超临界流体色谱法制备高纯度EPA-EE和DHA-EE

以二氧化碳作流动相,分别以极性相反的C18柱和硅胶柱为固定相,用超临界流体色谱法分离二十碳五烯酸乙酯(EPA-EE)和二十二碳六烯酸乙酯(DHA-EE)。比较C18柱和硅胶柱分离EPA-EE和DHA-EE的机理和分离效果,提出结合C18柱和硅胶柱的超临界流体色谱制备高纯度EPA-EE和DHA-EE的方法。

超临界流体色谱法制备EPA-EE和DHA-EE

以二氧化碳作流动相 ,C18柱为固定相 ,用超临界流体色谱法制备二十碳五烯酸乙酯 (EPA EE)和二十二碳六烯酸乙酯 (DHA EE) .考察了流速、温度、压力、上载量以及进样浓度对制备分离的影响 .结果表明 ,在实验范围内 ,流速对分离效果影响不大 .对于 5 C18,2 5 0mm× 4 6mm色谱柱 ,其最适制备条件是柱前压12MPa ,温度 5 5℃ ,通常流速下的压降约为 1MPa ,鱼油的最大上载量大于 2 0 μl.而对于 8 C18,2 5 0mm× 10mm色谱柱 ,其相应的最适制备条件是柱前压 11MPa ,温度 5 5℃ ,通常流速下的压降约为 0 5MPa,鱼油的最大上载量约为 10 0 μl.实验表明 ,鱼油无需溶解于其他溶剂而可直接进样 .

大口径毛细管柱气相色谱法测定鱼油软胶囊中EPA-E和DHA-E的含量

目的 测定鱼油软胶囊中二十碳五烯酸乙酯(EPA-E)和二十二碳六烯酸乙酯(DHA-E)的含量。方法 采用530 μm大口径毛细管柱气相色谱法,外标法测定EPA-E和DHA-E的含量。结果 EPA-E和DHA-E的保留时间分别为8.0 min和12.0 min,其标准曲线分别在0.52～1.22μg和0.58-1.36μg之间有良好的线性关系,回收率分别为97.1％和98.2％。结论 该方法专属性强,适用于鱼油软胶囊中EPA-E和DHA-E的定量分析。

鱼油微丸中EPA-E和DHA-E的含量测定

鱼油微丸与无水乙醇在氮气保护下回流 ,以正二十四烷为内标物 ,用气相色谱法测定鱼油微丸中 EPA- E和DHA- E的含量 ,两者的加样回收率在 10 0 .5 %～ 10 5 .8%之间 ,RSD小于 3.3% ,EPA- E在 0 .2 4～ 3.6 m g/ ml,DHA- E在 0 .38～ 5 .7m g/ ml间线性关系良好 ,相关系数均为 0 .9999。本法操作简便 ,结果准确 ,重现性好。

DHA-E标样的UV、IR、NMR、MS分析

本文采用 UV、IR、NMR、MS波谱仪分析方法 ,解析了各波谱数据与 DHA- E结构的关系 ,综合确证了 DHA- E标样的化学结构。

GC法测定维E三油胶丸中EPA-E和DHA-E含量

目的:建立维E三油胶丸中EPA-E和DHA-E含量测定方法。方法:采用气相色谱法,色谱柱为DB-WΑX(30 m×0.32 mm×0.25μm毛细管柱;柱温250℃;FID检测器;进样口温度和检测器温度为290℃;进样量1μL;分流比为10︰1。结果:EPA-E在0.02900~0.5800 mg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),DHA-E在0.05425~1.085mg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9998);EPA-E回收率为97.69%(n=9,RSD=1.2%),DHA-E回收率为99.50%(n=9,RSD=0.89%),总回收率为98.79%(n=9,RSD=0.68%)。结论:建立的方法简便、快速、准确可靠,可用于维E三油胶丸中EPA-E和DHA-E的定量测定。

HPLC法检测鸡蛋中DHA-EE和EPA-EE含量的条件优化

为利用高效液相色谱法检测衍生化鸡蛋样品中的二十碳五烯酸乙酯(EPA-EE)和二十二碳六烯酸乙酯(DHA-EE),使用super C18色谱柱,考察了流动相有机相比例、流速及柱温改变对EPA-EE和DHA-EE分离的影响,确定了等度洗脱、流动相为甲醇-水(95∶5,V/V)、流速1.0 mL/min、柱温30℃、检测波长220nm的色谱条件。该方法下,EPA-EE和DHA-EE分别在线性范围内浓度和峰面积呈现良好的线性关系,相关系数r分别为0.9992和0.9990,采用上述方法测定了ω-溴苯乙酮衍生化的鸡蛋中混合脂肪酸,结果表明EPA-EE和DHA-EE二峰可达到基线分离。本方法快速、简单、重复性好,为鸡蛋中多不饱和脂肪酸含量的快速检测提供了思路。

鱼油中二十碳五烯酸乙酯和二十二碳六烯酸乙酯的超临界流体色谱分离技术

建立鱼油中二十碳五烯酸乙酯(EPA-EE)和二十二碳六烯酸乙酯(DHA-EE)的超临界流体色谱纯化方法。比较Luna 5u Silica、Hedera ODS-BP、Hypersil ODS2、ZORBAX SB-C8和Hypersil C8等色谱柱对EPA-EE和DHA-EE的分离效果,确定以Hedera ODS-BP作为优选色谱柱,进一步以容量因子、选择性和分离度为考核指标,考察改性剂、流动相比例、背压及温度对分离效果的影响。得到的优化分离条件为:以Hedera ODS-BP为色谱柱,10%甲醇为改性剂,总流速2mL/min、柱温40℃、背压100bar。在此条件下,鱼油中EPA-EE和DHA-EE可以达到基线分离。结论:本法简便、快速、重现性好,可用于鱼油中EPA-EE和DHA-EE的分离。

高纯度二十二碳六烯酸乙酯的涂银层析法制备

以采用综合技术从鱼油制得的多不饱和脂肪酸乙酯为原料。

SFC制备EPA和DHA乙酯过程中上载量和流速的影响

以超临界CO2为流动相ODS-C18为固定相,以尿素包络法处理后的鱼油乙酯化物为原料,柱温为55℃,柱前压为12.1MPa,改变载量和流动相流速,测定了二十碳五烯酸乙酯(EPA-EE)和二十二碳六烯酸乙酯(DHA-EE)的色谱动态特性。结果表明,EPA-EE与DHA-EE之间的分离良好,但原料中其他脂肪酸乙酯杂质不能分离。适当切割流出物馏分,EPA-EE的纯度可达90%,DHA-EE可达75%。根据实验结果考察了载量和流动相流速对制备色谱效能的影响。色谱柱的生产能力随流速的增大而增大。在EPA-EE纯度一定的前提下,色谱柱的生产能力随载量的增大而增大,但载量过大则生产能力又会减小。当EPA-EE纯度要求在85%以下时,载量对其回收率的影响不大,CO2消耗量(每单位重量产品的消耗)随着载量的增大而减少;纯度要求在90%以上时,回收率随载量的增大而明显减小,CO2消耗量随载量的变化有最低点,在载量为4.076mL·L-1时为最小。EPA-EE纯度要求为90%时,适宜载量为7.13mL·L-1,流动相流速为3.928g·min-1,此时色谱柱的生产能力为2.41g·h-1·L-1,EPA-EE回收率为37.8%。同时得到的DHA-EE的纯度为75%,回收率为88.8%。

气相色谱法测定鱼油多烯乙酯的含量

目的用气相色谱法测定鱼油多烯乙酯中二十碳五烯酸乙酯 (EPA E)和二十二碳六烯酸乙酯 (DHA E)的含量。方法采用气相色谱法 ,聚二乙二醇酯为固定相 ,涂布浓度为 10 % ,载体为ChromosorbWAWDMCS 80～ 10 0目的气相柱。结果EPA E平均回收率为 10 0 .31% ,RSD为 2 .5 4 % ;DHA E平均回收率为 10 3.37% ,RSD为 2 .76 %。结论此法操作简便、准确、重现性、稳定性好 。

饲料中添加V_E和DHA对不同养殖密度建鲤生长、摄食和分化的影响

以建鲤鱼种为研究对象,采用3×3双因子试验设计,在基础饲料中分别添加0,0.5%,1.5%的二十二碳六烯酸(DHA),每种DHA水平分别添加62.5,125.0,250.0mg/kg维生素E(VE),共配制9种试验饲料,每种饲料饲喂2个养殖密度(15g/L和60g/L)的建鲤,饲养8周。探讨饲料中添加不同水平VE和DHA对不同养殖密度的建鲤生产性能、饲料利用和大小分化的影响。结果表明:养殖密度对建鲤的生长、摄食率和体质量变异系数均有显著影响(P<0.05),高密度各组的特定生长率和摄食率显著低于低密度组(P<0.05),但体质量变异系数均是高密度组显著高于低密度组(P<0.05)。VE显著影响建鲤的生长和饲料利用(P<0.05),且显著影响建鲤的个体分化(P<0.05),在高密度养殖条件下,随着VE的增加,建鲤生长和个体分化显著高于对照组(P<0.05)。饲料中添加DHA只是显著影响特定生长率(P<0.05),对摄食率和体质量变异系数没有显著影响(P>0.05),同一养殖密度下,饲料中添加DHA对低密度各组的生长有显著影响(P<0.05)。养殖密度、VE和DHA三者的交互体系只对建鲤体质量变异系数有显著影响(P<0.05),养殖密度和VE或DHA的交互作用对生长影响显著(P<0.05),但饲料中添加VE和DHA的交互作用对建鲤的生长、摄食率和体质量变异系数的影响均不显著(P>0.05)。在本试验条件下,饲料中添加VE和DHA可提高建鲤的生产性能和饲料利用,进而促进生长、降低个体分化,适宜在集约化养殖中作为抗拥挤胁迫的免疫增强剂适量添加。

饲料中添加维生素E和二十二碳六烯酸对鲤鱼生长和抗病力的影响

以建鲤鱼种为研究对象,采用3×3双因子试验设计,在基础饲料中分别添加0、62.5、185.5mg·kg-1维生素E(VE),每种维生素E水平分别添加0%、0.5%、1.5%二十二碳六烯酸(DHA)共制成9种试验饲料,探讨饲料中添加不同水平维生素E和DHA对建鲤生产性能、饲料利用和抗病力的影响。结果表明,维生素E的添加对各组特定生长率没有显著影响(P>0.05)。DHA的添加显著影响鲤鱼的特定生长率(P<0.05),随DHA的添加,鲤鱼特定生长率显著高于对照组(P<0.05),但0.5%和1.5%的添加组间没有显著差异(P>0.05)。维生素E和DHA相互作用对鲤鱼的生产性能和饲料利用的影响未达到显著影响(P>0.05)。维生素E的添加对各组攻毒存活率有极显著影响(P<0.01)。随维生素E的添加,鲤鱼攻毒存活率显著提高(P<0.05)。DHA的添加亦显著影响鲤鱼的攻毒存活率(P<0.05)。随DHA的添加,鲤鱼攻毒存活率逐渐提高,当添加量达到1.5%时,鲤鱼攻毒存活率显著高于对照组(P<0.05)。维生素E和DHA相互作用对鲤鱼的攻毒存活率的影响达到显著(P<0.05),其中维生素E187.5mg·kg-1和DHA1.5%添加的相互作用显著高于对照组和其他各组(P<0.05)。在本试验条件下,鲤鱼饲料中添加DHA对其生长有正面效应,维生素E和DHA对鲤鱼的抗病能力具有明显的协同保护作用。维生素E的添加能增强抗病能力,但对生长的影响不明显,过量的添加亦没有促进鱼体的生长。

紫贻贝多烯脂肪酸乙酯及牛磺酸的提取与分析

为综合开发利用低价值贝类中的功能保健品成分,利用索氏/超声提取、尿素包合法提取了紫贻贝中的多烯脂肪酸乙酯,对提油后的残渣利用热水提取、离子交换层析富集的方法提取了其中的牛磺酸,利用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析测定了产品中二十碳五烯酸乙酯(EPA-E)、二十二碳六烯酸乙酯(DHA-E)的含量,利用薄层色谱法、吸光光度法定性定量测定了产品中的牛磺酸,结果显示紫贻贝中含有相当量的多烯脂肪酸乙酯及牛磺酸成分,有望作为高价值功能保健食品的来源.

GC法测定维E三油胶丸中α-亚麻酸和γ-亚麻酸的含量

目的:建立维E三油胶丸中α-亚麻酸和γ-亚麻酸含量测定方法。方法:采用气相色谱法,色谱柱为DB-WΑX(30 m×0.32 mm×0.25μm)毛细管柱;柱温210℃;FID检测器;进样口温度和检测器温度为250℃;进样量1μL;分流比为10∶1。结果:α-亚麻酸甲酯在0.308 0~7.699 mg/mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=1),γ-亚麻酸甲酯在0.049 71~1.243 mg/mL范围内呈良好的线性关系(r=1);α-亚麻酸回收率为99.44%(n=9,RSD=1.9%),γ-亚麻酸回收率为99.14%(n=9,RSD=2.0%)。结论:建立的方法简便、快速、准确可靠,可用于维E三油胶丸中α-亚麻酸和γ-亚麻酸的定量测定。

维生素E醋酸酯对鱼油脂肪酸含量变化的影响

新鲜鱼油中添加05、0、2505、00 mg/kg 4种不同浓度的维生素E醋酸酯,在实验的第6、14、28、36和68天测定鱼油中的脂肪酸含量。结果表明:在500 mg/kg添加量内,维生素E醋酸酯对鱼油中脂肪酸含量没有显著性影响(P>0.05)。在实验期间,EPA(C20:5)、DHA(C22:6)、亚油酸(C18:2)含量明显下降,ARA(C20:4)、亚麻酸(C18:3)先升后降,棕榈酸(C16:1)逐步上升;C14含量逐渐增加,C17则先降后升,C16和C18在实验后期有较大提高。维生素E醋酸酯对鱼油中不饱和脂肪酸效用系数大小依次为:ARA>EPA>DHA>C18:3>0>C16:1>C18:2>C18:1,对ARA抗氧化效用最大,效用系数达到10.193%,C20:5为0.490%,C22:6为0.364%;维生素E醋酸酯对饱和脂肪酸效用系数大小依次为:C14>C17>0>C18>C16。

DHA对C2C12细胞成脂分化过程中相关基因表达的影响

采用胰岛素、地塞米松和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤联合诱导C2C12细胞分化为脂肪细胞,诱导分化后加入100 mmol/L二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)。DHA处理8 d后,收集细胞,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR方法检测脂肪分化相关基因PPARγ、C/EBPα和ADD1转录表达水平。结果表明,C2C12细胞成脂分化时添加DHA能显著上调PPARγ、C/EBPα和ADD1基因的表达,并且联合添加维生素E后效果更显著。

二十二碳六烯酸乙酯对沙土鼠缺血再灌注脑损伤及水肿作用的研究(英文)

研究二十二碳六烯酸乙酯(E-DHA)对沙土鼠缺血再灌注脑损伤及其脑水肿的影响。选用雄性断奶沙土鼠灌胃给予二十二碳六烯酸乙酯(150 mg/kg·d))或等体积溶媒 10周,阻断沙土鼠双侧颈总动脉血流 10 min,造成缺血再灌注模型;测定再灌注后脑组织中丙二醛(MDA)水平,还原型谷胱甘肽(GSH)含量,超歧化氧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和钾、钠-ATP酶(Na^+,K^+-ATPase)活性,脑水含 量,钠、钾离子浓度及海马CA1区神经细胞存活百分数。结果表明:E-DHA预处理显著降低缺血再灌注沙土鼠脑组织MDA水平,阻止GSH含量、GSH-PX和Na^+,K^+-ATPase活性下降,而对SOD的活性未表现出明显作用;E-DHA亦调节缺血再灌注沙土鼠脑组织钠、钾离子浓度,减轻缺血再灌注所致的脑水肿和神经细胞死亡。提示E-DHA对脑缺血再灌注脑损伤有显著保护作用,机制可能其与抗氧化作用有关。

DHA/EPA比例对中华绒螯蟹卵巢和肝胰腺中气味物质的影响

二十二碳六烯酸(22:6n-3,DHA)和二十碳五烯酸(20:5n-3,EPA)是水生动物所需的重要n-3高度不饱和脂肪酸,DHA/EPA比例对蟹类生长发育和脂肪酸组成影响较大,而对气味物质的影响尚未见报道。采用电子鼻(E-nose)和整体材料吸附萃取气相色谱-质谱联用仪(MMSE-GC-MS)对不同DHA/EPA比例下各组中华绒螯蟹卵巢和肝胰腺的整体气味轮廓、气味物质含量及气味活性值(OAV)进行区分和比较。结果表明:(1)各组样品整体气味轮廓差异较大,第3组(DHA/EPA=2.30)、第4组(DHA/EPA=2.97)和对照组差异最小;(2)醛类是卵巢和肝胰腺中最主要的气味物质,第3组、第4组与对照组气味物质含量最为接近;(3)在卵巢和肝胰腺中,第3组的OAV值最高,对照组香气物质的OAV值最低,而不良气味物质(如三甲胺和2-戊基呋哺)的OAV值最高。以上结果表明,DHA/EPA比值为2.30左右有利于雌体河蟹香气物质的形成。

二十二碳六烯酸乙酯对脑缺血再灌注氧化损伤及脑水肿的影响

目的研究二十二碳六烯酸乙酯 (ethyldocosahexaenoate ,E DHA)对沙土鼠脑缺血再灌注引起的氧化损伤和脑水肿的保护作用。方法采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断法制作全脑缺血再灌注损伤模型 ,检测E DHA对缺血再灌注后脑中丙二醛 (MDA)和谷胱甘肽 (GSH)含量 ;谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、过氧化氢酶 (CAT)、超氧化物歧化酶 (SOD)、ATP酶活性 ;水及Na+ 、Ca2 + 含量的影响 ,并进行了病理检查。结果缺血前E DHA预防给药 10周有效阻止了脑缺血再灌注引起的MDA升高 ,GSH降低 ,GSH Px、CAT活性降低 ,ATP酶活性降低 ,水及Ca2 + 、Na+ 含量升高。结论E DHA对沙土鼠脑缺血再灌注具有保护作用 ,其机理与清除自由基和减轻脑水肿有关。