梓醇对T2DM大鼠大血管病变的保护作用及与oxLDL/LDL和NF-κB信号通路的关系

目的探讨梓醇对2型糖尿病(T2DM)大鼠大血管病变的保护作用与氧化低密度脂蛋白(oxLDL)/低密度脂蛋白(LDL)和核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的关系。方法用高糖高脂饲料喂养和腹腔注射STZ复合因素对大鼠进行T2DM造模,将大鼠分为模型组、二甲双胍组(134 mg·kg^(-1)·d^(-1))、梓醇组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)),另设对照组,每组10只,模型组和对照组给予相同体积的0.9%氯化钠溶液,干预4周。结束后,自动生化分析仪检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)水平;酶联免疫吸附法测定人巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、oxLDL含量;RT-PCR法检测主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA表达;Western blot检测主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1蛋白表达;透射电镜观察大鼠主动脉内皮细胞结构。结果对照组大鼠主动脉内皮细胞形态正常,模型组细胞显著肿胀,连续性中断、见空泡,部分内皮细胞有显著脱落,细胞核褶皱变形,线粒体、内质网中度肿胀,嵴肿胀紊乱或溶解,见脂滴、糖原颗粒;二甲双胍组和梓醇组内皮细胞形态结构轻微肿胀,线粒体、内质网结构正常,细胞核轻微变形,部分内皮细胞有轻微脱落,损伤程度显著轻于模型组。与对照组比较,模型组血清FBG、TC、TG、LDL水平,MCP-1和oxLDL水平,主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA及蛋白表达量显著性升高(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组和梓醇组血清FBG、TC、TG、LDL水平,MCP-1和oxLDL水平,主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA及蛋白表达量显著性降低(P<0.05)。结论梓醇可能通过oxLDL/LDL和NF-κB信号通路减轻T2DM大鼠大血管病变。

二氢杨梅素抑制JNK信号减少T2DM大鼠海马神经细胞凋亡、Aβ和p-Tau蛋白水平

海马神经元是中枢神经系统的重要细胞之一,与认知功能有密切的联系[1]。二型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠海马损伤与其海马Tau蛋白磷酸化和Aβ沉积有关[2]。二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)是一种黄酮类物质,具有抗炎、抗氧化等作用[3]。研究显示:减少海马神经细胞凋亡的重要机制之一是抑制JNK信号[4]。本实验通过高糖高脂和低浓度STZ喂养SD大鼠复制T2DM大鼠模型,探讨DHM通过抑制JNK信号降低T2DM大鼠海马神经细胞凋亡、Aβ和p-Tau水平。

SIRT1在运动训练和白藜芦醇改善T2DM大鼠骨骼肌胰岛素信号通路中的作用

目的:探讨SIRT1在运动训练和(或)白藜芦醇改善Ⅱ型糖尿病(T2DM)大鼠骨骼肌胰岛素信号通路中的作用。方法:将40只雄性SD大鼠分为正常对照组(C)、T2DM组(D)、T2DM运动组(DE)、T2DM白藜芦醇给药组(DR)和T2DM白藜芦醇给药运动组(DER),每组8只。干预后,检测大鼠空腹及OGTT后30min、60 min和120 min血糖和血胰岛素浓度及比目鱼肌SIRT1、AKT、pAKT-Ser473、IRS-1、pIRS-1-Ser307和PTP1B蛋白表达量。结果:1)与C组比较,D组空腹血糖和空腹血胰岛素明显升高;与D组比较,DE、DR和DER组OGTT后30 min、60 min和120 min血糖浓度明显低于D组对应时间点血糖浓度;与D组比较,DE、DR和DER组空腹血胰岛素浓度明显降低(P<0.01或P<0.05),OGTT后30 min和60 min,血胰岛素浓度明显低于D组对应时间点血胰岛素浓度,120 min仅DER组低于D组浓度(P<0.01)。2)与C组比较,D组SIRT1和pAKT-Ser473明显降低(P<0.01),IRS-1和AKT无明显变化,PTP1B和pIRS-1-Ser307明显升高(P<0.01)。3)与D组比较,DE、DR和DER组AKT和IRS-1无明显变化(P>0.05),SIRT1和pAKT-Ser473显著升高(P<0.01),PTP1B和pIRS-1-Ser307显著降低(P<0.01)。4)与DE和DR组比较,DER组SIRT1和pAKT-Ser473显著升高(P<0.05),PTP1B和pIRS-1-Ser307显著降低(P<0.05)。结论:7周游泳训练和(或)白藜芦醇单独或共同干预均能改善T2DM大鼠糖耐量受损,且共同干预较单独干预效果更加显著。

知母总皂苷干预T2DM大鼠的药效学研究

目的通过知母总皂苷药物干预2型糖尿病大鼠(T2DM)评价知母总皂苷的降糖降脂药效作用。方法采用链脲佐菌素(STZ)结合高脂饲料喂养法建立T2DM大鼠模型,知母总皂苷高、中、低剂量等药物组干预T2DM大鼠,测定前后空腹血糖、糖耐量、胰岛素水平、血脂指标、TNF-α含量,统计学处理数据进行比较分析。结果知母总皂苷可显著降低T2DM糖尿病大鼠的空腹血糖,显著改善T2DM大鼠的糖耐量异常及高血脂症状,能够下调T2DM大鼠肝脏的TNF-α表达。结论知母总皂苷具有显著的降血糖降血脂药效作用,这可能与知母总皂苷增加了T2DM大鼠的胰岛素敏感性,改善其胰岛素抵抗状态有关。

艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起功能及AGEs影响的研究

目的研究艾灸对糖尿病(DM)性阴茎勃起功能障碍(ED)的作用及其对阴茎晚期糖基化终产物(AGEs)的影响。方法以链脲佐菌素(STZ)诱导DM大鼠模型,再以阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验筛选DM性ED大鼠模型,随机分为模型组、艾灸组,另设一正常对照组。艾灸组取肾俞穴、三阴交穴,以麦粒灸施治,观察艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起、血糖、阴茎晚期糖基化终产物(AGEs)的影响。结果艾灸对DM性ED大鼠血糖有一定的改善作用;能较明显改善其阴茎勃起功能;能改善阴茎中AGEs水平。结论艾灸对DM性ED大鼠阴茎勃起功能有一定作用,这种作用与艾灸改善血糖及阴茎AGEs水平有一定相关性。

牛磺酸对实验性糖尿病大鼠氧化应激的预防作用

近年自由基防御机能紊乱在糖尿病（DM）中的作用受到重视。牛磺酸（taurine，Tau）是兴奋性较高组织中含量最丰富的游离氨基酸，而高糖血症可使神经、晶状体、肾小球及心肌等细胞中Tau含量显著下降。本实验旨在观察预防性补充Tau对DM大鼠氧化应激水平的影响。

阿魏酸钠抑制糖尿病大鼠心肌非酶糖基化的形成

目的探讨阿魏酸钠(SF)对糖尿病(DM)大鼠心肌非酶糖基化的影响。方法对链脲佐菌素(STZ)诱导的DM大鼠灌胃给予SF110mg/(kg.d)治疗8周,测定各组大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及血清果糖胺(FMN)、丙二醛(MDA)水平,并用酶免法测定心肌糖基化终产物(AGEs)含量。结果DM大鼠心肌AGEs及血清FMN、MDA显著高于对照组,血清SOD、CAT活性降低,SF治疗显著改善上述指标的变化。结论SF可显著抑制DM大鼠心肌AGEs的形成,机制与其保护抗氧化酶有关。

糖尿病大鼠心肌损伤的观察及机制初探

目的:探讨不同病程、不同血糖浓度对糖尿病(diabetesmellitus,DM)大鼠的心肌损伤及其机制。方法:SD大鼠64只,随机分为2组:对照组(NC组)32只,实验组(DM组)32只。DM组腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)55mg/kg诱发DM模型。实验组和对照组又随机分为4组,每组8只。分别观察病程2周、4周、6周、8周大鼠心功能及心肌组织生化指标的变化。另取SD大鼠40只,随机分出8只作为对照组(NC),其余用上述方法造模,并按最后一次血糖浓度分为3组:16.7～21.6mmol/L(DM1组),21.7～26.6mmol/L(DM2组),26.7mmol/L以上(DM3组)。比较各组大鼠心功能及心肌组织生化指标的变化。结果:与NC组比,DM大鼠第4周心肌LVEDP、-dp/dtmax、MDA含量,第6周除CK外各项指标、第8周心肌各项指标差异均有显著性(P<0.01～0.05)。不同血糖浓度DM大鼠各项指标与NC组差异均有显著性(P<0.01～0.05)。与DM1组比,DM2组LVEDP、-dp/dtmax、t-dp/dt、CK、SOD、MDA差异均有显著性(P<0.01～0.05),DM3组各项指标除LDH外差异均有显著性(P<0.01～0.05);与DM2组比,DM3组LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、SOD差异有显著性(P<0.01～0.05)。结论:DM大鼠从第4周开始出现心肌舒张受限,第6周开始出现心肌收缩障碍,心肌组织酶明显改变,随病程延长、血糖浓度升高而逐渐加重。

超微粉化瓜蒌根对2型糖尿病SD大鼠免疫异常的干预研究

目的:观察超微粉化瓜蒌根对2型糖尿病(T2DM)SD大鼠免疫机制异常的干预研究。方法:选用雄性SD大鼠,予高脂高盐饲料喂养8周后加小剂量链脲佐菌素(STZ)注射建立T2DM大鼠模型,大鼠随机分为正常对照组,模型组,中药(低、中、高剂量)组。中药组分别予微粉化瓜蒌根灌胃,正常组和模型组给予等体积生理盐水,治疗4周后采用稳态模式法(HOMA)评价胰岛素抵抗(Homa-IR)和胰岛β细胞分泌功能(Homa-IS)、检测空腹血糖(FPG)及空腹胰岛素(Fins);应用流式细胞仪检测血淋巴细胞亚群分布的变化情况(CD系列)。结果:T2DM大鼠模型呈现CD4+T细胞、CD19+B细胞、CD11a+表达水平显著低下(P<0.05);中药治疗后FPG、Ho-ma-IR显著低于模型组(P<0.05),Homa-IS则显著高于模型组(P<0.05);中药组的CD4+表达显著低于模型组、CD56+、CD14+的表达显著高于模型组(P<0.05)。结论:T2DM大鼠模型存在着特异、非特异免疫细胞功能低下;超微粉化瓜蒌根通过调节淋巴细胞亚群比例分布及降糖、改善胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌功能,对T2DM大鼠具有免疫调节作用。

消渴康对DN大鼠肾功能及P38MAPK表达的影响

目的:观察消渴康对DN大鼠肾功能及P38MAPK表达的影响。方法:SD大鼠单侧肾切除后一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),诱发DN模型后,随机分为模型、氯沙坦和消渴康大、中、小治疗组,观察消渴康对DN大鼠肾功能和P38MAPK表达的影响。结果:消渴康对DN大鼠尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)均有明显的改善作用,并能显著降低P38MAPK的表达。结论:消渴康对延缓DN大鼠肾病进展有较好的防治作用。

解毒通络保肾胶囊对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的观察解毒通络保肾胶囊(保肾胶囊)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏的保护作用。方法雄性Wistar大鼠用高脂饲料喂饲加腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素制备T2DM模型。大鼠被随机分为5组:正常对照组(对照组)、高脂膳食组(高脂组)、未处理的糖尿病(DM)组(模型组)、保肾胶囊组(1.4 g/kg,灌胃)和罗格列酮(0.8 mg/kg)及联合贝那普利(2 mg/kg)组(阳性对照组)。处理12 w后测定血糖、血脂、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿微量清蛋白(UAlb)排泄量,光镜和电镜观察肾脏形态改变,免疫组化检查肾组织Ⅳ型胶原(ColⅣ)及纤连蛋白(FN)表达。结果保肾胶囊处理明显模型组大鼠血糖、血脂、Scr、BUN水平、UAlb排泄量及肾脏指数(P<0.01)。与模型组相比,保肾胶囊处理明显改善肾小球超微结构异常,肾组织ColⅣ及FN表达水平明显降低。结论保肾胶囊能减轻T2DM大鼠肾脏功能和形态损伤,显示出肾脏保护作用。

洛汀新对糖尿病大鼠血脂、一氧化氮、内皮素-1的影响

目的观察洛汀新治疗对糖尿病(DM)大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的影响。方法采用腹腔注射四氧嘧啶方法制备DM大鼠模型,然后经腹腔注射洛汀新,剂量为5mg/kg,1次/d,12w后取血测定TC、TG、NO和ET-1水平,并与正常对照组进行比较。结果DM组大鼠血浆的TC水平稍有增加,但与正常对照组相比较无显著性差异(90.3±27.8vs79.0±24.1mg/L,P>0.05),TG水平较正常对照组明显升高(306.0±56.8vs173.5±39.4mg/L,P<0.05),NO(135.3±32.8vs161.9±37.3μmol/L)和ET-1(268.4±39.0vs371.5±49.6pg/ml)浓度较正常对照组明显下降,二者间差异显著(P<0.05)。洛汀新治疗组大鼠的TG浓度较DM组大鼠明显降低(232.3±48.0vs306.0±56.8mg/L,P<0.05),治疗组大鼠的NO浓度明显高于DM组大鼠(151.9±42.4vs135.3±32.8μmol/L,P<0.05),与DM组大鼠相比较,治疗组大鼠的TC浓度(86.5±32.4vs90.3±27.8mg/L,P>0.05)和ET-1浓度(272.9±52.7vs268.4±39.0pg/ml,P>0.05)均无明显改变。结论DM大鼠的血浆TC浓度没有显著增高,但是TG浓度显著升高,同时NO、ET-1浓度显著降低。洛汀新治疗可降低DM大鼠血浆TG、NO浓度,但对TC、ET-1浓度无显著影响。

艾灸对糖尿病性ED大鼠血清AGEs影响的研究

目的研究艾灸对糖尿病(DM)性阴茎勃起功能障碍(ED)血糖及血清晚期糖基化终产物(AGEs)的影响。方法以链脲佐菌素(STZ)诱导DM大鼠模型,再以阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验筛选DM性ED大鼠模型,随机分为模型组、艾灸组,另设一正常对照组。艾灸组取肾俞、三阴交穴,以麦粒灸施治,观察艾灸对DM性ED大鼠血糖、血清AGEs的影响。结果艾灸能降低DM性ED大鼠血糖、血清AGEs水平。结论艾灸能改善DM性ED大鼠血糖及血清AGEs水平,可能是对DM性ED大鼠勃起功能治疗效应的作用机制之一。

黄芪对糖尿病大鼠血糖和血液流变学特性的影响

目的:研究中药黄芪对四氧嘧啶诱发的糖尿病(DM)大鼠血糖和血液流变学特性的影响。方法:腹腔注射四氧嘧啶制备DM大鼠模型。用黄芪煎剂对大鼠施行灌胃治疗,以甲苯磺丁脲(D860)为对照药,治疗7d后分别测定血糖以及高、低切变率下的全血粘度、血浆粘度和红细胞压积,并检测体外形成血栓的长度、湿重和干重以及血小板聚集率等指标。结果:DM大鼠模型复制后,大鼠的血糖水平以及上述指标均明显高于正常对照组(P<0.01),而黄芪治疗后,大鼠的上述指标均显著低于DM模型组(P<0.05～0.01)。结论:黄芪可降低DM大鼠的血糖,且明显改善DM大鼠的血液流变学特性,而D860只降低DM大鼠的血糖,对血液流变学特性的改善逊色于黄芪。

糖利平胶囊对2型糖尿病大鼠GLP-1的影响及机制研究

40只雄性SD大鼠采用高脂高糖饲料加小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射造模,观察糖利平胶囊对实验性T2DM大鼠血清GLP-1、胰岛素(INS)、胰高血糖素(Glucagon,Gg)的影响,以及对肝脏、胰腺、肠段GLP-1受体基因表达的影响。结果:1.模型大鼠,血糖和Gg水平明显升高,GLP-1和INS水平明显降低,经糖利平治疗后空腹GLP-1和INS水平有一定程度的增加,Gg水平降低,葡萄糖负荷后各个时间点的GLP-1和INS水平均较模型组增加,Gg水平较模型组降低,且各个时间点GLP-1与INS水平均呈正相关,GLP-1与Gg水平均呈负相关。2.通过实时定量PCR检测各组大鼠肝脏、肠段、胰腺组织的GLP-1受体表达水平均降低,治疗后表达有所上升,胰腺组织GLP-1受体表达明显上升。结论:糖利平胶囊通过提高血清GLP-1水平刺激胰岛细胞分泌胰岛素,抑制胰高血糖素分泌,与糖利平胶囊提高肝脏、肠段、胰腺组织GLP-1受体表达增加有关。

内源性CO和NO在糖尿病高血压发病中关系及作用

目的探讨内源性一氧化碳(CO)和一氧化氮(NO)在糖尿病(DM)大鼠高血压发病中的相互作用。方法监测DM大鼠动脉血压,测定下肢动脉环对苯肾上腺素(PE)累积收缩反应和对乙酰胆碱(ACh)累计舒张反应,检测血中CO和NO含量。结果DM大鼠出现低体重、高血压和高血糖,下肢动脉累积收缩和舒张反应明显降低,血中CO含量明显降低,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性和NO水平则明显上升;应用正铁血红素(He)可部分逆转DM高血压,明显改善下肢动脉的收缩反应和舒张反应,提高血中CO水平,同时抑制iNOS活性和NO合成。结论DM大鼠早期内源性CO合成减少和代偿性NO合成增加共同参与诱导下肢血管反应障碍,是引起DM高血压的重要机制之一。

知母醇提物药效学研究

目的:通过比较分析知母醇提物干预2型糖尿病大鼠(T2DM)的血糖、胰岛素水平及血脂等指标,评价知母醇提物的降糖等药效作用。方法:建立T2DM大鼠模型,知母醇提物等药物组干预T2DM大鼠,比较分析各组大鼠血糖、胰岛素、血脂等指标。结果:知母提取物可降低T2DM糖尿病大鼠的空腹血糖,改善其糖耐量异常情况及高血脂症状。结论:知母醇提物具有降血糖降血脂药效作用。

电针“胰俞”穴对2型糖尿病大鼠HPA轴相关激素的影响

目的：观察电针“胰俞”穴对2型糖尿病（T2DM）大鼠的干预效果，为针灸治疗糖尿病提供实验依据。方法：70只雄性Wistar清洁级大鼠中随机选取8只作为对照组，余制造T2DM模型，将造模成功的52只大鼠按随机区组原则分为模型组（10只）、药物组（10只）、电针肾俞组（11只）、电针脾俞组（10只）和电针胰俞组（11只）。于造模成功后第7天，模型组将大鼠固定于自制鼠袋中，不进行任何处理；药物组按大鼠体质量以格列美脲（10mL／kg）灌胃；各电针组分别取双侧“肾俞”、“脾俞”、“胰俞”穴电针治疗，选用连续波，频率15Hz，电流强度4～6mA。均20min／次，1次／日，5次／周，连续4周。于造模前及干预后连续4周，各组大鼠尾静脉采血，采用快速血糖仪法每周测量空腹血糖（FBG）；末次干预结束，处死大鼠取血，取下丘脑、垂体和肾上腺，采用比色法测定甘油三脂（TG）、胆回醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）和低密度脂蛋白（LDL-C）含量，放免法测定糖化血清蛋白（GSP）、胰岛素（FINS）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、垂体促肾上腺皮质激素（ACTH）和肾上腺皮质激素（CORT）含量。结果：干预4周后，除正常组大鼠体质量持续上升，模型组、药物组和各电针组大鼠体质量均显著减轻（P〈0．01，P〈0．05）；与模型组相比，电针脾俞组和电针胰俞组FBG明显降低（P〈0．05，P〈0．01），电针胰俞组FBG均明显低于药物组和电针肾俞组（均P〈0．05）；电针胰俞组血清中TG、HDL-C、LDL-C水平较模型组降低（P〈0．05，P〈0．01），TG水平均明显低于药物组和电针肾俞组（均P〈0．05，P〈0．01），LDL—C水平明显低于电针肾俞组（P〈0．05）；药物组、电针脾俞组和电针胰俞组胰岛素敏感性指数（ISI）较模型组明显升高（P〈0．05，P〈0．01），药物组ISI明显低于电针胰俞组（P〈0．05）；电针胰俞组CRH水平低于药物组和电针肾俞组（P〈0．05，P〈0．01），电针胰俞组CORT水平低于药物组和电针脾俞组（均P〈0．05）。结论；电针胰俞穴可能通过降低CORT的水平而改善T2DM大鼠胰岛素抵抗、提高其胰岛素敏感指数、调节其血脂代谢水平，并缓解下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的亢进。

他克莫司对2型糖尿病大鼠足细胞氧化应激的影响

糖尿病（DM）是影响人类健康的慢性疾病，大约有30％的DM会并发糖尿病肾病（DKD），最终出现终末期肾病。氧化应激在DKD的发病机制中起重要作用，其中由还原型尼克酰胺腺嘌呤核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶依赖的活性氧簇（ROS）产生增多引起的肾脏损伤，是DKD发展的重要原因。有研究表明免疫抑制剂他克莫司（FK506）可减少DM大鼠尿蛋白排泄，但其是否通过减轻足细胞氧化应激而起到保护作用，目前相关报道较少。

糖尿病大鼠尿液的UPLC/Q-TOF-MS代谢组学研究

目的：采用代谢组学方法分析正常 SD 大鼠及Ⅱ型糖尿病大鼠尿液，寻找与Ⅱ型糖尿病有关的大鼠尿液生物标记物。方法采用 ACQUITY 超高效液相色谱分析系统、Q - Tof micro 高分辨四级杆与飞行时间串联质谱仪代谢组学模式采集正常大鼠及Ⅱ型糖尿病大鼠尿液样品数据，应用 masslynx 4.1工作站、SIMCA -P11.5 DIMO 软件及多元统计方法对数据进行分析。结果从正常大鼠及Ⅱ型糖尿病大鼠模型组尿液样品中初步筛选出13个具有统计学意义的尿液生物标志物。结论正常大鼠尿样与Ⅱ型糖尿病大鼠尿样代谢差异有统计学意义。