DMTU对激光视网膜损伤治疗作用的实验研究

二甲基硫脲 (DMTU)是一种特异的自由基清除剂 ,实验中 ,建立了动物视网膜激光损伤模型 ,观察了治疗组与对照组不同时间点视网膜的组织病理改变以及生化和分子生物学指标的变化。结果表明 ,DMTU可以有效地抑制感光细胞的脂质过氧化 ,能明显减少损伤区域视网膜神经元的凋亡数目 ,保护视网膜组织的结构和形态。

DMTU对大鼠SAP致肺损伤的保护作用

目的研究二甲基硫脲(dimethylthiourea,DMTU)对大鼠急性重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)肺损伤是否具有保护作用,为临床治疗SAP所致肺损伤提供新思路。方法将18只雄性Wistar大鼠随机分为治疗a组(注射DMTU a组)、对照a组(注射生理盐水a组)和假手术a组,每组6只。在存活实验中,将60只Wistar大鼠随机分为3组(治疗b组、对照b组和假手术b组)每组包括20只大鼠。应用逆行胰胆管穿刺注射牛黄胆酸钠制备SAP大鼠模型,造模成功后对治疗组大鼠腹腔注射DMTU(500 mg/kg体质量、150 mg/kg体质量,2次/d)。其余各组大鼠均腹腔注射生理盐水(1 ml/100 g体质量)。术后观察72 h后通过心脏放血处死大鼠,取走肺及胰腺组织。观察大鼠肺脏组织的髓过氧化酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)水平和组织学变化及DMTU对其的影响。在存活实验中,观察各组大鼠的存活情况。结果对照a组的MPO活性增强,MDA水平提高;DMTU可以明显降低肺组织的MPO活性和MDA水平,同时DMTU可以减轻大鼠肺组织的病理损害而没有改善胰腺组织的病理损害;术后72h内各时间点治疗b组的大鼠生存率均比对照b组高。结论各种炎症介质、细胞因子及氧自由基参与了SAP的病理生理过程。DMTU可直接降低SAP大鼠肺组织MPO活性和MDA水平而减轻组织脂质过氧化和肺组织病理损害,最终可以降低死亡率。

DMTU对香石竹切花花瓣水分胁迫的抗氧化效应

以香石竹切花马斯特品种为试材,以0、5 mmol/L、10 mmol/L三种浓度的二甲基硫脲(DMTU)作为瓶插液,对不同瓶插时期的香石竹切花花瓣细胞保护酶活性进行测定,以期从细胞膜保护酶水平上明确H2O2外源抑制剂DMTU改善香石竹切花应对水分胁迫能力的机理。实验结果显示:在瓶插前期用DMTU处理的超氧化物歧化酶(SOD)活性变化平稳,过氧化物酶(POD)活性显著高于对照,瓶插后期用DMTU处理的SOD活性、过氧化氢酶(CAT)活性均显著高于对照,POD活性低于对照,说明DMTU在瓶插早期主要对POD起到了保护作用,而瓶插后期主要对SOD和CAT起到了保护作用。对不同DMTU的浓度而言,浓度为10 mmol/L清除活性氧、维持保护酶活性的作用更强,但是10 mmol/L处理的瓶插寿命短于5 mmol/L处理,5 mmol/L处理的瓶插寿命长于对照,因此DMTU的处理浓度以5 mmol/L为宜。由此可见DMTU在香石竹切花衰老时可清除活性氧,提高保护酶活性,从而缓解水分胁迫带来的膜脂过氧化,延缓花瓣衰老进程,延长其瓶插寿命。

DMTU对瓶插月季花瓣中抗氧化酶和蔗糖代谢酶活性的影响

逆境胁迫可引起植物体内H2O2升高,研究发现5mmol/L的H2O2外源抑制剂二甲基硫脲(Dimethylthiourea,DMTU)可促进瓶插月季提早开放并显著增大了花朵直径。为明确DMTU如何通过影响瓶插月季花瓣生理变化进而提高其观赏价值的机理,对5mmol/L DMTU处理下月季切花萨曼莎(Smantha)不同时间花瓣中抗氧化酶活性、蔗糖含量和蔗糖代谢酶活性进行了测定。结果表明,在瓶插早期DMTU处理显著降低了抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化物酶(POD)活性,在后期显著降低了过氧化氢酶(CAT)活性,提高了谷胱甘肽还原酶(GR)活性,推测APX和POD在瓶插早期起主要清除H2O2的作用,CAT和GR在后期起主要作用;DMTU显著提高了瓶插后期花瓣中的蔗糖含量以及早期蔗糖合成酶(SS)和磷酸蔗糖合成酶(SPS)的活性,推测DMTU可能通过维持瓶插月季花瓣的渗透压,维护花瓣内生理活动的正常进行,进而提高其观赏价值。

一种过氧化氢清除剂对铜胁迫下黄瓜种子萌发的影响

二甲基硫脲(Dimethylthiourea,DMTU)是一种H2O2清除剂,为了探究DMTU对铜胁迫下黄瓜种子萌发的影响,以黄瓜种子“津瑞100”为材料,采用纸上发芽法,测定了0.5 mmol/L DMTU浸种处理对90 mg/L CuSO_(4)胁迫下黄瓜种子萌发及相关生理指标的影响。结果表明:在90 mg/L CuSO_(4)胁迫下,黄瓜种子的发芽势、发芽率和胚根长均受到抑制;经过0.5 mmol/L DMTU浸种后,黄瓜种子的发芽率和发芽势显著提高,促进了胚根生长;降低了种子H_(2)O_(2)含量和抗氧化酶(POD、APX)的活性,减轻了铜胁迫下对黄瓜种子萌发的影响。

过氧化氢清除剂对H_2O_2处理下中国石竹幼苗不同器官抗氧化系统的影响

以中国石竹为试材,采用25mmol·L^(-1)二甲基硫脲(dimethylthiourea,DMTU)和3mmol·L^(-1)二苯基氯化碘盐(diphenyleneiodonium chloride,DPI)对其幼苗预处理2h后再置于5mmol·L^(-1) H_2O_2中处理6h,测定DMTU和DPI预处理对H_2O_2处理下中国石竹幼苗不同器官的H_2O_2和O·2含量以及相关清除酶活性的方法,探究减少H_2O_2含量对氧化胁迫下石竹幼苗生理活性的影响,以期为石竹抗逆栽培提供理论依据。结果表明:25mmol·L^(-1) DMTU和3mmol·L^(-1) DPI预处理降低了正常条件下叶片和根的H_2O_2和O·2含量,且在根中达显著差异水平(P<0.5);5mmol·L^(-1)的外源H_2O_2处理显著增加了叶中H_2O_2含量和根中O·2含量(P<0.5),25mmol·L^(-1) DMTU和3mmol·L^(-1) DPI预处理则降低了5mmol·L^(-1) H_2O_2处理下叶片和根部的H_2O_2和O·2含量;5mmol·L^(-1)的外源H_2O_2处理显著增加了叶片SOD活性和根部SOD、APX活性(P<0.5),25mmol·L^(-1) DMTU和3mmol·L^(-1) DPI预处理降低了5mmol·L^(-1)H_2O_2处理下石竹叶中SOD、APX活性,且25mmol·L^(-1) DMTU预处理显著降低了根部的APX活性(P<0.5),表明降低H_2O_2和O·2含量可降低相应清除酶的活性。因此,外施DMTU和DPI能不同程度缓解H_2O_2处理导致的内源H_2O_2和O·2含量的积累,且25mmol·L^(-1) DMTU清除H_2O_2的效果比3mmol·L^(-1) DPI好。

柚皮素对炎症性气道黏液高分泌的作用

目的探讨柚皮素对炎性刺激时气道上皮细胞黏液高分泌的作用和相关的分子机制。方法通过人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)刺激人肺腺癌细胞A549,构建炎性刺激时气道黏液高分泌模型,分别以柚皮素和活性氧(ROS)清除剂DMTU进行干预,用活性氧试剂盒测定各组细胞中ROS的含量,观察黏蛋白(MUC)5AC、表皮细胞生长因子受体(EGFR)和磷酸化EGFR(P-EGFR)的表达。培养细胞经甲基偶氮唑盐法测定活性后分为对照组、HNE处理组、DMTU组、柚皮素组和柚皮素+DMTU组。逆转录PCR方法检测各组MUC5ACmRNA、EGFRmRNA的变化;Westernblot法检测EGFR和P-EGFR蛋白的表达;酶联免疫吸附测定法观察MUC5AC蛋白表达的变化,并用细胞免疫激光共聚焦显微镜观察柚皮素作用前后黏蛋白的分布。结果不同浓度的HNE处理A549后,细胞内ROS的含量逐渐增加,而柚皮素预处理组与50nmol/L的HNE刺激组相比细胞内ROS的含量明显减少(P<0.01);HNE处理组MUC5AC的mRNA和蛋白的吸光度面积积分值分别为(0.92±0.08)和(152±6)μg/mg,EGFRmRNA和蛋白的吸光度面积积分值分别为(0.91±0.05)和(0.86±0.03)μg/mg,均较对照组([0.70±0.02),(112±4)μg/mg和(0.73±0.10),(0.39±0.03)μg/mg]明显升高(P<0.05),P-EGFR和总EGFR蛋白表达均较对照组显著增加(P<0.01);给予柚皮素预处理后,与HNE刺激组相比,EGFR和P-EGFR表达下调;而柚皮素+DMTU组MUC5ACmRNA和MUC5AC的蛋白较单独DMTU处理组更为明显,其吸光度和面积积分值分别为(0.40±0.03)和(113±2)μg/mg(P<0.01),差异均有统计学意义。结论HNE可刺激气道上皮细胞产生大量ROS,柚皮素可抑制ROS的产生、下调ROS诱导的EGFR表达水平、并部分阻断EGFR磷酸化,从而抑制炎性刺激时气道黏液高分泌的形成。

内源H_2O_2对水稻种子萌发的影响

通过用不同浓度的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADPH)合成酶抑制剂碘二苯(diphenylene iodonium, DPI)及过氧化氢(hydrogen peroxide, H_2O_2)清除剂二甲基硫脲(dimethylthiourea,DMTU)分别培养水稻(Oryza sativa L.)种子,研究内源H_2O_2对种子萌发过程胚根、胚芽和胚根根尖活力等的影响。结果表明,DPI及DMTU培养的水稻种子其胚根生长和胚芽生长均受到抑制,尤其是DPI对胚根生长的抑制作用更为显著。DPI和DMTU对水稻种子萌发的影响均呈现出浓度效应,即浓度越高,抑制作用越强。其中,DPI对水稻种子萌发的抑制作用比DMTU的更为明显。此外,胚根根尖的超氧阴离子(superoxideanion,O_2?)和H_2O_2含量随DMTU浓度增大而减少,根尖细胞受损也越严重。由此推测,内源H_2O_2可能参与调控水稻种子萌发过程。

二甲基硫脲对大鼠视网膜光损伤MDA水平的影响

目的通过检测二甲基硫脲(dimethylthiourea DMTU)对大鼠视网膜光损伤后丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平的影响。方法 40只大鼠随机分成对照组及实验组,光照前24 h 及光照开始前,实验组大鼠沿耳缘静脉各注射 DMTU 500 mg/kg(溶于生理盐水),对照组大鼠沿耳缘静脉各注射等量生理盐水,两组中的30只大鼠经手术显微镜灯泡连续照射1 h,于光照前及光照后3个时间点急性处死大鼠,进行视网膜MDA 含量检测。结果光照后两组间同一时间点比较,实验组较对照组 MDA 含量低,差异有显著意义(P<0.01)。结论 DMTU 能够降低 MDA 含量,对视网膜起防护作用。