乙型肝炎低表面抗原患者乙肝病毒血清学标志物与乙肝病毒前基因组RNA的相关性分析

目的研究血清乙肝病毒前基因组RNA(HBV pgRNA)检测结果与慢性乙型肝炎(CHB)低表面抗原患者不同乙肝病毒的血清学指标之间的相关性。方法收集福建医科大学孟超肝胆医院慢性乙型肝炎低表面抗原患者共计148例纳入研究。临床样本进行HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBV DNA、HBV pgRNA的测定,检测数据采用多因素logistic回归分析、分层分析以及HBsAg、HBsAb(ROC曲线)评价血清HBV pgRNA的预测价值。结果血清HBsAg滴度对HBV pgRNA的影响具有统计学意义(P<0.05),而年龄、性别、HBsAb、HBeAg、HBV DNA与HBV pgRNA的关系无统计学意义。HBeAg阴性患者中,HBsAg滴度对HBV pgRNA的影响有统计学意义(P<0.05);HBeAg阳性患者中,HBsAg.HBsAb对HBV pgRNA的影响无统计学意义(P>0.05)。HBsAg曲线下面积为0.934,有统计学意义(P<0.001),HBsAg大于0.5,pgRNA是阳性的;HBsAb曲线下面积为0.874,有统计学意义(P<0.001),HBsAb大于1.44,pgRNA低于检测下限。结论慢性乙型肝炎低表面抗原患者在接受抗病毒治疗过程中,临床指标如血清HBsAg滴度及HBV pgRNA滴度对病情的转归有较好的预测价值。HBsAg和HBV pgRNA滴度越低,HBsAb滴度越高,预示病情稳定、不易复发。

乙肝病毒对DNA修复基因和肝癌发生的作用

目的 以HBV转基因动物模型研究乙型肝炎病毒 (HBV) ,黄曲霉毒素 (AFB1) ,DNA修复基因和肝细胞肝癌 (HCC)发生的关系。方法 对HBVx基因转基因小鼠以相同的方式和剂量给予黄曲霉毒素 (AFB1)攻击 ,比较肝癌的发生率 ;同时用逆转录———热标记扩增 (RT -HOT -PCR)的方法 ,检查HBVx基因转基因小鼠HBVx整合阳性和阴性以及AFB1攻击后 ,癌组织与癌旁组织的DNA修复基因Brca2和Nthl1的RNA表达水平。结果 (1)黄曲霉毒素诱导 ,5 2周肝癌发生率HBVx整合阳性小鼠 2 9只 ,14只发生肝癌 (48.3% ) ;HBVx整合阴性小鼠 15只 ,3只发生肝癌 (2 0 .0 % )。两者有显著的差异 (P <0 .0 1)。(2 )HBVx整合阳性小鼠的肝组织DNA修复基因Brca2和Nthl1的RNA表达水平都低于HBVx整合阴性小鼠。经AFB1攻击形成的肝癌和癌旁组织 ,其DNA修复基因Brca2和Nthl1的RNA表达水平也低于HBVx整合阴性小鼠。结论 结果表明HBVx在宿主细胞的整合 ,影响了宿主DNA修复能力 ,从而导致宿主对致癌物质的敏感性增加 ,最终引起肝癌发生率的增加。

乙肝病毒感染导致Mrell下调及基因组断裂

【目的】乙肝病毒的持续感染与肝细胞癌的发生密切相关。本文探讨了乙肝病毒感染后导致宿主蛋白Mre11的变化,并研究这种蛋白的变化可能导致肝癌发生的机制。【方法】本文通过Western blot检测了乙肝病毒感染HL7702细胞及肝癌组织标本的Mre11蛋白的变化,并且通过RNA干涉的方法干扰了Mre11的表达,用连接介导PCR检测基因组的变化。【结果】本研究发现乙肝病毒感染细胞导致Mre11表达下调,肝癌组织也可以发现Mre11表达下调;下调Mre11表达可以导致细胞基因组的断裂增多。【结论】HBV感染导致Mre11表达下调导致基因组不稳定,这可能与HBV感染导致细胞恶性转化相关。

HBV DNA与乙肝五项定量在不同年龄段乙肝病毒感染患者病情进展中的意义

目的探讨乙肝病毒(HBV)DNA与乙肝五项定量[包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]在HBV感染进程中各个阶段的差异,从而为慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化、肝癌不同阶段的诊治提供参考依据。方法选择2020年1月至2021年12月收治的295例HBV感染患者为研究对象,根据年龄将其分为青年组(≤45岁,105例)、中年组(46~59岁,128例)和老年组(≥60岁,62例)。比较三组慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化、肝癌患者的HBV DNA及乙肝五项定量。结果三组慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和肝癌患者的年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。青年组和中年组中,慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和肝癌患者的HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05);慢性乙型肝炎患者的HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平明显高于乙肝肝硬化和肝癌患者(P<0.05)。老年组中,慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和肝癌患者的HBV DNA、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论青中年患者中,随着慢性乙型肝炎向乙肝肝硬化、肝癌的病程进展,HBV DNA、HBsAg、HBeAg水平均呈现下降趋势,监测相关指标趋势对于提示疾病发展具有一定意义。

乙肝病毒全长基因组真核表达载体构建

目的构建乙肝病毒全长基因组真核表达载体。方法PCR一步法扩增乙肝病毒全长基因组;乙肝病毒基因组和真核表达载体pcDNA3.1(+)经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切,连接并转化大肠杆菌DH5α。结果PCR、酶切和测序表明乙肝病毒全长基因组成功插入真核表达载体pcDNA3.1(+)。结论成功构建乙肝病毒全长基因组真核表达载体。

乙肝病毒诱导肝癌发生的基因组稳定性机制

0引言原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是全球高发的恶性肿瘤之一,死亡率高。我国是HCC的高发国家,乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus,HBV）感染是其首要原因,其重要机制之一是病毒基因组能够整合到宿主细胞的DNA中造成DNA损伤,并影响受损DNA的修复,

乙肝病毒DNA、甲胎蛋白在CHB患者中的表达水平与病情及肝纤维化的关系

目的探讨乙肝病毒DNA(HBV DNA)、甲胎蛋白(AFP)在CHB患者中的表达水平与病情及肝纤维化的关系。方法选取120例CHB患者为对象,按照病情程度分为轻度组(n=23)、中度组(n=48)、重度组(n=36)、肝衰竭组(n=13);按照肝纤维化程度分为S0~S1组(n=21)、S2组(n=41)、S3组(n=42)、S4组(n=16)。以40例健康体检者为对照组。采用荧光定量PCR检测HBV DNA水平,采用化学发光法检测AFP水平,分析二者与CHB严重程度及肝纤维化的关系。结果CHB组HBV DNA及AFP高于对照组(P<0.05);AFP在CHB轻度组、中度组、重度组、肝衰竭组依次升高(P<0.05)。HBV DNA及AFP在对照组、S0~S1组、S2组、S3组、S4组依次升高(P<0.05)。相关性分析显示,HBV DNA与CHB纤维化程度正相关,AFP与CHB病情及纤维化程度均呈正相关(P<0.05)。HBV DNA、AFP联合检测诊断重度肝纤维化的AUC分别为0.800(95%CI:0.829~0.939)、0.846(95%CI:0.788~0.905)、0.884(95%CI:0.733~0.867)。结论HBV DNA及AFP在CHB患者中表达升高,AFP与CHB的严重程度及肝纤维化程度正相关,HBV DNA与肝纤维化程度正相关,检测二者有助于肝纤维程度的早期诊断。

实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA的价值评价

进一步针对实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA的价值进行评价。方法 本次研究中选择2022年2月~2023年2月期间临床收治乙肝患者共计349例作为研究对象,选用实时荧光定量PCR方法对患者乙肝病毒DNA进行定量检测。对检测结果进行分析。结果 大三阳模式HBsAg(+)、HbeAg(+)、HbcAb(+)对应HBV-DBA阳性检出率为95.83%(115/120),(5)模式HBsAg(+)、HbeAg(+)对应HBV-DAN阳性检出率为86.96%(20/23),显著高于其他模式阳性检出率,组间对比差异显著,P<0.05,差异有统计学意义。大三阳模式HBsAg(+)、HbeAg(+)、HbcAb(+)对应HBV-DNA水平为(1.02*106±0.58*105)IU/ml显著高于其他模式检出水平,组间对比差异显著,P<0.05,差异有统计学意义。结论 在对乙肝患者进行临床诊断检测期间,采用实时荧光定量PCR法对乙肝患者HBV-DNA进行检测有确切的临床应用价值,HBV-DNA阳性检出率高,且在HBV-DNA含量分布上存在一定差异,可对乙肝疾病的早期诊断治疗产生积极指导意义,值得在临床实践中推广应用。

荧光定量(PCR)用于乙肝病毒DNA检测的诊断价值

分析荧光定量(PCR)应用于乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测与乙肝病毒标志物(乙肝两对半)化学发光法检测的诊断价值。方法 回顾性分析100例2023年3月至2023年8月我院就诊的乙型肝炎患者HBV-DNA和乙肝两对半结果。乙肝两对半定性检测(血清乙型肝炎病毒标志物)采用磁微粒化学发光法。HBV-DNA则采用荧光定量PCR检测;对两种检测结果进行分析。结果 1(+)、3(+)、5(+)模式(HBsAg、HBeAg、HBcAb同时阳性,即“大三阳”)、1(+)、4(+)、5(+)模式(HBsAg、HBeAb、HBcAb同时阳性,即“小三阳”)分别为30例、39例,占比分别为30.0%、39%。将HBV-DNA表达水平>1*102copies/ml判断为阳性;HBV-DNA定量检测结果显示,全部100例患者中,HBV-DNA检测阳性的患者共有56例,阳性率为56.0%(56/100)。在HBV-DNA阳性率方面,和其他模式相比较,3(+)模式及1(+)、3(+)、5(+)模式均更高(P<0.05),分别为100.0%与96.67%;而在HBV-DNA水平方面,和其他模式相比较,1(+)、3(+)、5(+)模式则更高(P<0.05)。结论 联合HBV-DNA定量检测与乙肝两对半定性检测,能为乙型肝炎的早期诊断及临床用药提供参考。

乙肝病毒DNA定量检测与免疫学标志物检测的比较研究

对比分析乙肝病毒DNA(HBV-DNA)定量检测与免疫学标志物检测的检测效果。采用随机数字表法从贵州省惠水县人民医院2021年5月—2022年4月收治的乙肝患者中抽取120例进行研究,患者均接受HBV-DNA定量检测和免疫学标志物检测,根据检测结果将患者分为其他模型组(40例)、小三阳组(40例)、大三阳组(40例)。结果显示,HBV-DNA定量检测:大三阳组高于小三阳组、其他模型组,小三阳组高于其他模型组,组间数据差异具有统计学意义(P<0.05);HBV-DNA检测与免疫学标志物检测阳性率对比:HBV-DNA阳性标本中,HBsAg检出率为96.55%(56/58),HBeAg检出率为48.28%(28/58)。研究发现,临床诊断乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染时可采用HBV-DNA定量检测与免疫学标志物检测,这两种检测方式联合检测对于乙肝患者的临床诊治和预后诊断具有重要的参考价值。

乙肝病毒基因组中U5序列在乙肝患者垂直传递中的分析研究(英文)

目的研究乙肝病毒在乙肝患者垂直传递中的情况。方法运用分子遗传学的技术方法:单核苷酸多态性(SNP)及多聚酶链反应-单链构相多态性(PCR-SSCP),对30个家庭(68个病例)的乙肝患者及其子女进行了研究。结果在乙肝患者及其受感染后出生子女中游离型及整合型乙肝病毒持续增高,与感染前所生子女间比较差异显著(P<0.05),SNP分析结果显示在乙肝病毒基因组中,U5序列和非U5序列中许多基因位点发生了碱基替换,插入或缺失,男性乙肝患者及其受感染子女的SNP分析结果被确定。结论乙肝病毒可通过男性患者传递至子女;至此,又一个分子遗传学证据证实了了乙肝病毒的遗传性传递。

乙肝病毒DNA与乙肝两对半血清学检测结果分析探讨

通过实验分析乙肝病毒DNA与乙肝两对半血清学检测存在的相关性,并就此探讨如何更好地诊断乙肝和为治疗方案提供更好的依据。方法:选取在我院2023年1月~2023年12月期间疑似为HBV感染的患者150例,采用真空静脉采血法,采集患者空腹不抗凝静脉血标本5ml,并进行血清分离,并对比检测结果。结果:在两对半血清检测结果中,大三阳患者55例,小三阳82例,其他13例,并且大三阳乙肝患者HBV-DNA水平、阳性率高于小三阳及其他患者(P<0.05)。结论:在临床诊断和治疗过程中,需要结合两种检测方法的结果,综合分析患者的感染状态和病情发展情况。

广西乙肝病毒/黄曲霉毒素B_1双暴露相关性肝细胞癌微阵列比较基因组学和定量蛋白质组学研究

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是世界上最常见的恶性肿瘤之一。流行病学研究显示，多种遗传学因素与环境致病因素均可导致HCC的发生，并有地域的差异性。例如在日本及欧美国家，70%以上的HCC发生与慢性丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）感染和高摄入酒精有关；在我国，特别是广西地区，大约80%以上的HCC与该地区慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus， HBV）的高感染率以及黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）的高暴露密切相关。

化学发光法与乙肝病毒DNA荧光定量在乙肝检测中的应用价值

探究化学发光法与乙肝病毒DNA荧光定量在乙肝检测中的应用价值。方法 从我院2022.5-2023.5收治的乙肝患者中随机选取其中的100例作为本次实验的研究对象,所有被确诊乙肝患者均需要抽血进行化学发光法检测、乙肝病毒DNA荧光定量检测,分别在每一次检查后记录相关检测结果并对其进行回顾性分析。结果 相较于单用化学发光法组检测结果而言,化学发光法与乙肝病毒DNA荧光定量联合组下HBcAb阳性率较高(66.00%对70.005),HBeAg阳性率相同(42.00%对42.00%,但两者无统计学意义(P>0.05);HBeAb、HBsAb以及HBsAg阳性率较高(30.00%对44.00%、12.00%对24.00%、50.00%对64.00%)(P<0.05)。结论 两种检测方法均能够有较高的准确性,但是若是将化学发光法与乙肝病毒DNA荧光定量联合检测,其准确率可提升,更有利于动态检测机体乙肝情况。

重组乙肝病毒核心基因DNA与表面抗原-抗体共免疫应答研究

目的:了解小鼠对乙肝病毒核心抗原(HBcAg)基因免疫及与乙肝表面抗原-抗体复合物(HBsAg-抗HBs)联合免疫的应答。方法:用表达乙肝病毒核心抗原N端144个氨基酸的重组质粒DNA(简称pHBc144)100μg及含1μgHBsAg的重组乙肝表面抗原-鼠抗体组建的复合物(简称sIC)免疫Balb/c小鼠。用ELISA法检测血清抗体IgG和IgG1、IgG2a亚类的效价。用半定量PCR法分别检测鼠脾细胞IFN-γ及IL-4的mRNA。结果:pHBc144及sIC联合免疫鼠的抗HBs IgG、IgG1、IgG2a效价均显著高于sIC组(P＜0．05)。同时小鼠还可产生抗HBc及由HBsAg、HBcAg特异诱生的IFN-γ及IL-4。但与sIC共免疫,小鼠对HBcAg诱生的IFN-γ mRNA有所降低。结论:可用HBcAg基因与sIC共免疫,以获得针对乙肝病毒2种结构蛋白的免疫应答。

乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

目的 探讨荧光定量PCR法检测的乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物之间的关系。方法 3 62例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBVDNA的检测 ,按照不同的乙肝病毒标志阳性情况分组后 ,进行乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物的分析研究。结果 乙肝病毒标志物HBsAgHBeAgHBcAb阳性组HBVDNA阳性率 97.7% ,拷贝数在 10 4 ～ 10 8之间 ;HBsAgHBeAbHBcAb阳性组阳性率 5 6% ,拷贝数在 10 2 ～ 10 7之间 ;HBsAgHBcAb阳性组阳性率 5 4% ,拷贝数在 10 2 ～ 10 7之间 ;HBsAgHBeAg组阳性率 10 0 % ,拷贝数在 10 7之间 ;HBeAbHBcAb组 3例 ,有 1例阳性 ,拷贝数 10 2 ;HBsAb组阳性率 14 .3 % ,拷贝数在 10 3 ～ 10 7之间 ;189例全阴性有 2例阳性 ( 1.0 6% ) ,拷贝数在 10 4 ～ 10 5之间。结论 HBVDNA在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出 ,但检出率相差甚大 ,从 1.0 6%～ 10 0 % ;HBVDNA乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBVDNA阳性率及拷贝数较高 ;HBsAg及其抗体阳性者仍可检出HBVDNA ,说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断病人是否具有传染性是不够的。

5600例血清标本乙肝病毒DNA定量与免疫学标志物检测的对比分析

目的探讨乙肝病毒(HBV)感染血清学标志物常见模式与HBVDNA拷贝数之间的相关关系。方法对5600例血清标本进行HBVDNA荧光定量测定(FQ-PCR)和乙肝病毒感染血清学标志物(HBVm)测定。结果在2010例大三阳(即HBsAg、HBeAg、抗HBc均阳性)的标本中,检出HBVDNA阳性者有1796例,平均拷贝数为3.73×107/mL;在1790例小三阳(即HBsAg、抗HBe、抗HBc均阳性)的标本中,HBVDNA阳性者为301例,平均拷贝数为1.21×106/mL;在793例HBsAg、HBcAb阳性的标本中,HBVDNA阳性235例,平均拷贝数6.27×106/mL;而在278例HBVm全阴性的标本中,仍有3例检出HBVDNA阳性,平均拷贝数为1.63×104/mL。结论在各种HBVm模式中,以HBeAg阳性者的病毒复制水平最高;在HBsAg、抗-HBc阳性的血清中存在中等水平的HBV复制;而血清中未检出HBVm者并不能排除HBV感染。

乙肝病毒外膜大蛋白检测对于判定HBV DNA复制的意义

目的:通过检测患者血清乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)、HBV DNA以及乙肝病毒标志物(HBV M),探讨HBV-LP对于反映体内乙肝病毒复制的意义．方法:采用荧光定量PCR方法对254份HBV 感染血清的HBV DNA进行检测,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法对HBV-LP、 Pre-S1蛋白及HBV M进行检测．结果:大蛋白的检出结果与HBV DNA的检出结果无明显差异．不同HBV M模式的HBV DNA与HBV-LP的检出结果均无显著性差异． HBV DNA拷贝数的对数值与HBV-LP表达具有相关关系(r=0．945,P<0．001),HBV DNA拷贝数的对数值变化的89%可以用HBV-LP A值为解释变量的线性回归模型来解释．结论:HBV-LP能够反应HBV的复制情况,血清中HBV-LP的含量与HBV DNA的拷贝数具有较好的相关性．

乙肝病毒对人精液参数和精子DNA完整性的影响

目的:探讨精液中乙肝病毒存在对精液参数和精子DNA完整性的影响。方法:采用实时荧光定量PCR技术对153例血清乙肝表面抗原阳性患者精液进行乙肝DNA定量检测,采用精子染色质扩散法检测精子DNA损伤指数(DFI),对比分析精液HBV DNA阳性组(A组,n=43)与阴性组(B组,n=110)精液参数包括精液体积、精子浓度、存活率、前向运动精子百分率、平均直线速率(VSL)、平均路径速率(WAP)结果,以及HBV DNA拷贝数与精子DNA损伤指数的关系。结果:乙肝感染者精液HBV DNA检出率为28.1%(43/153);两组年龄、精液体积、精子浓度无统计学差异(P>0.05),A组精子存活率显著低于B组[(51.4±17.1)%vs(58.0±18.8)%,P>0.05],前向运动精子率显著低于B组[(24.5±10.1)%vs(29.6±13.3)%,P>0.05],VSL显著低于B组[(19.9±4.5)μm/s vs(23.7±4.0)μm/s,P<0.01],WAP显著低于B组[(23.4±5.3)μm/s vs(26.5±7.0)μm/s,P<0.01];A组精子DNA碎片指数显著高于B组[(24.2±9.4)%vs(19.3±8.0)%,P<0.01];精液中HBV DNA拷贝数与精子DNA碎片指数呈正相关(r=0.819,P<0.01)。结论:精液中HBV DNA存在对精子数量尚未构成显著影响,但可能改变一些精液参数,包括精子活力和运动速度以及精子DNA完整性,精液中乙肝病毒载量和精子DNA损伤之间呈现病毒载量-效应关系。