宫颈癌RASSF2A基因启动子甲基化与其临床病理特征的关系

目的:检测宫颈癌组织中Ras相关区域家族2A(RASSF2A)基因启动子甲基化状态,并分析RASSF2A基因甲基化率与临床病理特征的关系。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)检测46例宫颈癌、38例宫颈上皮内瘤变(CIN)和25例正常宫颈组织中RASSF2A基因启动子甲基化状态。结果:宫颈癌组织中RASSF2A基因甲基化率显著高于CIN组织及正常宫颈组织(P<0.05)。RASSF2A甲基化阳性率随着淋巴结转移而升高,具有明显的相关性(P<0.05);不同年龄、临床分期、组织分级及病理性类型与RASSF2A基因甲基化无显著相关性(P>0.05)。结论:RASSF2A基因启动子甲基化为频发事件,可能与宫颈癌的发生和淋巴结转移有关。

乳腺癌患者外周血DNA中PTPRO基因甲基化异常的检测及其临床意义

目的 :研究膜结合受体型蛋白酪氨酸磷酸酶O(protein tyrosine phosphatase receptor-type O,PTPRO)基因启动子在乳腺癌组织及其相应的外周血DNA中的甲基化状况,并探讨乳腺癌患者外周血中游离的肿瘤相关DNA与肿瘤组织及临床病理参数的相关性。方法 :采用甲基化特异性-PCR(methylation speciic-PCR,MSP)法检测乳腺癌组织、癌旁正常腺体组织及外周血中游离DNA中PTPRO基因启动子甲基化状况,并结合其临床病理特性进行分析。结果 :98例乳腺癌组织中PTPRO基因启动子的甲基化率为55.1%(54/98),与其相应外周血DNA中PTPRO基因启动子的甲基化率为33.7%(33/98),而对照组正常乳腺组织中无1例有PTPRO基因启动子的甲基化。外周血中PTPRO基因启动子的甲基化与肿瘤组织的该基因的甲基化状况显著相关(r=17.083,P=0.000)。甲基化率与患者肿瘤分期(r=9.649,P=0.001)、组织学分级(r=2.476,P=0.035)、淋巴结转移(r=3.400,P=0.003)、ErbB2阳性呈正相关(r=4.912,P=0.000);雌激素受体(estrogen receptor,ER)阴性及孕激素受体(progestogen receptor,PR)阴性的肿瘤组织中PTPRO基因启动子甲基化率增高,但差异无统计学意义。肿瘤组织中未检测到甲基化的患者及健康人血浆中均未检测到该基因甲基化变异。结论 :PTPRO基因启动子甲基化在乳腺癌的发生和发展中起着重要作用,可能与乳腺癌的预后相关,外周血中PTPRO基因甲基化的检测可作为一种无创性的乳腺癌临床诊断分子生物学指标。

镉对体外培养大鼠肝细胞DNA甲基化的影响

选用体外培养原代大鼠肝细胞为模型,用醋酸镉进行处理,用免疫荧光法检测了基因组DNA甲基化水平,用偏重亚硫酸氢盐测序法检测了MT、p53和Line1基因的DNA甲基化水平,用qRT-PCR检测了DNMTs基因的mRNA水平。结果显示,原代大鼠肝细胞在体外培养过程中基因组DNA甲基化水平具有缓慢下降的趋势,镉处理加速了这种下降的趋势;但p53、MT和Line1基因的DNA甲基化均未受镉的影响;维持DNA甲基化稳定的DNMTs表达水平受镉的影响呈现下降的趋势。表明镉对肝细胞的损害作用可能是通过降低DNMTs的表达水平,进而破坏基因组DNA甲基化的稳定来完成的;而镉对MT表达水平的影响似乎并非通过DNA甲基化途径来完成,因为在镉处理之前MT的DNA甲基化就已经处在较低的水平。

不同钾离子浓度处理影响烟草DNA甲基化变化的MSAP分析

烟叶钾含量是评定烤烟品质的重要指标之一,它与烟叶的燃烧性、降低危害物质、增强烟叶的香吃味等密切相关。本试验以钾元素富集能力较强的烟草为材料,采用不同的钾离子浓度处理烟苗,研究不同钾离子浓度对DNA甲基化变化的影响,试验结果表明,0、15 mmol/L、30 mmol/L、45 mmol/L和60 mmol/L硝酸钾浓度处理烟苗的总甲基化比例为33.26%、32.82%、29.20%、28.94%和27.43%,全甲基化比率为22.45%、22.17%、19.47%、19.43%和17.71%。随着钾离子处理浓度的增高,甲基化条带比率、全甲基化条带百分比均逐渐降低,DNA甲基化的变化可能是烤烟幼苗调控基因表达响应钾胁迫的方式之一。