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Human ocular dirofilariasis due to Dirofilaria repens in Sri Lanka
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作者 Devika Iddawela Kiruthiha Ehambaram Susiji Wickramasinghe 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2015年第12期996-999,共4页
Objective:To identify worms obtained from patients with eye lesions and to describe the demographic factors of patients with ocular dirofilariasis.Methods:A retrospective descriptive study was conducted in 31 worm sam... Objective:To identify worms obtained from patients with eye lesions and to describe the demographic factors of patients with ocular dirofilariasis.Methods:A retrospective descriptive study was conducted in 31 worm samples from 30 patients referred by consultant ophthalmologists between 2006 and February 2014.Data on age,sex and site of the lesion were ascertained from the details given in the referral letters.Morphological identification of the worm was based on the maximum width,length and appearance of the cuticle.The sex of the worm was determined by the width,length and presence or absence of vulva opening.PCR was performed using Dirofilaria repens specific primers to confirm the species of worms which could not be identified morphologically.Results:Most of the patients belonged to the age group of 40-49 years(mean age = 42 years).Majority of them were females(70%).Subconjunctival lesions were the most frequent presentation,while the rest(n = 4) were found on eyelids.Female worms were extracted from 18 cases,and 11 had male worms.One individual had both male and female worms in a single nodule.Adults were the most commonly affected.This pattern was different from the previous studies in Sri Lanka where the most common age group affected was younger than 9 years old.Conclusions:The present study showed a considerably high incidence of ocular dirofilariasis,stressing the importance of implementing preventive measures to reduce the transmission of this zoonotic filarial disease. 展开更多
关键词 OCULAR dirofilariaSIS dirofilaria repens Morpholog
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成都动物园野生动物原虫和犬恶丝虫的感染情况调查 被引量:3
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作者 赵波 王强 +6 位作者 严慧娟 杨光友 牛李丽 邓家波 王帅 余星明 陈维刚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期277-282,共6页
对2006-2008年先后采集自成都动物园30种177只野生动物的血样进行了弓形虫、犬新孢子虫和犬恶丝虫血清抗体的检测。结果显示,弓形虫抗体阳性率为47.46%(84/177);犬新孢子虫抗体阳性率为10.74%(19/177);犬恶丝虫抗体阳性率为2... 对2006-2008年先后采集自成都动物园30种177只野生动物的血样进行了弓形虫、犬新孢子虫和犬恶丝虫血清抗体的检测。结果显示,弓形虫抗体阳性率为47.46%(84/177);犬新孢子虫抗体阳性率为10.74%(19/177);犬恶丝虫抗体阳性率为2.26%(4/177)。同时,对该动物园30种187只野生动物的血样进行了血液涂片染色镜检,附红细胞体检出率为35.83%(67/187),在血涂片中未查出伊氏锥虫。 展开更多
关键词 野生动物 刚地弓形虫 犬新孢子虫 附红细胞体 犬恶丝虫
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犬恶丝虫酪蛋白激酶2β亚基基因片段的克隆和原核表达 被引量:3
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作者 高珺珊 吴威 +6 位作者 侯洪烈 宫鹏涛 李建华 李赫 张国才 张西臣 杨举 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期290-292,共3页
目的对犬恶丝虫酪蛋白激酶2β亚基(Csnk2b)部分基因片段进行克隆、原核表达及免疫反应性分析。方法根据犬恶丝虫cDNA文库中筛选出的Csnk2b部分基因片段设计引物,以含有插入Csnk2b部分基因片段的噬菌体DNA为模板,进行PCR扩增。产物亚克... 目的对犬恶丝虫酪蛋白激酶2β亚基(Csnk2b)部分基因片段进行克隆、原核表达及免疫反应性分析。方法根据犬恶丝虫cDNA文库中筛选出的Csnk2b部分基因片段设计引物,以含有插入Csnk2b部分基因片段的噬菌体DNA为模板,进行PCR扩增。产物亚克隆至原核表达载体,构建重组载体pGEX-4T-1-Csnk2b,双酶切鉴定。将其转入大肠埃希菌(E.coli)Rosetta(DE3)中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达的重组蛋白,蛋白质印迹(Western blotting)以小鼠抗犬恶丝虫阳性血清为一抗,分析重组蛋白免疫反应性。结果Csnk2b部分基因片段PCR扩增产物约为700 bp,测序结果与cDNA文库中筛选得到的序列一致。重组表达载体pGEX-4T-1-Csnk2b双酶切鉴定正确。SDS-PAGE结果显示,IPTG诱导后重组蛋白GST-Csnk2b表达,相对分子质量(M r)约为45 000,与预期大小一致。Western blotting分析表明,重组蛋白能被小鼠抗犬恶丝虫阳性血清识别。结论克隆并表达了犬恶丝虫Csnk2b重组蛋白,且该蛋白具有免疫反应性。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 酪蛋白激酶2β亚基 原核表达
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犬恶丝虫病ELISA诊断方法的建立 被引量:4
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作者 侯洪烈 张西臣 +1 位作者 李建华 宫鹏涛 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第1期35-36,40,共3页
目的建立犬恶丝虫病的ELISA诊断方法。方法将犬恶丝虫成虫粗制抗原经过SephaexG-200凝胶柱层析后进行间接ELISA试验,确定最佳实验条件,建立犬恶丝虫病的同种纯化抗原ELISA诊断法。通过阻断性试验、交叉反应试验、敏感性和特异性试验、... 目的建立犬恶丝虫病的ELISA诊断方法。方法将犬恶丝虫成虫粗制抗原经过SephaexG-200凝胶柱层析后进行间接ELISA试验,确定最佳实验条件,建立犬恶丝虫病的同种纯化抗原ELISA诊断法。通过阻断性试验、交叉反应试验、敏感性和特异性试验、重复性试验及与病原学方法比较,评价其效果。结果纯化抗原ELISA方法与犬钩虫和蛔虫感染犬血清无交叉反应,检出的阳性血清最高抗体滴度为1∶25600,重复性好。结论成功建立犬恶丝虫病ELISA诊断方法,可替代虫检法对犬恶丝虫病进行早期诊断。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 抗原 ELISA
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犬恶丝虫抗体dot-ELISA检测方法的建立 被引量:7
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作者 刘德昊 杨光友 +5 位作者 王成东 杨智 罗娌 刘礼 兰镜超 黄祥明 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期106-110,共5页
为快速诊断犬恶丝虫病,建立了犬恶丝虫抗体dot-ELISA检测方法,并与阻断试验、交叉反应试验、重复性试验、琼脂扩散试验和平行对照试验进行了比较。结果显示,制备的犬恶丝虫虫体粗制抗原与犬钩虫、犬弓首蛔虫和犬蠕形螨感染犬的阳性血清... 为快速诊断犬恶丝虫病,建立了犬恶丝虫抗体dot-ELISA检测方法,并与阻断试验、交叉反应试验、重复性试验、琼脂扩散试验和平行对照试验进行了比较。结果显示,制备的犬恶丝虫虫体粗制抗原与犬钩虫、犬弓首蛔虫和犬蠕形螨感染犬的阳性血清无交叉反应,检出犬恶丝虫阳性血清的最高抗体效价为1∶1 024,重复性好;建立的犬恶丝虫病dot-ELISA诊断方法的灵敏度比琼脂扩散试验和美国IDEXX实验室制备的犬恶丝虫病诊断试剂盒分别高2 048倍和48倍。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 粗制抗原 斑点酶联免疫吸附试验 抗体
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犬恶丝虫硫氧还蛋白过氧化物酶真核表达质粒的构建及初步免疫试验 被引量:1
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作者 罗洪林 王豪举 +3 位作者 谌剑波 周雪梅 周容琼 周作勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期325-329,共5页
为评价犬恶丝虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)真核表达质粒的免疫原性,本实验利用RT-PCR方法扩增TPx基因,将其克隆于真核表达载体pVAX1中构建重组质粒pVAX1-TPx,并对其进行体外表达鉴定及通过特异性抗体水平及相关的免疫因子的检测,评价其... 为评价犬恶丝虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)真核表达质粒的免疫原性,本实验利用RT-PCR方法扩增TPx基因,将其克隆于真核表达载体pVAX1中构建重组质粒pVAX1-TPx,并对其进行体外表达鉴定及通过特异性抗体水平及相关的免疫因子的检测,评价其在体内诱导的免疫反应。实验结果表明,将pVAX1-TPx转染于Cos7细胞中能够正确表达TPx,其分子量约为28 ku,并被阳性血清所识别。将pVAX1-TPx免疫BALB/c小鼠并采用ELISA检测结果显示,重组质粒免疫组的外周血中抗体、Th2细胞分泌的IL4及IL13细胞因子水平均显著高于空质粒及空白对照组(p<0.05);但Th1分泌的IFN-γ及IL2水平差异不显著。此外,淋巴细胞增殖试验结果也表明,pVAX1-TPx免疫组显著高于其他两个对照组(p<0.05)。实验数据表明pVAX1-TPx免疫可以有效诱导特异性的体液和细胞免疫。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 TPx 表达质粒 免疫原性
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Serological investigation of vector-borne disease in dogs from rural areas of China 被引量:3
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作者 Shiwen Wang Jing He Lijuan Zhang 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2012年第2期102-103,共2页
Objective:To evaluate the Anaplasma phagocytophilum(A.phagocytophilum),Ehrlichia canis(E.canis,Dirofilaria immitis(D.immitis)(canine heartworm),Borrelia burgdorferi(B.burgdorferi)infections in countryside dogs from Yu... Objective:To evaluate the Anaplasma phagocytophilum(A.phagocytophilum),Ehrlichia canis(E.canis,Dirofilaria immitis(D.immitis)(canine heartworm),Borrelia burgdorferi(B.burgdorferi)infections in countryside dogs from Yunnan,Hainan and Anhui provinces.Methods:Serum samples were collected from 26 dogs in Yunnan.Hainan and Anhui provinces.The samples were tested using a commercial ELISA rapid diagnostic assay kit(SNAP^(?)4Dx^(?);IDEXX Laboratories,Inc.U.S.A.).Meaiiwliile,indirect immunofluorescence assay(IFA)recommended by WHO was conducted to delect IgG to A.phagocytophilum.Two methods were analyzed and compared.Results:The number of serologically positive dogs for IgG to A.phagocytophilum was only 2which was from Hainan province and none of the 26 dogs responded positive for E.canu.D.immitis(canine heartworm,and B.burgdorferi by ELISA rapid diagnostic method.The number of serologically positive dogs for IgG to A.phagocytophilum was 13(50%)by IFA method.Data of the two methods were analyzed by statistical software and the difference was statistically significant(P=0.002).Conclusions:It can be concluded that IFA method was more sensitive than ELISA rapid diagnostic method.However,we need conduct further and intensive epidemiology survey on tick-born diseases pathogens including.4.phagocytophilum,E.canis,D.immitis(canine heartworm),and B.burgdorferi which have public health significance. 展开更多
关键词 ANAPLASMA phagocytophilum EHRLICHIA canis BORRELIA BURGDORFERI dirofilaria immitis DOGS China Vector-borne disease Serological investigation ELISA rapid diagnostic assay
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丹东地区犬恶丝虫病的血清流行病学调查 被引量:1
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作者 侯洪烈 张西臣 《莱阳农学院学报》 2005年第3期210-212,共3页
本调查首次应用犬恶丝虫同种纯化抗原进行ELISA检测对辽宁省丹东地区12个品种,1048条不同年龄、不同饲养条件的犬进行犬恶丝虫的血清流行病学调查,同时与虫检法进行比较。结果表明:丹东地区犬恶丝虫的血清阳性率为28.5%,虫检的阳性率为2... 本调查首次应用犬恶丝虫同种纯化抗原进行ELISA检测对辽宁省丹东地区12个品种,1048条不同年龄、不同饲养条件的犬进行犬恶丝虫的血清流行病学调查,同时与虫检法进行比较。结果表明:丹东地区犬恶丝虫的血清阳性率为28.5%,虫检的阳性率为22.6%。虫检法阳性犬的检测结果与ELISA法一致,且ELISA法的检出率高于虫检法。此外,调查结果还表明:犬恶丝虫的感染率与犬的品种、性别无关;与犬的饲养条件及年龄有关。ELISA法在丹东地区犬恶丝虫病的血清流行病学调查中的应用,有效地提高了该病的检出率,为该地区对犬恶丝虫病的早期预防和治疗提供了有力依据。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 ELISA 血清流行病学
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Prevalence of filarial parasites in domestic and stray cats in Selangor State, Malaysia
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作者 Nazeh M Al-Abd Zurainee Mohamed Nor +4 位作者 Mustafa Kassim Marzida Mansor Abdulelah H.Al-Adhroey Romano Ngui Sinnadurai Sivanandam 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2015年第9期693-697,共5页
Objective: To determine the prevalence of the filarial parasites, ie., Brugia malayi, Brugia pahangi(B. pahangi), Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens(D. repens)in domestic and stray cats. Methods: A total of 17... Objective: To determine the prevalence of the filarial parasites, ie., Brugia malayi, Brugia pahangi(B. pahangi), Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens(D. repens)in domestic and stray cats. Methods: A total of 170 blood sample were collected from domestic and stray cats and examined for i larial worm parasites in two localities, Pulau Carey and Bukit Gasing, Selangor State, Malaysia. Results: The overall prevalence of infection was 23.5%(40/170; 95% CI=17.4–30.6). Of this, 35%(14/40; 95% CI=22.1–50.5) and 50%(20/40; 95% CI=35.2–64.8) were positive for single B. pahangi and D. repens, respectively. The remaining of 15%(6/40; 95% CI=7.1–29.1) were positive for mixed B. pahangi and D. repens. In addition, 75% of the infected cats were domestic, and 25% were strays. No Brugia malayi and Dirofilaria immitis was detected. Eighty-four cats were captured at Pulau Carey, of which 35.7%(30/84) were infected. Among the cats determined to be infected, 93%(28/30; 95% CI=78.7–98.2) were domestic, and only 6.7%(2/30; 95% CI=19.0–21.3) were strays. Conversely, the number of infected cats was three times lower in Bukit Gasing than in Pulau Carey, and most of the cats were stray. Conclusions: B. pahangi and D. repens could be the major parasites underlying i lariasis in the study area. Adequate prophylactic plans should be administrated in the cat population in study area. 展开更多
关键词 Filarial parasites BRUGIA Wuchereria dirofilaria Cat FILARIASIS
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犬心丝虫病的诊断与防治
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作者 周丽荣 李春华 +1 位作者 纪守学 金公才 《辽宁农业职业技术学院学报》 2003年第4期17-18,共2页
在犬的饲养过程中 ,发现了犬的心丝虫病。再通过对周边地区养犬的调查、剖检 ,掌握了犬心丝虫病的临床症状、实验室诊断方法 。
关键词 犬心线虫病 临床症状 诊断 治疗 预防
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High resolution melting real-time PCR detect and identify filarial parasites in domestic cats
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作者 Darawan Nonsaithong Supit Yotmek +4 位作者 Somsri Yotmek Hathai Nochote Sirichit Wongkamcha Sittiruk Roytrakul Usa Lek-Uthai 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2018年第12期682-687,共6页
Objective: To detect and identify filarial parasites in dried blood spots(DBS) collected from domestic cats using high resolution melting real-time PCR(HRM RT-PCR). Methods: A total of 208 DBS were collected from dome... Objective: To detect and identify filarial parasites in dried blood spots(DBS) collected from domestic cats using high resolution melting real-time PCR(HRM RT-PCR). Methods: A total of 208 DBS were collected from domestic cats in a brugian filariasis endemic areas in Surat Thani Province, southern Thailand. Microfilariae were found in 9 blood slides using Giemsa-stained thick blood film. The extracted DNA from blood spot volumes of 10 and 20 μL DBS with positive filarial parasites in cats were performed using HRM RT-PCR method. The primers were designed based on the partial mitochondrial 12S rRNA gene for identifying Brugia malayi, Brugia pahangi, Dirofilaria immitis. All purified samples were then detected. Results: Using different volumes of 10 μL and 20 μL DBS could easily distinguish filarial parasites and showed similar results. PCR amplicons of Brugia malayi, Brugia pahangi and Dirofilaria immitis were determined at melting peak(temperature) of 75.70℃, 77.46 ℃, and 73.56 ℃, respectively. All 9 positive DBS samples showed positive Brugia pahangi and similar nucleotide sequences. Conclusions: This HRM RT-PCR method is able to diagnose, identify and discriminate filarial parasites collected from DBS, which is simple and inexpensive compared with other probe-based genotyping methods. Furthermore, this method is useful to survey, prevent and control filariasis. 展开更多
关键词 High resolution MELTING analysis DRIED blood spot BRUGIA malayi BRUGIA pahangi dirofilaria immitis
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Prevalence of Canine Heartworm Disease in Stray Dogs of Grenada, West Indies
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作者 Melissa C. Brown Alfred Chikweto +3 位作者 Keshaw P. Tiwari Claude DeAllie Muhammad Iqbal Bhaiyat Ravindra N. Sharma 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2017年第11期168-174,共7页
Dirofilariasis (heartworm disease) has been reported in Grenadian dogs. The aim of this cross-sectional study was to determine the prevalence of Dirofilaria immitis in stray dogs (n = 523) from the six Parishes of Gre... Dirofilariasis (heartworm disease) has been reported in Grenadian dogs. The aim of this cross-sectional study was to determine the prevalence of Dirofilaria immitis in stray dogs (n = 523) from the six Parishes of Grenada. Necropsy records were reviewed;information on the distribution and lesions of Dirofilaria immitis was recorded. A total of 144 from 523 dogs (27.5%;95% CI: 23.9% to 31.5%) were positive for Dirofilaria immitis on necropsy. This study shows that heartworm disease is prevalent in stray dogs in all the Parishes of mainland Grenada. This is a progressive, life-threatening disease and thus, there is a need to screen and prevent it within the stray dog population of Grenada. 展开更多
关键词 dirofilaria immitis PREVALENCE Stray DOGS NECROPSY Grenada
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应用ITS-2基因对小熊猫源恶丝虫虫种的鉴定 被引量:2
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作者 费宇翔 黄红松 +6 位作者 杨光友 张志和 王成东 杨智 兰景超 罗娌 刘礼 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期593-596,共4页
为探讨采自小熊猫的恶丝虫虫种的分类地位,测定了四川雅安地区犬源犬恶丝虫和成都及重庆两地小熊猫源恶丝虫的核糖体第二内转录间隔区(ITS-2)基因序列并进行了比对分析。结果显示,犬源犬恶丝虫和小熊猫源恶丝虫与来自中国台湾、印度... 为探讨采自小熊猫的恶丝虫虫种的分类地位,测定了四川雅安地区犬源犬恶丝虫和成都及重庆两地小熊猫源恶丝虫的核糖体第二内转录间隔区(ITS-2)基因序列并进行了比对分析。结果显示,犬源犬恶丝虫和小熊猫源恶丝虫与来自中国台湾、印度的犬恶丝虫的ITS-2基因序列的同源性高达98.0%-100%。同时,构建的NJ树和MP树均显示不同宿主和不同地区的犬恶丝虫和小熊猫源恶丝虫聚类形成一个支系。表明,小熊猫源恶丝虫应为犬恶丝虫,而前苏联学者定名的小熊猫恶丝虫应为犬恶丝虫的同物异名虫种。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 小熊猫 ITS-2基因 序列分析
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基于重组MTFP基因蛋白的犬心丝虫抗体Dot-ELISA检测方法的建立 被引量:1
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作者 姜鑫 李新 +5 位作者 侯洪烈 高珺珊 宫鹏涛 李建华 杨举 张西臣 《天津农业科学》 CAS 2016年第11期107-110,共4页
以建立Dot-ELISA检测犬心丝虫血清抗体的方法,用纯化的犬心丝虫MTFP基因蛋白为包被抗原,进行条件优化,筛选最佳反应条件,并进行敏感性、重复性和特异性等试验。结果表明,建立的犬心丝虫Dot-ELISA检测方法最佳抗原包被浓度为0.5μg·... 以建立Dot-ELISA检测犬心丝虫血清抗体的方法,用纯化的犬心丝虫MTFP基因蛋白为包被抗原,进行条件优化,筛选最佳反应条件,并进行敏感性、重复性和特异性等试验。结果表明,建立的犬心丝虫Dot-ELISA检测方法最佳抗原包被浓度为0.5μg·片-1;待检样品血清最佳稀释比例为1∶50;HRP标记兔抗犬抗体最佳稀释比例为1∶4 000;建立的Dot-ELISA方法敏感性为1∶200;批间重复试验证明,该方法具有良好的重复性,且与犬等孢球虫阳性血清和犬蛔虫阳性血清没有交叉反应;利用建立的方法对吉林省某地的62份待检血清进行检测,结果阳性率为4.8%。研究成功建立了基于重组MTFP基因蛋白的犬心丝虫Dot-ELISA检测血清抗体方法,为犬心丝虫病流行病学调查和临床诊断提供了新技术。 展开更多
关键词 犬心丝虫 Dot—ELISA MTFP蛋白
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犬恶丝虫天冬氨酸转氨酶基因的原核表达及分析
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作者 刘梅 兰景超 +8 位作者 王宇 林海 张志和 王成东 罗娌 刘理 古小彬 汪涛 杨光友 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期700-705,共6页
目的了解犬恶丝虫天冬氨酸转氨酶(AspAT)基因特征及其在虫体的定位,对犬恶丝虫AspAT(DiAspAT)基因进行了原核表达和免疫荧光定位分析。方法从犬恶丝虫成虫转录组数据库中筛选到DiAspAT基因序列,通过RT-PCR方法克隆DiAspAT基因,利用相关... 目的了解犬恶丝虫天冬氨酸转氨酶(AspAT)基因特征及其在虫体的定位,对犬恶丝虫AspAT(DiAspAT)基因进行了原核表达和免疫荧光定位分析。方法从犬恶丝虫成虫转录组数据库中筛选到DiAspAT基因序列,通过RT-PCR方法克隆DiAspAT基因,利用相关软件进行生物信息学分析;构建原核表达载体pET32a(+)-AspAT并进行诱导表达;表达产物经Ni-NTA层析柱纯化后进行Western blotting分析;通过免疫组化技术观察DiAspAT蛋白在犬恶丝虫虫体内的定位分布。结果 DiAspAT基因的ORF框长度为1 221bp,编码406个氨基酸,理论相对分子量45.731 8kDa,等电点为8.05,表达的重组蛋白约为64kDa;Western blotting显示AspAT重组蛋白能被犬恶丝虫阳性血清识别;间接免疫荧光染色结果显示,DiAspAT在犬恶丝虫的侧索、皮下组织、肌细胞、假体腔壁、子宫及肠上皮、发育的胚胎中分布。结论成功克隆和表达了DiAspAT基因,并完成DiAspAT在雌性犬恶丝虫成虫上的定位,为进一步了解犬恶丝虫的生理代谢及犬恶丝虫病的诊断和防控奠定基础。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 AspAT基因 克隆 原核表达 免疫荧光定位
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犬恶丝虫核苷二磷酸激酶(NDPK)基因的原核表达及其免疫荧光定位
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作者 张浩杰 刘梅 +6 位作者 李春燕 何冉 兰景超 罗娌 古小彬 谢跃 杨光友 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第9期1453-1460,共8页
对犬恶丝虫核苷二磷酸激酶(NDPK)基因的基本特征进行探究,并评估其诊断价值,旨在为犬恶丝虫病的诊断提供依据。本研究原核表达了Di-NDPK,通过生物信息学、免疫印迹和免疫荧光组化分析了该蛋白的基本特征,通过检测犬恶丝虫阳性血清评估了... 对犬恶丝虫核苷二磷酸激酶(NDPK)基因的基本特征进行探究,并评估其诊断价值,旨在为犬恶丝虫病的诊断提供依据。本研究原核表达了Di-NDPK,通过生物信息学、免疫印迹和免疫荧光组化分析了该蛋白的基本特征,通过检测犬恶丝虫阳性血清评估了rDi-NDPK的诊断价值。免疫印迹显示,Di-NDPK具有良好的反应原性,免疫荧光组化显示,Di-NDPK在犬恶丝虫的侧索及肠上皮细胞和肠腔中分布。间接ELISA显示,该方法的敏感性为66.7%(16/24),特异性为38.9%(14/36),其中与犬细粒棘球蚴病阳性血清、犬钩虫病阳性血清以及犬弓首蛔虫病阳性血清发生交叉反应。Di-NDPK是一个分泌蛋白,但不适合作为犬恶丝虫病的诊断候选抗原。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 NDPK基因 克隆 原核表达 免疫荧光定位
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犬恶丝虫丝氨酸蛋白酶抑制剂特性分析与诊断价值的初步评价 被引量:1
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作者 李春燕 兰景超 +6 位作者 罗娌 黄文俊 张浩杰 董晓薇 古小彬 谢跃 杨光友 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期46-52,共7页
为探究犬恶丝虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(Di-Serpin)的生物学特性,初步评价重组蛋白(rDi-Serpin)的诊断价值。本研究扩增犬恶丝虫的Di-Serpin基因片段并经原核表达系统表达该蛋白,经western blot和免疫荧光定位分析r Di-Serpin的免疫反应性以... 为探究犬恶丝虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(Di-Serpin)的生物学特性,初步评价重组蛋白(rDi-Serpin)的诊断价值。本研究扩增犬恶丝虫的Di-Serpin基因片段并经原核表达系统表达该蛋白,经western blot和免疫荧光定位分析r Di-Serpin的免疫反应性以及Di-Serpin在虫体的分布;以纯化的r Di-Serpin为包被抗原,通过间接ELISA评价其诊断价值。结果显示,Di-Serpin基因片段共编码121个氨基酸,预测蛋白质分子量为13.56 ku,等电点为5.06,含有一个Serpin结构域;Di-Serpin主要分布于犬恶丝虫(雌虫、雄虫)的表皮层和肠上皮;以其为包被抗原建立的间接ELISA方法,结果显示:该方法的敏感性和特异性检测结果分别为70%(14/20)和70%(35/50)。研究结果表明,犬恶丝虫的Di-Serpin可能为分泌蛋白,在抑制宿主蛋白酶活性,参与抗炎及逃避宿主对虫体的免疫中起重要作用;该蛋白虽有较好的免疫反应性,但其特异性和敏感性均较低,不适合作为犬恶丝虫病的候选诊断抗原。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 SERPIN 特性分析 免疫定位 诊断价值
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犬心丝虫内共生体-沃尔巴克氏体DNA检测
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作者 朱晓静 王金花 +2 位作者 廖承红 徐永昊 韩谦 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期27-30,共4页
通过检测犬血液中心丝虫共生体-沃尔巴克氏体DNA,了解海南海口犬心丝虫的自然感染及沃尔巴克氏体的基因分型情况。随机以海南流浪狗中心和海口市宠物医院的60只家犬作为指示动物,使用真空采血管抽取家犬全血,应用PCR扩增犬血中犬心丝虫... 通过检测犬血液中心丝虫共生体-沃尔巴克氏体DNA,了解海南海口犬心丝虫的自然感染及沃尔巴克氏体的基因分型情况。随机以海南流浪狗中心和海口市宠物医院的60只家犬作为指示动物,使用真空采血管抽取家犬全血,应用PCR扩增犬血中犬心丝虫沃尔巴克氏体丝状热敏感蛋白基因(fts Z基因)片段以检测心丝虫感染犬外周血液中的沃尔巴克氏体DNA,然后对阳性片段进行测序,并将所测序列与Gen Bank中注册的基因序列进行比较分析。结果显示,共检测60只家犬血液,其中发现3只犬为心丝虫沃尔巴克氏体阳性,阳性率5.0%。系统发育树对比结果显示,海口犬源犬恶丝虫沃尔巴克氏体与来自中国成都犬恶丝虫沃尔巴克氏体的fts Z基因序列的同源性最高。同时,显示不同宿主和不同地区的犬恶丝虫沃尔巴克氏体形成一个支系。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 沃尔巴克氏体 ftsZ基因 序列分析
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犬恶丝虫感染胶体金试纸条检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 姜鑫 高珺珊 +6 位作者 侯洪烈 宫鹏涛 李建华 杨举 李赫 李棕松 张西臣 《中国预防医学杂志》 CAS 2016年第11期809-812,共4页
目的建立犬恶丝虫血清抗体检测胶体金试纸条方法。方法利用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为金标抗体,犬恶丝虫MTFP重组蛋白作为诊断抗原标记检测线(T线),兔抗SPA抗体标记质检线(C线),对建立的各项条件进行优化,制备胶体金试纸... 目的建立犬恶丝虫血清抗体检测胶体金试纸条方法。方法利用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为金标抗体,犬恶丝虫MTFP重组蛋白作为诊断抗原标记检测线(T线),兔抗SPA抗体标记质检线(C线),对建立的各项条件进行优化,制备胶体金试纸条;对建立的方法进行特异性、敏感性、稳定性验证试验。用建立的胶体金试纸条检测方法对62份犬血清样本进行检测。结果所制备的胶体金试纸条敏感性为1∶8,重复性良好,检测犬等孢球虫阳性血清、犬蛔虫阳性血清结果均为阴性。应用制备的胶体金试纸条检测62份犬血清,阳性样本4份,阴性样本58份,阳性检出率6.45%。结论建立的犬恶丝虫感染胶体金试纸条检测方法具有特异性、稳定性等特点,为犬恶丝虫病的诊断提供了一种新的检测方法。 展开更多
关键词 犬恶丝虫 犬恶丝虫病 胶体金试纸条 检测方法
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