DNA芯片制作原理及其杂交信号检测方法

文章讨论了DNA芯片的制作原理和杂交信号的检测方法。依其结构 ,DNA芯片可分为两种形式 ,DNA阵列和寡核苷酸微芯片。DNA芯片的制作方法主要有光导原位合成法和自动化点样法。DNA芯片与标记的探针或DNA样品杂交 ,并通过探测杂交信号谱型来实现DNA序列或基因表达的分析。适应于DNA芯片的发展 ,同时出现了许多新型的杂交信号检测方法。主要有激光荧光扫描显微镜、激光扫描共焦显微镜、结合使用CCD相机的荧光显微镜、光纤生物传感器、化学发生法、光激发磷光物质存储屏法、光散射法等。

DNA芯片制作及其应用

阐述了DNA芯片的制作原理、杂交信号的检测方法及其在生物医学中的应用。DNA芯片的制造工艺主要分为两大类。DNA芯片主要通过杂交信号进行检测。

DNA芯片的制作与应用

介绍了ＤＮＡ芯片的制作方法：支持物表面经活性处理后，采用原位合成法在支持物表面合成寡核苷酸探针，或用芯片外合成法制得探针后将探针通过喷墨打印法或化学方法固定到支持物上．探针与经过ＰＣＲ扩增、标记的生物样品杂交，检测杂交信号并进行分析以获得生物样品的遗传信息．讨论了该技术在诸如基因组研究、遗传分析、基因诊断等多方面的应用，并估计了今后的发展方向及前景．

分子生物学技术在水产养殖动物细菌性病原检测中的应用

回顾了核酸杂交、基因芯片、PCR等分子生物学技术在水产养殖动物细菌性病原检测中的应用,并对水产养殖细菌性疾病诊断技术的发展方向作了展望。

酶学信号扩增方法定量检测生物素探针杂交

将靶核酸固定于微孔滴定板上，用化学方法标记的生物素探针进行杂交，采用底物－辅助因子循环信号扩增系统对杂交结果进行检测，结果表明用该信号检测系统的检测灵敏度比常用显色底物的检测灵敏度高１０倍．

基于纳米金探针和基因芯片的DNA检测新方法

运用荧光纳米金探针和基因芯片杂交建立一种新的DNA检测方法.荧光纳米金探针表面标记有两种DNA探针:一种为带有Cy5荧光分子的信号探针BP1,起信号放大作用;另一种为与靶DNA一部分互补的检测探针P532,两种探针比例为5∶1.当靶DNA存在时,芯片上捕捉探针(与靶DNA的另一部分互补)通过碱基互补配对结合靶DNA,将靶DNA固定于芯片上;荧光纳米金探针通过检测探针与靶DNA及芯片结合,在芯片上形成"三明治"复合结构,最后通过检测信号探针上荧光分子的信号强度来确定靶DNA的量.新方法检测灵敏度高,可以检测浓度为1 pmol/L的靶DNA,操作简单,检测时间短.通过改进纳米金探针的标记和优化杂交条件,可进一步提高核酸检测的灵敏度,这将在核酸检测方面具有重要的应用价值.

基于纳米金复合探针的基因芯片膜转印检测法

建立了一种基于纳米金复合探针的基因芯片膜转印核酸检测新方法。首先,用纳米金颗粒同时标记检测探针P2和两种长短不同且生物素化的信号探针(T10,T40),其中检测探针与靶DNA5′端互补,两种信号探针起信号放大作用。当靶DNA分子存在时,芯片表面捕捉探针P1(与靶DNA分子3′端互补)通过碱基互补配对原则结合靶DNA分子,将其固定于芯片上,同时检测探针通过与靶DNA5′端互补配对将纳米金复合探针结合于芯片表面,结果在芯片表面形成"三明治"结构,后通过链霉亲和素-生物素反应,使芯片表面对应有靶DNA分子的部位结合上碱性磷酸酶,最后利用BCIP/NBT显色系统使芯片表面信号结果镜面转印至尼龙膜表面。当检测探针和信号探针摩尔比为1∶10,T10和T40摩尔比为9∶1时可以检测1pmol/L合成靶DNA分子或0.23pmol/L结核分枝杆菌16S rDNA PCR扩增产物,检测结果通过普通的光学扫描仪读取或肉眼直接判读信号有无。本芯片检测系统灵敏度高,操作方法简单、快速,不需要特殊仪器设备,在生物分子的检测方面具有较高的应用价值。