曼氏裂头蚴可溶性抗原DIGFA法快速检测特异性抗体的潜在诊断价值

目的探索曼氏裂头蚴可溶性抗原金标免疫渗滤法快速检测曼氏裂头蚴特异性抗体的免疫诊断价值。方法从自然感染的青蛙中分离出曼氏裂头蚴,经口感染小鼠;于感染后第7周剖杀小鼠,收集鼠血清和虫体并计数。以曼氏裂头蚴可溶性抗原(PSA)为探针建立PSA-DIGFA,分别检测曼氏裂头蚴感染小鼠、健康小鼠、健康人群及其他寄生虫感染者血清中特异性抗体,并与常规ELISA法进行平行检测和比较。结果DIGFA法检测感染小鼠血清中特异性抗体的敏感性为100%(49/49)、特异性为100%(30/30),与ELISA法检测结果相同;不同虫荷数感染鼠间抗体水平差异无显著性(P>0.05),感染鼠与正常鼠之间抗体水平差异有显著性(P<0.01)。PSA-DIGFA检测健康人群血清100人份均为阴性,检测囊虫、包虫、旋毛虫、肺吸虫、华支睾吸虫病病人血清的阳性率分别为42.5%(17/40)、10.0%(2/20)、20.0%(5/25),80.0%(8/10)、8.0%(2/25)。结论用曼氏裂头蚴粗抗原检测感染动物血清中特异性抗体具有较好的敏感性和特异性,但与其他蠕虫感染存在较高的交叉反应。不同虫荷数感染鼠均产生较高水平抗体,组间差异无显著性。DIGFA法与ELISA法检测的敏感性和特异性相同,但前者更为简便、快速,无需特殊仪器设备,可单份检测,适合寄生虫病的临床检验和流行病学调查。若能进一步纯化检测用抗原,减少与其他蠕虫间的交叉反应,有潜在的应用价值。

斑点免疫金渗滤法检测猪瘟抗体的研究

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜,然后用胶体金标记SPA,建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。整个试验过程仅需5min,操作简单,与猪兰耳病、猪伪狂犬病、猪细小病毒、新城疫和禽流感等阳性血清不发生交叉反应。同时将该法与目前猪瘟的常规检测方法Dot-ELISA法和间接血凝试验同时对200份猪血清进行猪瘟抗体检测比较,符合率达98.4％和98.9％。说明该法微量、特异、敏感可靠,检测时间短,效果直观,非常适用于猪瘟的早期诊断和普查以及疫苗免疫效果后抗体水平的检测。

滴金免疫测定法在检测日本血吸虫抗体中的应用

滴金免疫测定法(DIGFA)是以胶体金作为标记物的快速斑点免疫结合试验,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应,阳性结果出现红色斑点。本文用血吸虫虫卵浸出液为抗原,金标记A蛋白为显示剂,建立了检测血吸虫抗体的DIG-FA。以本法检测血吸虫病患者血清81份,阳性卒92.6％;献血者血清50份,特异性为98％;42份产前检查的孕妇血清均为阴性;6例华枝睾吸虫患者未出现交叉反应;6例并殖吸虫患者中4例出现不同程度的阳性反应,其中3例环卵反应亦为阳性,环沉率8～15％。提示本法的敏感性和特异性与环卵反应相近。

快速检测布鲁氏菌抗体的滴金免疫测定法的建立及应用

目的:建立一种快速诊断布鲁氏菌感染的方法。方法:将布鲁氏菌可溶性菌体抗原结合于硝酸纤维膜上,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体,建立滴金免疫测定法,检测布鲁氏菌感染者血清抗体,通过布鲁氏菌抗原抗体渗滤在硝酸纤维膜上反应,2 m in后肉眼观察结果。并与试管凝集试验比较。结果:滴金免疫测定法的敏感性为95.35%(41/43),特异性为98.99%(98/99),其他病患者血清反应均为阴性,Youden′s指数为0.9434。滴金免疫测定法与试管凝集试验的符合率为97.89%(139/142),两法无显著性差异(P>0.05)。结论:滴金免疫测定法可用于布鲁氏菌病的临床检测和流行病学筛查,具有推广应用价值。

血清结核抗体DIGFA检测对结核病的诊断价值

目的 采用DIGFA法测定血清结核分支杆菌抗体IgG（TB-IgG）,同步条件痰涂片抗酸染色比较,以探讨DIGFA法测定血清结核分支杆菌抗体对结核病的诊断价值.方法 对2007年以来笔者所在医院结核病住院患者83例（结核组）和非结核呼吸系统疾病患者108例（对照组）,进行用DIGFA法检测人血清中结核分支杆菌抗体,同时做痰涂片抗酸染色镜检.结果 结核组与对照组TB-Ab测定结果和痰涂片抗酸染色结果的差异均有显著性（P〈0.01）.结论 结核病的实验室诊断,痰涂片法存在检出率低和漏检的缺点,相对于具有较高敏感性和特异性,方法简便来讲,TB-DOT法是目前最好的普遍使用的诊断方法,可作为结核分枝杆菌阴性、儿童、无痰患者及肺外结核诊断中一项重要参考指标.

斑点免疫金渗滤法检测鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌抗体的应用研究

将鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原包被于渗滤盒检测区(T区),针对沙门氏菌O9抗原单克隆抗体3-47-0包被在质控区(C区),用胶体金标记鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原,建立了一种抗原夹心法快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。DIGFA比玻板凝集试验(PAT)灵敏度高,人工感染鸡试验表明在感染后第7d即可从32只鸡中的7只检测到抗体,在时间上早于PAT。722份现场血清样品的检疫结果表明,DIGFA的阳性检出率稍高于PAT,阳性样品抗体几何平均滴度DIGFA大于PAT法(p<0.05〉。DIGFA的结果得到细菌分离试验的验证。这些结果表明DIGFA快速、灵敏、准确,为鸡伤寒和鸡白痢的检疫提供了一个新的有效手段。

三种抗原检测抗幽门螺杆菌抗体的临床意义评价

目的：寻求敏感性高、特异性强的ＨＰ抗原和简便、可靠的检测ＨＰ抗体的方法，用于诊断ＨＰ感染。方法：分别以ＨＰ尿素酶、全菌破碎物、培养上清液为抗原。采用斑点金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）检测ＨＰ培养、病理组织学检查、尿素酶试验均阳性和均阴性的血清各５０份；胃镜检查各类胃病患者血清２５８份，并以ＥＬＩＳＡ试剂盒做平行检测对照。结果：三种抗原的敏感性分别为１００％、９６％和７６％；５０份阴性血清的阴性符合率分别为９８％、９２％和６４％；２５８份各类胃病的抗体检出率分别为６１％、６２％和５２％；与ＥＬＩＳＡ符合率各为９８８％、９６５％和５８９％。将抗原浓度稀释至００５ｍｇ／ｍｌ时，尿素酶抗原和全菌破碎物抗原的特异性抗体检出率仍达８５％和７５％。培养上清液抗原的敏感性和特异性明显低于前二种抗原（Ｐ＜００１）。尿素酶抗原和全菌破碎抗原的敏感性和特异性明显低于前二种抗原（Ｐ＞００５）。结论：提示该全菌破碎物抗原用于ＤＩＧＦＡ检测ＨＰ抗体、敏感性高、特异性强，且简便、快速、无需任何仪器设备。适合于临床和流行病学调查应用。

斑点金免疫渗滤法检测血吸虫病的应用研究

目的探讨斑点金免疫渗滤法(DIGFA)检测血吸虫抗体的应用价值。方法采用斑点金免疫渗滤法(DIGFA)与ELISA法对1088份不同血清标本作平行检测,统计分析检测结果。结果DIGFA法检测急性、慢性、晚期血吸虫病和水牛血吸虫病的敏感性分别为100%、98.30%、82.86%和98.71%;特异性为97.52%～100%;检测肺吸虫病和蛔虫病的交叉反应率分别为6.06%和2.78%,检测结果与ELISA相似。结论DIGFA法作为一种血吸虫病快速诊断方法,具有较高的敏感性和特异性,且操作简便快速,不需特殊仪器设备,有着较好的应用前景。

包虫病诊断中酶联免疫吸附试验法的运用及诊断价值

本文旨在观察在包虫病诊断中,将酶联免疫吸附试验法应用其中的价值。方法 研究对象,根据兵团下发任务完成一师及十四师连续4年2018年11月4日-2022年11月9日开展包虫病犬粪及血清检测,共计52(单位:例数),检测方法:酶联免疫(ELISA)、滴金免疫渗滤法(DIGFA),影像学手段确诊结果为标准,分析包虫病诊断情况、满意评分情况。结果 诊断情况:ELISA方法(VS)DIGFA方法,前者灵敏度、诊断符合率更高,前者漏诊率更低、前者约登指数更高,显差异(P<0.05);ELISA方法(VS)DIGFA方法,特异度、阳性预测值、阴性预测值、误诊率比对,无差异(P>0.05)。(3)满意评分情况:参与评分者共计12例,均为检验科工作人员,ELISA方法(VS)DIGFA方法,前者检查专业评分更高(t值2.399),前者操作专业性要求评分更高(t值3.528),前者筛查应用评分低于后者(t值5.289),显差异;操作简便性评分比较(t值0.617,P>0.05),无差异。结论 鉴别包虫病,ELISA准确性较高,但考量大范围筛查不适宜,可先用DIGFA后再用ELISA检测。