揉拨法调节DHPR/RyR通路对肌筋膜疼痛综合征大鼠的改善作用研究

【目的】探讨揉拨法对肌筋膜疼痛综合征(MPS)大鼠的治疗作用及机制。【方法】从60只大鼠中随机抽取12只作为正常组,其余大鼠采用钝性打击结合离心运动法构建MPS模型。再将48只造模成功的大鼠随机分为模型组、揉拨法组、揉拨法+丹曲林[利若丁受体(Ry R)抑制剂]组、揉拨法+生理盐水组,每组12只。采用von-Frey法测定机械性痛阈值;检测软组织张力、肌电图;透射电镜观察激痛点组织超微结构;比色法检测激痛点组织内钙离子(Ca^(2+))含量;Western Blot法检测激痛点组织二氢吡啶受体(DHPR)α1、Ry R、乙酰胆碱酯酶(ACh E)蛋白表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠机械性痛阈值、激痛点软组织张力以及激痛点组织DHPRα1、Ry R、ACh E蛋白表达降低,Ca^(2+)含量增加(均P<0.05),肌电图出现振幅较高的峰电位、变化明显,激痛点组织超微结构受损;与模型组比较,揉拨法组、揉拨法+生理盐水组大鼠机械性痛阈值、激痛点软组织张力以及激痛点组织DHPRα1、Ry R、ACh E蛋白表达升高,Ca^(2+)含量减少(均P<0.05),肌电图恢复平稳,激痛点组织超微结构损伤减轻;与揉拨法组比较,揉拨法+丹曲林组大鼠机械性痛阈值、激痛点软组织张力以及激痛点组织DHPRα1、Ry R、ACh E蛋白表达降低,Ca^(2+)含量增加(均P<0.05),肌电图出现电活动变化,激痛点组织超微结构损伤加重。【结论】揉拨法可能通过激活DHPR/Ry R信号通路改善大鼠MPS。

兔膈肌骨骼肌型DHPR_(α1)亚单位和RyRs的mRNA与蛋白表达测定

本文测定了兔膈肌钙释放单位中骨骼肌型DHPRα1 亚单位和RyRs的mRNA与蛋白表达水平 ,探讨了兔膈肌钙释放单位的结构组成特征。采用RT PCR、原位杂交和免疫组织化学技术 ,分别测定兔膈肌骨骼肌型DHPRα1 亚单位和RyR1、RyR2 及RyR3 的mRNA与蛋白表达。结果显示 ,兔膈肌可见较高水平的骨骼肌型α1 亚单位和RyR1mRNA与蛋白表达 ;较低水平的RyR3mRNA与蛋白表达。表明兔膈肌钙释放单位由骨骼肌型DHPR、RyR1和RyR3 构成 ,Ca2 +释放可能具有变构耦联和CICR耦联两种形式 ,RyR3 的存在可能是膈肌ECC依赖于细胞外Ca2 +的主要原因。

兴奋-收缩偶联中DHPR与RyR的相互作用

兴奋-收缩偶联(E-Ccoupling)依赖细胞膜二氢吡啶受体(DHPR)/L型电压门控Ca2+通道和肌浆网兰诺定受体(RyR)/Ca2+释放通道的相互作用。在骨骼肌细胞中,DHPR与RyR1在结构上机械偶联,不依赖细胞外Ca2+即可激活RyR1;在心肌细胞中,去极化激活DHPR,细胞外Ca2+内流,内流的Ca2+通过钙诱导钙释放(CICR)机制激活RyR2。最近的研究表明,DHPR与RyR之间的信号转导通常是双向的。DHPR与RyR机械和化学的双向偶联机制调节这两种Ca2+通道的效率、精确度和活性。

多巴胺类似物抑制二氢蝶啶还原酶的研究

多巴胺类似物对二氢蝶啶还原酶有明显的非竞争性抑制作用(Ki或I_(50)值为10^(-5)—10^(-6)mol/L)。其中阿朴吗啡是最强的抑制剂之一(Ki或I^(50)=1-2×10^(-6)mol/L)。由于酪氨酸羟化酶和二氢蝶啶还原酶包含于同一酶促反应过程中,且限制了多巴胺合成的决定速度的那一步。这些结果可能提示出被多巴胺抑制的酪氨酸羟化作用包含着对这二种酶的抑制作用。

按压对大鼠肌筋膜激痛点软组织张力的影响及其作用机制研究

目的:探讨按压对大鼠肌筋膜激痛点(myofascial trigger point,MTrP)软组织张力的影响及其作用机制。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为4组:空白组、模型组、利多卡因组和按压组,每组12只。模型组、利多卡因组和按压组采用离心运动结合钝性打击的方法建立MTrP大鼠模型。造模评价后,利多卡因组给予激痛点局部注射利多卡因干预,按压组给予激痛点局部按压干预。采用软组织张力测定仪检测大鼠激痛点软组织张力,之后在激痛点局部取材。用免疫组化法检测P物质(substance P)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)表达。用试剂盒以比色法检测游离Ca^(2+)含量。用Western Blot法检测二氢吡啶受体α1(dihydropyridine receptorα1,DHPRα1)、利若丁受体(ryanodine receptor,RyR)和乙酰胆碱酯酶(acetyl cholinesterase,AChE)表达。结果:(1)与空白组相比,模型组激痛点软组织张力、Ca^(2+)、P物质和CGRP含量增高(P<0.05),DHPRα1、RyR和AChE含量降低(P<0.05);(2)与模型组相比,按压组和利多卡因组激痛点软组织张力、Ca^(2+)、P物质和CGRP含量降低(P<0.05),DHPRα1、RyR和AChE含量增高(P<0.05);(3)与利多卡因组相比,按压组软组织张力、DHPRα1、RyR、AChE、Ca^(2+)、P物质和CGRP含量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:按压可以有效降低激痛点软组织张力,其机制与促进DHPRα1、RyR和AChE表达,降低Ca^(2+)、P物质和CGRP含量有关。

调节Ryanodine受体的相关蛋白

Ryanodine受体 (RyR)是存在于内质网 /肌浆网上 (ER/SR)的一种钙释放通道。它能迅速地将Ca2 +从ER/SR中释放出来 ,从而发挥一系列的生理功能。RyR是一种颇复杂的分子 ,其位于胞质的亚基上有大量可供作用物结合的位点 ,控制构成离子通道的亚基的活性。其中 ,一些内源性蛋白对RyR的活性有重要的调节作用。本文主要介绍DHPRs、Triadin。

不同频率慢性电刺激膈神经对兔膈肌骨骼肌型二氢吡啶受体_(α1)亚单位、ryanodine受体mRNA和蛋白表达的影响

测定不同频率慢性电刺激(chronic electrical stimulation,CES)膈神经5周后对兔膈肌钙释放单位中骨骼肌型二氢吡啶受体(DHPR)α1亚单位和ryanodine受体(RyrRs)的mRNA和蛋白表达水平的影响,探讨CES后兔膈肌钙释放单位结构组成的变化和可能的临床应用价值。封闭群日本大耳白兔30只,随机分为正常对照组、10、20、50和100 Hz,每组6只;以10和20 Hz为慢性低频电刺激组,50和100 Hz为慢性高频电刺激组。CES参数为波宽0.2 ms 3-6个波/次,45次/min,电压10-20 V。刺激时间2×2 h/日,每周刺激6 d,连续刺激5周。分别采用RT-PCR和免疫组织化学法测定兔膈肌骨骼肌型DHPRα1-亚单位和RyR1、RyR2和RyR3的mRNA和蛋白表达。结果显示:与对照组比较,慢性低频电刺激10和20 Hz组骨骼肌型DHPRα1-RyR2的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),有低度的RyR2mRNA的表达出现;慢性高频电刺激50和100 Hz组骨骼肌型DHPRα1-RvR1的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01),未检测到RyR2mRNA的阳性表达。本实验提示慢性低频电刺激膈神经5周后,膈肌质膜上DHPR与RyRs之间的信号转导方式已从变构耦联为主转变为以Ca2+诱导Ca2+释放耦联为主。

苯丙酮酸尿症的进展

苯丙酮酸尿症（PhenyIketonuria PKU）是先天氨基酸代谢异常疾病。1934年由Folling首先报告，小儿有严重精神障碍，尿和汗有鼠臭气味，Folling证实尿中恶臭物质为苯丙酮酸，由于肝内缺乏苯丙氨酸羟化酶，苯丙氨酸不能正常代谢引起。

暂时性高苯丙氨酸血症——二氢生物喋呤合成酶成熟延迟

本文报告1例暂时性高苯丙氨酸血症患者,经10个月临床观察和对血中二氢喋呤还原酶(DHPR)及尿中喋呤谱进行分析。控制病婴食物中苯丙氨酸(phe)的含量,发现在8个月后,恢复自由饮食时血中phe浓度一直维持在2mg/dI以下。该病婴在3个月时血中DHPR活性正常,但尿中总生物喋呤(B)/总新喋呤(N)=48.6。确诊该病婴暂时性高苯丙氨酸血症。

推拿法样刺激对人骨骼肌细胞内钙离子的影响

目的：观察推拿[扌衮]法样刺激对人骨骼肌细胞内钙离子的影响.方法：采用细胞培养技术,建立人骨骼肌细胞损伤模型,将人骨骼肌正常细胞和损伤细胞各自分为空白对照组、[扌衮]法样刺激组、维拉帕米（Ca^2＋拮抗剂）组,各给予相同的[扌衮]法样刺激10min,干预后检测各组细胞内钙离子浓度、Ca^2＋-ATPase活性、DHPR mRNA.结果：空白对照组损伤细胞钙离子浓度明显高于正常细胞（P〈0.05）,[扌衮]法样刺激组损伤细胞内钙离子浓度显著低于空白对照组及维拉帕米组（P〈0.05）;[扌衮]法样刺激组正常骨骼肌细胞和损伤骨骼肌细胞Ca^2＋-ATPase活性均高于空白对照组及维拉帕米组（P〈0.05）;[扌衮]法样刺激组损伤细胞DHPR mRNA相对表达量显著高于空白对照组（P〈0.05）.结论：损伤骨骼肌细胞内外存在钙离子失衡;推拿手法通过力学作用增强骨骼肌细胞Ca^2＋-ATPase活性、DHPR mRNA表达等生物学效应,改善损伤细胞中钙超载现象,促进损伤细胞修复.