500例良恶性肿瘤ICM-DNA分析研究

目的：观察各种恶性肿瘤及相应良性病变中 Ｄ Ｎ Ａ 含量及倍体的变化，分析其对诊断、分级和预后判断的价值。方法：利用 Ｄ Ｉ Ｐ Ａ Ｓ２００ 生物图像处理分析系统，对常见恶性肿瘤及其良性病变共５００ 例作 Ｉ Ｃ Ｍ Ｄ Ｎ Ａ 分析研究。结果：（１） 宫颈鳞癌、卵巢常见恶性肿瘤（ 浆液性及粘液性囊腺癌） 、滤泡性淋巴瘤的 Ｄ Ｎ Ａ 含量和超二倍体率均显著高于相应起源组织或良性肿瘤；（２） 结直肠高分化腺癌与良性病变之间、各种类型甲状腺癌与正常甲状腺滤泡上皮和良性肿瘤之间的 Ｄ Ｎ Ａ 含量和倍体无显著差异；（３） 乳腺浸润性导管癌、宫颈鳞癌、结直肠腺癌的分化程度越低， Ｄ Ｎ Ａ 含量均越高，超二倍体率也越高。结论： Ｉ Ｃ Ｍ Ｄ Ｎ Ａ 检测能在定量水平分析肿瘤，可有助于良恶性肿瘤的鉴别，特别是对一些交界性肿瘤和临床疑难病例的诊断可提供有价值的参考指标， Ｄ Ｎ Ａ 含量和 Ｄ Ｎ Ａ 倍体特征与某些恶性肿瘤的分化状态有关。

探讨全自动DNA-ICM对浆膜腔积液细胞学的辅助诊断价值

目的浆膜腔积液细胞学诊断常遇到异常细胞数量少或细胞形态不典型的病例,导致诊断困难。本研究探讨DNA-ICM对浆膜腔积液细胞学辅助诊断的作用。方法选取浆膜腔积液200例,液基制片剩余标本进行DNA-ICM分析,并与细胞学和临床资料对比分析。结果 DNA-ICM制片满意标本167例,有明确诊断的143例(恶性肿瘤126例,良性病变17例)纳入检测。细胞学和DNA-ICM的敏感性分别为73%和46%(P=0.0001),特异性均为100%。细胞学诊断可疑癌的14例恶性病例中,1例DNA-ICM阳性。结论在浆膜腔积液诊断中,DNA-ICM的敏感性低于细胞学,但该方法特异性好,对细胞学诊断不明确的病例可能有辅助诊断作用。

探讨全自动DNA-ICM对腹盆腔冲洗液细胞学的辅助诊断作用

目的探讨全自动DNA-ICM对腹盆腔冲洗液细胞学的辅助诊断作用。方法连续收集腹盆腔术中冲洗液细胞学光镜诊断后剩余标本进行DNA-ICM检测,以术后病理结合光镜下细胞形态诊断作为金标准,评价DNA-ICM的临床应用价值。结果 83例标本中72例DNA-ICM制片扫描结果满意纳入研究。术后证实恶性冲洗液16例,其中细胞学阳性12例,DNA-ICM阳性5例,细胞学和DNA-ICM共同诊断3例,2例为细胞学阴性但DNA-ICM阳性。在病理未证实恶性的冲洗液中,DNA-ICM检测阳性4例,其中2例术后病理证实有恶性肿瘤但无腹腔转移,1例有癌手术史,但本次术后病理未见癌,1例为交界性肿瘤。细胞学和DNA-ICM检测的敏感性分别为75%(12/16)和31.3%(5/16)。术后病理良性肿瘤或病变中细胞学和DNA倍体分析均未见阳性。结论冲洗液中DNA-ICM检测的敏感性不高,不能取代细胞学,但对细胞学诊断有一定的辅助作用。

对正常及大细胞性改变的肝细胞、肝癌和癌旁改变肝细胞ICM-DNA定量研究

目的 探索正常肝细胞、大细胞性改变肝细胞、肝癌和癌旁改变肝细胞的DNA含量和形态特点。方法 采用DNA组织化学染色和图像细胞分析术。结果 10例癌旁改变(PC)组DNA指数(1.99±0.34)分别高于4例正常肝细胞(NH)组(0.98±0.12)和8例肝细胞的大细胞性改变(LCC)组(1.46±0.19)(P<0.01),DNA倍体分布与NH、LCC和肝细胞癌(HCC)组存在差异(P<0.05),核面积和核周长(74.0±52.3,63.9±33.9)低于26例HCC组(95.6±95.2,76.3±62.9)(P<0.01)。PC组中80%(8/10)为非整倍体DNA直方图表型,高于HCC组的53%(14/26),而多倍体占20%(2/10)低于HCC组26.92%(7/26)(P<0.05)。PC肝细胞核异型,核质浓缩,胞质嗜酸性或嗜碱性与HCC有过渡,置换性生长方式又与HCC相同。结论 呈片块状分布或腺瘤样排列的PC肝细胞,其异常DI、非整倍体分布和DNA直方图表型应作为癌前状态。

ICM-DNA定量检测在鉴别良恶性肿瘤诊断中应用

目的 探索ICM -DNA定量检测在鉴别良恶性肿瘤诊断中的应用。方法 对 12 1例原先不提供临床病史和病理检查结果的组织切片作改良的DNA染色和ICM -DNA定量检测。结果 (1) 36例无ICM -DNA定量恶性指数的病例中 ,与原先临床及病理结果有 34例相吻合 ,其DNA指数 (DI) 0 .72 - 1.10 ,中位数DI 1.0 ,2倍体 (C)、3- 4C和≥ 5C细胞所占中位数百分比分别为 71.33%、2 6 .2 1%和 0 .98%。 (2 ) 85例有恶性指数与原先临床及病理结果完全一致 ,其DI自 1.2 - 2 .72 ,中位数DI 1.33,2C、3- 4C和 5C细胞所占的中位数百分比分别为 2 9.4 1%、6 2 .6 2 %和4 .76 %。 (3) 85例恶性组的DNA直方图表型为 :近二倍体肿瘤占 14.12 % (12 /85) ,近四倍体肿瘤占 2 .35% (2 /85) ,多倍体肿瘤占 5.88% (5/85)和非整倍体肿瘤 77.6 5% (6 6 /85)。近二倍体肿瘤多为黏膜相关淋巴瘤、高分化癌和低度恶性软组织肉瘤。结论 ICM -DNA定量分析中DI值、倍体分布、异倍体的比例和DNA直方图表型不仅是判别良恶性肿瘤的重要依据 ,而且正确运用内参和外参照校正ICM检测基准 ,合理的定标更是ICM -DNA定量鉴别良恶性肿瘤的关键。

细胞DNA图像自动扫描与分析(DNA-ICM)技术在胸科恶性肿瘤诊断中的应用

目的通过对DNA图像分析(DNA image cytometry,DNA-ICM)技术在胸科恶性肿瘤病变诊断应用的研究,寻找该技术在相关病变诊断方面潜在的优势。方法选取安徽省胸科医院2015年5月~2017年5月间送检的4 402例胸科疾病患者,选取其中701例符合要求的标本进行DNA-ICM计算机扫描与自动分析,根据分析结果区分阳性、可疑、阴性诊断,与活检结果及临床基线数据进行对比分析。结果明确恶性肿瘤病变患者的细胞倍体出现异常者可达65%,未明确诊断恶性肿瘤但提示有恶性可能的患者细胞倍体异常率为64%,而在非恶性肿瘤病变患者中则仅为8%。综合评估显示,细胞DNA倍体诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为73%、93%、71%、94%。OR分析发现恶性肿瘤病变比非恶性肿瘤病变引起倍体异常的风险比是23.236。结论 DNA-ICM技术对于胸科常见恶性肿瘤诊断有重要的临床应用价值。

EZH2、GLUT-1联合DNA-ICM检测在胸腔积液中鉴别良恶性间皮病变的价值

目的探讨免疫细胞化学技术检测EZH2、GLUT-1联合细胞DNA定量分析(DNA image cytometry,DNA-ICM)在胸腔积液内间皮性病变诊断的临床价值。方法收集胸腔积液病例共50例,其中MM 30例,RMH 20例,行细胞块联合免疫细胞化学技术检测EZH2及GLUT-1的表达情况,以活检结果为对照,探讨本组抗体在胸腔积液中鉴别MM及RMH的意义,同时行Feulgen染色并DNA-ICM检测,比较免疫细胞化学技术、DNA-ICM及联合检测,诊断MM的灵敏度及特异度。结果1)联合检测EZH2、GLUT-1,对MM诊断的灵敏度为93%,特异度为86%,与单个抗体比较差异有统计学意义(P<0.05);2)联合应用免疫细胞化学技术及细胞DNA-ICM敏感度为97%,显著高于单一方法检测的灵敏度(P<0.05),特异度为75%,与单一方法比较没有统计学意义(P>0.05)。结论联合检测EZH2与GLUT-1,可作为胸腔积液内MM与RMH敏感性较强的鉴别诊断指标;结合细胞DNA-ICM技术能进一步提高二者鉴别诊断的灵敏度。

ICM细胞DNA图像定量分析技术

本文对ＩＣＭ细胞ＤＮＡ图像定量测量分析技术进行了分析讨论。该技术既不同于显微分光光度术（ＭＳＰ），也不同于流式细胞光度术（ＦＣＭ）。其方法是将医学病理上常用的细胞切片、印片或涂片，经福尔马林、甲醇和冰醋酸混合固定剂固定后用Ｆｅｕｌｇｅｎ染色，利用高精度图像采集系统将细胞ＤＮＡ的显微数字化灰度图像摄入计算机，通过图像处理分析技术对该细胞ＤＮＡ图像进行定量分析计算，并给出被测细胞ＤＮＡ的质量、倍体分布及细胞周期等参数。ＩＣＭ技术方法简便、实用而且准确度高，对人体及其它动物肿瘤或癌症的早期病理分析和诊断研究具有重大参考意义。

运用原位末端标记和ICM—DNA定量检测重型肝炎中Ⅲ型细胞死亡

目的 探索Ⅲ型细胞死亡在重型肝炎中生物学特性和形态学特征及其发病中的意义。 方法用ICM-末端标记(ISEL)、ICM-DNA定量并结合形态学方法,观察17例重型肝炎中细胞死亡。 结果 ①Ⅲ型细胞的ISEL标记阳性,在急性和亚急性重型肝炎中的阳性率为(15±7)个/hpf,高于I型细胞的(5±3)个/hpr(P<0.05),而且无核周空晕,无凋亡小体形成,多分布于大片或亚大片坏死区和坏死边缘区,形态上与Ⅱ型细胞有过渡。②原位DNA定量I型、Ⅲ型细胞中亚2C细胞的百分率分别65％和46％,高于残存肝细胞的11％,(P<0.01～0.05),I型和Ⅱ型细胞中的亚2C分别为65％和29％,也存在差异(P<0.05);I型和Ⅲ型细胞核面积分别为22.09和25.11μm^2,均低于残存肝细胞的59.91μm^2(P<0.05)。③光镜下形态学观察表明:Ⅲ型细胞核染色质边聚,细胞体积缩小等有I型细胞特征,胞浆丰富,胞膜边界不清,又有Ⅱ型细胞特征。结论 Ⅲ型细胞死亡与凋亡和坏死相关,是在重型肝炎坏死区中出现的一种特殊类型的细胞死亡。

宫颈液基细胞学与DNA倍体分析诊断宫颈鳞状上皮内病变的准确性

目的探讨用DNA倍体分析(DNA-ICM)和宫颈液基细胞学(LBC)诊断宫颈鳞状上皮内病变的准确性。方法选取组织学诊断的鳞状上皮内病变或宫颈癌病例中LBC和/或DNA-ICM结果异常的病例,进行组织学与LBC和/或DNA-ICM结果对比。LBC诊断以非典型鳞状细胞-意义不明确(ASC-US)/非典型腺细胞(AGC)为切入点;DNA-ICM以≥3个细胞、DNA指数≥2.5为切入点;以组织学诊断结果为金标准,应用SAS V8数据分析。结果DNA-ICM与LBC对宫颈上皮内瘤变(CIN)筛查的敏感性,分别为84.9%和79.5%(P>0.05);两种方法结合筛查敏感性可达97.5%,高于独立应用一种方法的敏感性。188例同时进行了LBC和DNA-ICM检测的病例中,DNA-ICM阳性176例,其中组织学诊断炎性病变52例,CIN、阴道上皮内瘤变(VIN)和宫颈癌121例,其他类型病变3例;在组织学诊断为炎性病变的病例中LBC阳性率为46.2%,在CIN、VIN和宫颈癌的病例中阳性率为72.7%(P<0.01)。LBC诊断ASC-US的52例中,组织学最终诊断炎性病变20例,CIN 32例;DNA-ICM在炎性病变和CIN病例的阳性率分别为75%(15/20)和96.9%(31/32)(P<0.05)。结论 DNA-ICM具有和LBC相似的筛查敏感性,两种方法相结合敏感性可显著提高;LBC可协助分流DNA-ICM的假阳性病例,提高DNA-ICM的特异性;DNA-ICM有利于鉴别LBC的不确定诊断。

全自动DNA定量技术能提高支气管镜刷片中肿瘤细胞的阳性检出率

目的探讨DNA定量技术肺癌筛查和早期诊断中的应用价值。方法对181例肺部疾病患者进行纤维支气管镜取活检并刷检。活检组织经常规固定、石蜡包埋、HE染色后进行病理检查;留取部分刷取物制作刷片,常规固定、HE染色后进行常规细胞学检查,剩余刷取物放入麦克奥迪DNA倍体样本处理试剂中固定,悬滴法制作涂片,经Feulgen染色,采用Motic全自动细胞DNA定量分析系统进行细胞DNA定量分析。对比分析细胞DNA定量分析与传统支气管刷片的敏感度和特异度。结果采用全自动DNA定量技术检测纤维支气管镜刷检物中肿瘤细胞的灵敏度为87.30%、显著高于传统纤维支气管镜刷片的灵敏度52.38%,但特异度(80.5%)较其低。结论全自动DNA定量技术是一种敏感而特异的肺癌筛查和早期诊断技术,能提高纤维支气管镜刷检物中肿瘤细胞检出率。

甲状腺肿瘤细胞印片的DNA图象分析

目的 探讨甲状腺肿瘤细胞印片DNA图象分析结果的临床意义。方法 对 5 4例甲状腺肿瘤细胞印片进行DNA图象分析。结果 甲状腺良恶性肿瘤倍体类型差异显著 ;倍体类型及异倍体的含量与其预后相关。结论 甲状腺肿瘤细胞印片的DNA图象分析可为判断肿瘤的生物学特性提供重要信息。

DNA倍体细胞检测与宫颈液基细胞学检查在宫颈病变筛查中的应用

目的对比DNA倍体细胞检测(DNA-ICM)与宫颈液基细胞学检查(TCT)在宫颈病变筛查中的优缺点。方法回顾性分析2016年1月至2017年4月在深圳市第二人民医院妇科门诊同时进行DNA-ICM和TCT筛查的12753例患者的临床资料,其中198例因两种筛查任一筛查结果阳性,或HPV高危分型(+),或HPV高危分型(-)但妇科检查宫颈有可疑病灶者,故行阴道镜下宫颈活检。病理结果按慢性炎症(单纯炎症、湿疣样变)、低度病变(LSIL:CINⅠ)、高度病变(HSIL:CINⅡ-Ⅲ)及宫颈癌进行划分。分析两种方法在不同病理分类的灵敏度和特异度的差异。结果(1)活检病理以慢性宫颈炎为阴性结果,以LSIL(CINI)及其以上级别病变为阳性结果,两种方法比较,DNA-ICM灵敏度为93.5%(87/93),优于TCT的灵敏度69.9%(65/93),差异有统计学意义(P<0.05);DNA-ICM特异度为20.0%(21/105),低于TCT的特异度35.2%(37/105),差异有统计学意义(P<0.05);(2)对不同病理分类进行分层分析,DNA-ICM在湿疣样变、LSIL和HSIL中的阳性率分别为87.5%(49/56)、90.2%(37/41)和95.8%(46/48),明显高于TCT的64.2%(36/56)、63.0%(26/41)和72.9%(35/48),差异均有统计学意义(P<0.05);而在单纯炎症及宫颈癌中,DNA-ICM的阳性率分别为71.4%(35/49)和100%(4/4),与TCT的65.3%(32/49)和100%(4/4)结果相近,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对LSIL及其以上级别病变,DNA-ICM较TCT的敏感度高,虽然特异度降低,但可结合其他检查以弥补;同时DNA-ICM对湿疣样变、LSIL、HSIL的阳性率明显高于TCT,而对于单纯炎症及宫颈癌的阳性率又不低于TCT,故DNA-ICM可作为比TCT更敏感的宫颈癌筛查方法。

全自动DNA图像分析系统在胰腺恶性肿瘤诊断中的价值

目的:评估全自动DNA图像分析(DNA-ICM)系统在诊断胰腺恶性肿瘤中的价值。方法:108例可疑胰腺恶性肿瘤患者行超声内镜引导下细针穿刺,所获标本分别行常规细胞学检测及DNA-ICM检测,以组织病理学诊断结果为标准,参考临床随访资料,分析细胞学、DNA-ICM及两者联合的诊断价值。结果:常规细胞学诊断的敏感性(93.1%)、特异性(95.2%)、阳性预测值(98.8%)、阴性预测值(76.9%)及准确率(93.5%)均高于DNA-ICM(分别为90.8%、90.5%、97.5%、70.4%、90.7%),但两者之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。两种方法联合诊断的各项指标分别为敏感性(95.4%)、特异性(90.5%)、阳性预测值(97.6%)、阴性预测值(82.6%)及准确率(94.4%)。两者联合诊断的敏感性、阴性预测值、准确率均高于单独诊断,但其差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:DNA-ICM联合细胞学诊断有很好的临床应用价值,DNA-ICM是胰腺细胞学诊断的一种较好的辅助诊断手段。

自发性高血压大鼠左室重构中细胞增殖及心肌细胞DNA倍体的变化

目的 :探讨组织细胞增殖在高血压左室重构中的变化规律。方法 :不同年龄 (1周、3、6、12月龄 )的 WKY和 SHR大鼠 ,称重法测量左室肥厚指数 ,L SAB免疫组化法检测左室中增殖细胞核抗原 (PCNA)的蛋白表达 ,图像细胞分析技术原位检测心肌细胞核 DNA倍体和细胞核面积的变化。结果 :1周、3、6、12月龄各组 SHR左室肥厚指数分别比同龄WKY增加 18%、15 %、2 6 %、2 6 % ,均有统计意义。 1周龄和 3月龄 SHR心肌细胞 PCNA阳性率较同龄 WKY显著增加 ;而纤维细胞阳性率在两株大鼠无明显差异。 6月龄 WKY无阳性细胞表达 ,SHR心肌细胞阳性率为 0 .13± 0 .0 7,无统计学意义。 12月龄 WKY和 SHR均无阳性细胞表达。各年龄段SHR4倍体心肌细胞核百分比和心肌细胞核面积均较 WKY大鼠显著增加。在 1周至 12月龄时 ,两株大鼠 4倍体心肌细胞核比例均随年龄呈线性生长 ,6月龄后 WKY倍体比例相对稳定 ,SHR增加幅度明显下降。回归分析表明 ,成年 SHR4倍体比例与动脉收缩压呈相正关性。结论 :SHR左室重构在新生鼠即已发生 ,在 6月龄时基本完成 ,并且不完全依赖于血压的增高。这种病理性变化表现为心肌细胞的增殖 (肥大和 /或增生 ) 。

组织细胞DNA质量图像定量分析

本文对组织细胞 DNA质量图像定量分析技术进行了讨论。该方法是将医学病理上常用的细胞切片、涂片 ,经福尔马林、甲醇和冰醋酸混合固定剂固定后用 Feulgen染色 ,利用高精度图像采集系统将细胞图像摄入计算机。通过图像处理分析技术进行定量分析计算 ,给出被测细胞 DNA的质量、倍体分布及细胞周期等参数。 DNA原位图像定量分析可为肿瘤的诊断、分级及早期发现有很大的意义。

图像分析仪测定胸、腹水细胞DNA含量的应用

目的 :探讨胸腹水脱落细胞的DNA含量对诊断良恶性胸腹水的应用价值。方法 :应用计算机图像分析仪 (ICM)测定 32例恶性胸腹水脱落细胞 (癌细胞、恶性间皮瘤细胞 )和 18例良性胸腹水脱落细胞 (正常和增生间皮细胞 )的DNA含量 ,以同一涂片内成熟淋巴细胞作对照进行DI测定、倍体分析、绘制DNA直方图 ,计算出其恶性细胞的检出率 ,并与常规脱落细胞学检查作比较。结果 :胸腹水中恶性肿瘤细胞 (癌细胞 ,恶性间皮瘤细胞 )的DNA含量明显增高 ,多为异倍体 (≥ 5C) ,DI值为 (3.85± 1.2 4 )。间皮细胞 (增生和正常间皮细胞 )的DNA含量多呈二倍体 ,DI值为 (1.35± 0 .2 3) ,二者差别有显著性 (P <0 .0 1)。恶性肿瘤细胞DNA分布直方图在 5C处形成主峰值 ,间皮细胞DNA分布直方图在 2C、3C处形成主蜂值。根据DNA测定结果 ,其恶性肿瘤细胞检出率为 87.5 % (2 8/ 32 ) ,常规脱落细胞学检出率为 71.9% (2 3/ 32 ) ,二者联合检查检出率为 90 .6 % (2 9/ 32 )。结论 :ICM具有经济、方便、准确等特点 ,应用其测定胸腹水脱落细胞学的DNA含量 ,并与常规脱落细胞学相结合 ,可提高恶性胸腹水的检出率 ,对诊断及鉴别诊断良恶性胸腹水具有重要临床意义。

DNA定量分析在涎腺肿瘤穿刺涂片上的应用

目的提高涎腺肿瘤术前诊断的正确性,以利首次手术的彻底完整切除。方法对69例涎腺肿瘤患者进行细针穿刺细胞涂片,每例涂片6张,其中4张进行细胞学检查,2张固定、收藏。待病理确诊后随机选择10例良性肿瘤和10例恶性肿瘤运用图像细胞光度技术进行DNA定量分析。结果单一细胞学检查在良性肿瘤中,正确性为4/10,敏感性为7/10,特异性为7/7;在恶性肿瘤中,正确性为3/10,敏感性为10/10,特异性为7/10。细胞学检查与DNA定量分析相结合的综合诊断在良性肿瘤中,正确性为4/10,敏感性为10/10,特异性为10/10;在恶性肿瘤中,正确性为5/10,敏感性为10/10,特异性为9/10。结论在术前行细针穿刺细胞学检查的同时辅以DNA定量分析,可以明显提高涎腺恶性肿瘤术前诊断的正确性和特异性,提高涎腺良性肿瘤术前诊断的敏感性。

肿瘤细胞DNA图像分析系统的研制

介绍一种采用数字图像处理技术而设计的肿瘤细胞DNA图像分析系统。该系统功能包括细胞DNA含量定量测量,DNA倍体分析和细胞核形态参数分析。该系统可为癌细胞的病理诊断提供可靠的数据。文中给出了系统硬件、软件的设计。

基于图像分析的DNA定量分析研究

目的运用ICM(Im age Cytom eter)对图像进行处理和分析,在给出细胞形态学参数的同时对DNA的含量进行定量分析,能有效地协助医生对诸如肿瘤等多种病症做出诊断。方法以武汉大学光谱与成像仪器工程技术研究中心研制的“全自动DNA细胞图像定量分析仪”(DNA-ICM)为平台,对鸡血红细胞和宫颈脱落细胞进行液基薄层制片,用Feu lgen染色法染色,对DNA-ICM上获取的细胞染色图像进行扣背底算法处理。结果用冷酸解法对两种细胞进行Feu lgen染色后细胞着色较深且均匀;进行扣背底算法处理后的细胞图像的灰度值方差为0.524,比不进行处理时(0.919)要小。结论冷酸解法更适用于鸡血红细胞和宫颈脱落细胞的Feu lgen染色;扣背底算法可以有效地减少视场不匀带来的误差。