DKK-1抑制剂对大鼠蛛网膜下腔出血后脑水肿影响的研究

目的探讨DKK-l对大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP-4)和水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)表达的影响。方法选取2022年1-12月期间由广西医科大学动物实验中心提供的雄性大鼠72只,按随机数表法分为假手术组、SAH模型组和DKK-1抑制剂组,每组24只。分别比较各组在不同时间点(术后1、2、4周)的脑组织含水量和AQP-4、AQP-1的表达水平。结果假手术组大鼠的脑组织含水量未改变,另两组脑组织含水量自第1周均慢慢提高,且在1周时增至最高。DKK-1抑制剂组术后1、2、4周时间点脑组织含水量均低于SAH模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。DKK-1抑制剂组术后1、2、4周AQP-4表达水平(0.78±0.14)%、(0.87±0.16)%、(0.98±0.18)%与术后1、2、4周AQP-1表达水平(0.79±0.15)%、(0.89±0.17)%、(0.97±0.19)%不断上调,差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组未出现AQP-1上调,其余各组AQP-1从术后1周时均逐渐增高上调;SAA模型组和DKK-1抑制剂组于术后4周时AQP-1表达值达到顶峰。DKK-1抑制剂组术后1、2、4周时间点AQP-1表达低于SAH模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论DKK-1抑制剂可以减少SAH后大鼠脑组织含水量,可抑制AQP-4及AQP-1表达,从而减轻SAH后大鼠神经功能损害。

杜仲颗粒与鲑降钙素注射液联合常规疗法治疗原发性骨质疏松症临床观察

目的:观察在常规西医疗法基础上予杜仲颗粒联合鲑降钙素注射液治疗原发性骨质疏松症(POP)肝肾不足证的疗效。方法:选取116例POP肝肾不足证患者,随机分为对照组和治疗组各58例。2组均予调整生活方式、适量运动等常规干预,对照组口服碳酸钙D3片与阿仑膦酸钠片,治疗组在对照组基础上予杜仲颗粒联合鲑降钙素注射液治疗。2组疗程均为6月。比较2组患者治疗前后的肝肾不足证症状评分、骨密度(BMD)、血清中骨硬化蛋白(SOST)和Dickkopf-1(DKK-1)水平,评价治疗后的临床疗效。结果:治疗组总有效率为96.55%,高于对照组(82.76%),差异有统计学意义(P<0.05)。2组腰脊疼痛、步履艰难、目眩、酸软少力评分均较治疗前下降(P<0.01),治疗组各项评分均低于对照组(P<0.01)。2组腰椎正位(L2~4)和右股骨颈的BMD均较治疗前升高(P<0.01),治疗组2项BMD值均高于对照组(P<0.01)。2组血清中SOST和DKK-1水平均较治疗前下降(P<0.01),治疗组2项指标水平均低于对照组(P<0.01)。结论:在常规西医疗法基础上予杜仲颗粒联合鲑降钙素注射液治疗POP肝肾不足证疗效确切,可有效改善患者的临床症状、促进骨形成,降低患者血清中的SOST和DKK-1水平可能是其疗效途径之一,值得进一步探讨。

人源Dickkopf-1真核表达质粒的构建

目的构建人源Dickkopf-1(DKK-1)基因的真核表达质粒,为进一步探讨DKK-1的生物学功能奠定基础。方法Trizol法从人新鲜胎盘组织中抽提总RNA,RT-PCR法反转录为cDNA,以cDNA为模板扩增人源DKK-1的基因序列,将真核表达载体pcDNA3.1和DKK-1的PCR产物分别在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pcDNA3.1-DKK-l,转化至大肠杆菌后经菌落PCR、NHeⅠ和EcoRⅠ双酶切及测序鉴定。结果RT-PCR法从人胎盘中扩增出816bp大小的目的片段,重组质粒转化至大肠杆菌后菌落PCR同样扩增出816bp大小的目的片段,NHeⅠ和EcoRⅠ双酶切重组质粒能切出两条目的条带,测序后与Genbank中DKK-1的cDNA对比,证明DKK-1的基因序列完全正确。结论成功构建了pcDNA3.1-DKK-1重组质粒,为研究人源DKK-1的功能及其在细胞系中的作用奠定了基础。