突变的人DHFR肿瘤耐药基因转导脐血干细胞的体外实验研究

目的探讨突变的人二氢叶酸还原酶（ｍＤＨＦＲ）耐药基因在人造血干细胞中抗甲氨蝶呤（ＭＴＸ）的效应。方法应用免疫磁珠分选系统（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＋细胞后，用含ｍＤＨＦＲ的逆转录病毒上清转染脐血ＣＤ３４＋细胞，采用造血干细胞集落形成实验进行转导后细胞抗ＭＴＸ分析。结果应用ＭＡＣＳ能高度纯化人ＣＤ３４＋细胞，使分选后的脐血ＣＤ３４＋细胞的纯度平均达９０％，回收率为７１．１％。在ＭＴＸ浓度为２０ｎｍｏｌ／Ｌ的条件下培养１４天，转导ｍＤＨＦＲ耐药基因的脐血干细胞集落形成数明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），同时对ＭＴＸ的抗性提高了约２倍。结论突变的人ＤＨＦＲ耐药基因能提高人的造血干细胞对化疗药物ＭＴＸ的抗性。