DL-炔丙基甘氨酸对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能和凋亡相关蛋白的影响

目的:探讨硫化氢(H2S)合成酶抑制剂DL-炔丙基甘氨酸(PAG)对其2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞功能和凋亡相关蛋白的影响。方法:采用高糖高脂饮食喂养和腹腔注射小剂量STZ的方法建立大鼠T2DM模型,将成模大鼠按随机数字表法随机分为糖尿病组(DM组),糖尿病+DL-炔丙基甘氨酸组(DM+PAG组),另设正常对照组,各15只。每日固定时间腹腔注射受试制剂,DM+PAG组给予PAG[50 mg/(kg·d)],对照组和DM组给予相同体积的生理盐水,连续给药2周。投药结束后,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素(FIns)水平,胰腺组织中H2S水平,免疫组化法检测分析胰腺组织胰岛素、Caspase-3、Bax和Bcl-2的表达情况,并计算胰腺组织相对β细胞数量和平均β细胞面积。结果:与对照组相比,DM组大鼠血浆FIns降低,FBG升高,胰腺组织H2S浓度水平升高;胰腺组织胰岛素阳性颗粒减少,Caspase-3、Bax表达增强,Bcl-2的表达减弱,Bc1-2/Bax比值降低;相对β细胞数量和平均β细胞面积均明显减小;经PAG处理后,大鼠血浆FIns明显升高,FBG降低,胰腺组织H2S浓度明显降低;胰腺组织胰岛素阳性颗粒明显增多,Caspase-3、Bax表达减弱,Bcl-2的表达增强,Bc1-2/Bax比值升高;相对β细胞数量和平均β细胞面积增加。结论:内源性H2S通过调节胰岛β细胞凋亡相关蛋白表达,促进胰岛β细胞的凋亡,减少2型糖尿病大鼠胰岛β细胞的相对数量,从而减少胰岛素的分泌;而PAG能减少胰岛β细胞凋亡,增加2型糖尿病大鼠胰岛β细胞的相对数量,增加胰岛素的分泌,达到控制血糖的目的。

硫化氢对甲醛炎性痛大鼠行为学的影响

目的观察鞘内注射硫化氢供体硫氢化钠(NaHS)和腹腔注射胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂DL-炔丙基甘氨酸(PAG)对甲醛炎性痛大鼠的行为学影响,探讨小分子气体硫化氢(H2S)在炎性痛中的作用。方法成年雄性SD大鼠40只,随机分为5组(n=8):疼痛模型组、人工脑脊液组、NaHS组、生理盐水组、PAG组。注射溶媒、NaHS或PAG后,向大鼠一侧足底皮下注射5%甲醛溶液,观察60 min,进行疼痛行为学评分。结果疼痛模型组、人工脑脊液组和生理盐水组的疼痛行为学评分差异无显著性(P>0.05);在第二相反应时段,与疼痛模型组相比,人工脑脊液组和生理盐水组的疼痛行为学评分无统计学差异(P>0.05),NaHS组和PAG组的疼痛行为学评分明显降低(P<0.05)。结论鞘内注射NaHS和腹腔注射PAG均能对甲醛炎性痛大鼠产生镇痛作用。

硫化氢与大鼠急性重症胰腺炎相关性的实验研究

目的探讨硫化氢(H2 S)对大鼠急性重症胰腺炎(SAP)组织损伤的影响。方法健康雄性大鼠160只,大鼠随机分四组:对照组,n=40;SAP组,n=40;SAP+硫氢化钠(NaHS)组,n=40;SAP+DL-炔丙基甘氨酸(PAG)组,n=40。每组随机分为四小组,分别对应末次注射L-Arg后3 h、12 h、24 h、36 h四个时间点,每小组n=10。分别测定血清H2 S、淀粉酶、胰腺组织中胱硫醚-γ-裂解酶(Cystathionine-γ-synthase,CSE)含量、组织病理形态学变化。结果 SAP+NaHS组血清淀粉酶较SAP组有显著升高;CSE表达与SAP组无显著性差异;镜下见比SAP组更早出现坏死和小叶结构破坏。SAP+PAG组与SAP组对照发现,预先腹腔注射PAG后,血清淀粉酶、H2 S含量及组织CSE含量明显降低,其差异有显著性,病理结果显示,显著延缓了胰腺组织损伤的出现,出血、炎症细胞浸润明显减少,Grewal胰腺病理损伤评估证实与SAP组有显著差异。结论血清H2 S含量与组织损伤呈正相关,PAG有减轻大鼠胰腺炎模型胰腺组织的损伤作用。

内源性硫化氢对硫酸铍诱导人支气管上皮细胞自噬的影响

目的探讨内源性硫化氢(H2S)对硫酸铍(BeSO4)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)自噬的影响。方法用0、100、150、200、250和300μmol/L BeSO4处理16HBE细胞48 h,MTT法测定细胞活力,亚甲基蓝分光光度法测定细胞内H2S含量,Western blot测定自噬标志蛋白LC3-B、Beclin-1及P62表达;用300μmol/L硫氢化钠(NaHS)或10 mmol/L DL-炔丙基甘氨酸(PPG)预处理16HBE细胞6 h后,用BeSO4处理细胞,研究H2S含量对上述指标的影响。结果 (1)BeSO4作用16HBE细胞48 h的半数致死浓度为249μmol/L;与对照组相比,BeSO4组自噬蛋白LC3-II/LC3-I和Beclin-1表达升高,细胞活力、H2S含量和P62蛋白表达降低,当BeSO4浓度>100μmol/L时,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)与BeSO4组比较,NaHS+BeSO4组细胞活力、H2S水平和P62蛋白表达均升高(P<0.05),LC3-II/LC3-I和Beclin-1蛋白表达有降低趋势,但差异无统计学意义;(3)与BeSO4组比较,PPG+BeSO4组细胞活力、H2S水平及P62蛋白表达降低,LC3-II/LC3-I和Beclin-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论在本试验条件下,BeSO4染毒能致16HBE细胞活力和内源性H2S含量下降,并引起细胞自噬;内源性H2S能抑制BeSO4诱导的16HBE细胞自噬、减轻细胞毒性,发挥保护功能。

硫化氢——具有临床应用潜力的气体信号分子

背景硫化氢（hydrogen sulphide，H2s）是人们发现的第3个内源性气体信号转导分子，参与了许多疾病的发生发展过程，并且发现H2S相关药物对于某些疾病治疗取得了较为满意的结果。目的总结H2s在中枢神经系统、心血管系统等的作用以及相关机制。内容从中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统、消化系统、炎症反应以及其他作用等方面综述近几年来对H2S研究的最新进展，发现H2s可能成为探求病因的一个新方向以及研发相关药物的可能性。趋向随着对H2s认识的加深，H2s相关药物有望成为一种临床用药。