中性磷类萃取去甲金霉素规律的研究

本文研究了中性磷酸酯萃取去甲金霉素的规律.考察了各种条件如 pH、时间、相比、浓度等对萃取的影响,选择出最佳萃取条件并对真实发酵滤液进行了模拟实验.提出了可供参考的工艺流程:使用80%TBP-煤油溶液,在平衡 pH5～6五级逆流萃取,总萃取率可达95%;使用盐酸反萃,保持反萃液 pH1～1.5,单级反萃率>85%.本文首次将一些高效萃取体系应用于去甲金霉素的提取分离,不仅对开发去甲金霉素提取新技术具有积极意义,而且对开展带有多功能基团生物大分子萃取化学的理论研究也有一定意义.

金霉素生物合成基因ctcK的研究

为检测ctcK基因的功能,利用基因工程技术在金色链霉菌J13(Streptomyces aureofaciens J13)上构建ctcK基因缺失工程菌SK12(ΔctcK),并分析了其次级代谢产物的变化.经质谱分析显示,工程菌SK12代谢物中检测到去甲基金霉素m/z=465.10[M+H]^+的分子离子峰,但未检测到金霉素m/z=479.12[M+H]^+的分子离子峰,这与出发菌J13代谢物的检测结果相反.结果表明,ctcK基因的失活阻断了金霉素的生物合成代谢流,使工程菌SK12主要积累去甲基金霉素,显示ctcK基因参与金霉素C-6位甲基化.本研究初步阐明了ctcK基因的功能,同时获得了一株主产去甲基金霉素的工程菌.