸序列分析的结果表明,该蛋白除了具有RNA聚合酶特征的基元序列结构外,还存在mRNA的转录过程中所采取的加帽起始机制的保守性结构域位点,这表明,纤细病毒属病毒和布尼安病毒科病毒及甲型流感病毒一样,都是采取加帽起始机制进行转录的。

胡桃提取物抗HIV-1病毒的初步研究

目的:研究胡桃提取物抗HIV-1病毒的作用,寻找新型高效的抗HIV病毒中药先导化合物。方法:采用植物化学柱层析等技术对胡桃进行提取分离,通过体外药效学实验,观察胡桃提取物的抗HIV-1病毒作用,并结合作用靶点的研究对胡桃提取物的作用机制进行探讨。结果:胡桃提取物具有很好的抗HIV-1作用,筛选出6个抗艾滋病毒作用显著的有效部位,其中2个有效部位的作用靶点分别为gp-41跨膜蛋白和HIV整合酶。结论:胡桃提取物具有很强的体外抗HIV-1病毒作用。

中国红豆杉细胞培养物中两种紫杉烷的分离鉴定

从中国红豆杉细胞培养物中分离得到两个紫杉烷化合物 ,它们的结构为 1β-羟基巴卡亭 (1β-hydroxy baccatin )和云南红豆杉甲素 (yunnanxane)。

(2＋1)维拟线性抛物方程和不变子空间

运用条件Lie-Ba¨cklund对称与不变子空间理论相结合的方法研究(2+1)维拟线性抛物方程3种形式的广义泛函分离变量解,即广义泛函多项式形式解、广义泛函三角函数形式解和广义泛函指数形式解,并对方程进行完全分类,得到了精确解中未知函数满足的动力系统.

重组人胰高血糖素样肽-1类似物的制备及活性分析

通过重叠PCR的方法获得重组人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物PP-h[Gly8]GLP-1的目的基因片段,将该基因与融合表达载体pED连接,并在融合伴侣的N末端插入6×His标签,转入E.coli BL21(DE3),构建出重组GLP-1类似物融合表达菌。PP-h[Gly8]GLP-1通过Ni离子亲和色谱和酸水解等步骤分离纯化得到,其纯度大于90%,用电喷雾质谱法测定其相对分子质量与理论分析结果一致。ICR小鼠经口给予耐血糖及血浆胰岛素测定的结果表明,PP-h[Gly8]GLP-1具有明显的降血糖活性和促胰岛分泌作用(P<0.01),为开发潜在的治疗糖尿病药物提供了理论基础。

DFRKN-1碱性磷酸酶的纯化研究

以根结线虫天敌1号分离物为提取碱性磷酸酶的材料,菌体经液氮研磨破碎后,用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀分离,透析获得酶的粗提取液。再经过DEAE-52离子交换和SephadexG-150分子筛两步层析得到纯化倍数为27.17、比活力达10 514U/mg的碱性磷酸酶。

新型膦氮铑配合物的1-己烯氢甲酰化

采用还原胺化法合成了新型膦氮配体铑配合物,并采用FT-IR和NMR(1H,13C,31P)进行结构表征。考察了水含量对膦氮配体铑配合物催化1-己烯氢甲酰化反应的影响,以及各种酸处理对催化剂循环使用的效果。结果表明,适量的水可提高膦氮配体铑配合物对1-己烯氢甲酰化反应的催化活性和选择性。反应后的膦氮配体铑配合物催化剂用适当有机酸萃取进入水相与产物分离,然后改变pH值使其从水相再进入新鲜有机溶剂中,实现催化剂在催化高碳烯烃氢甲酰化反应中的循环使用。

北疆地区辣椒上烟草花叶病毒(TMV)各分离物的差异性研究

以 TMV om为对照 ,测定了辣椒上 5个烟草花叶病毒分离物 P 9、P 38、P 44、P71、TMV wym在 42上辣椒品种、品系上的致病反应 ,结果表明这 5个分离物对辣椒的致病性存在明显差异 :P 71、TMV wym>P 9>P 38、P 44 ;对接种过 5个 TMV分离物的辣椒 (四平头 )进行过氧化物酶 (POD)和酯酶 (EST)同工酶分析 ,结果表明辣椒上 5个 TMV分离物引起的酶活性有差异 ;导致 POD上活性强弱为 TMV wym>P 9、P 38>P 44、P71;引起 EST活性强弱为 P 38>TMV wym、P 44 >P 71>P 9。说明北疆地区辣椒上TMV存在着分化。

离子液体用于牛磺罗定及有关物质的薄层色谱分离

建立了TLC法分离碱性药物牛磺罗定及有关物质2-氨基乙磺酰氯、2-氨基乙磺酰叠氮和2-氨基乙磺酰胺。以0.5%[Bmim]BF4甲醇溶液处理过的硅胶G板为固定相,0.2%二乙胺的甲醇溶液为展开剂,4个化合物经薄层色谱展开后达到完全分离,斑点清晰、无拖尾现象。

大豆分离蛋白-乙二胺接枝物的合成及性质

探讨了以1-(3-二甲氨基丙基-3)-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)催化大豆分离蛋白(SPI)的羧基和乙二胺(EDA)的氨基进行接枝反应制备大豆分离蛋白-乙二胺接枝物(SPI-EDA)的最佳条件。利用激光粒度/Zeta电位仪、FT-IR、HPLC、PCD等对SPI-EDA接枝物进行结构与性质表征。确定适宜的合成条件:反应温度为室温,时间4h,SPI、EDC、EDA与NHS摩尔比1.0∶0.5∶0.6∶0.125。检测结果表明,EDA成功的接枝到SPI羧基基团上,与SPI相比,SPI-EDA的电荷密度、相对分子质量等都有所改善,接枝物SPI-EDA聚集体粒径增大且分布均一。

综述:核小体液-液相分离中早期形核过程的分子结构

研究揭示,核小体阵列在体外具有液-液相分离(liquid⁃liquid phase separation,LLPS)的内在特性,被认为在体内引导染色质区域的结构变化。然而,对于形成的异质凝聚物在分子水平的结构研究,长期以来受到技术限制,从而阻碍了研究人员对核小体液-液相分离的深入理解。为了解决这一难题,张蒙等运用先进的冷冻电子断层扫描技术(Cryo⁃electron tomography,Cryo⁃ET)、结合单分子电子断层重构(individual⁃particle electron tomography,IPET)和基于深度学习的分割技术,确定了液-液相分离在不同阶段的凝聚物的分子组织结构。该研究揭示,核小体的液-液相分离过程涉及到两个主要步骤:首先,旋节分解形成不规则的凝聚物;然后,这些凝聚物经过一个不稳定的过渡阶段,转化为更紧凑的球状核,进一步通过聚集更多旋节材料或与其它球状凝聚物的融合,逐渐形成更大的球状聚集体。此外,连接组蛋白H1催化旋节向球状凝聚物转变的速率,比旋节分解速度快出十倍以上。因此,推测这种转变可能涉及到核小体疏水表面的暴露,进而改变了核小体之间的相互作用。这些发现为染色质从间期结构向中期结构转变提供了新的物理机制线索。

大豆分离蛋白接枝氨基封端聚2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸的合成及溶液性质研究

用巯基乙胺为链转移剂,过硫酸铵为引发剂合成了氨基封端的聚2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸(H2N-PAMPS).再用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)在室温下催化H2N-PAMPS的端氨基与大豆分离蛋白(SPI)的羧基反应形成酰胺键,得到接枝物SPI-g-NH-PAMPS.用1H-NMR、傅利叶红外光谱、13C-NMR对H2N-PAMPS和接枝物SPI-g-NH-PAMPS进行结构表征.用zeta电位仪、紫外可见光光谱,荧光光谱,动态激光光散射对SPI及其接枝物SPI-g-NH-PAMPS的水溶液性质进行了研究.结果表明,与SPI相比,SPI-g-NH-PAMPS的溶解性、表面疏水性、乳化性等有所改善,接枝物SPI-g-NH-PAMPS聚集体粒径增大,形成独特的核壳结构.

富勒烯C_(60)吡咯烷键联噻吩基分子设计的理论研究

利用AM1半经验分子轨道法对所设计的3个富勒烯C60吡咯烷键联噻吩基分子进行优化.计算结果表明,目标物(3)具有较低的跃迁能、较大偶极矩和较高的生成热.LUMO集中分布在C60部分,而HOMO则集中在噻吩环上.通过HOMO和LUMO轨道的比较及电荷分布情况,预测所设计的目标物(3)在基态下可能产生长寿命的电荷分离态.

新型垃圾源头分类机研制成功

北京泽光新源环保科技公司研制的BZL-1型集成联体垃圾源头分类机，可快速自动分离生活垃圾．达到500kg／h的分类处理效率．将混合清运的垃圾分离成厨余物、可直接回收物、塑料袋．使不同成分的生活垃圾实现有序处理．填补了国内外垃圾分类领域的技术空白。

用套式PCR检测蓝舌病病毒

美国I.E.Aradaib等从BTV17型（BTV—17）的非结构蛋白1基因中选择了2对寡核苷酸引物对（BTV1、BTV4和BTV2、BTV3）,用于套式多聚酶链反应（PCR）试验中的两步扩增。第一步,使用外引物对BTV1和BTV4进行扩增,获得一个有826个碱基对（bp）的产品;第二步,用套式或内引物对BTV2和BTV3进行扩增,产生一种有517bp的PCR产品。应用这种套式PCR测定法,可以检测出在细胞培养物中繁殖的北美原型血清型2、10、11、13和17BTV的RNA。使用套式引物对BTV2

类固醇生成因子1和DAX-1的结构表达和应用

1 SF-1和DAX-1的发现和结构 1.1 SF-1 SF-1又称为Ad4BP或NR5A1。LaLa等人于1992年在寻找与类固醇羟化酶基因（CYPs）的启动子元件相互作用的转录因子时发现了SF-1。同时Morohashi利用寡核苷酸亲和柱结合牛肾上腺蛋白提取物分离纯化得到一种分子量为53×103的SF-1蛋白质,

山楂中的三萜类对HIV-1蛋白酶的抑制作用

文献报道,研究62种韩国植物对HIV-1蛋白酶的抑制作用,其中山楂(Crataegus pinnatifida)叶有显著的抑制活性。作者经研究报道,山楂叶(3.5kg)在室温下用甲醇提取3次,真空回收溶剂,得到的干燥提取物混悬于水,依次用二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇提取,二氯甲烷部分经硅胶柱分离。