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转座子沉默与DNA甲基化 被引量:2
1
作者 鲁亚萍 周明兵 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期634-643,共10页
转座子(transposable elements,TEs)在生物体基因组可以通过转座或逆转座移动,它拷贝数的大规模增加是基因组不稳定的重要因素,因此,维持TEs沉默是宿主进化的方向。DNA甲基化被认为是沉默TEs的可遗传表观遗传修饰方式,同时也在维持基因... 转座子(transposable elements,TEs)在生物体基因组可以通过转座或逆转座移动,它拷贝数的大规模增加是基因组不稳定的重要因素,因此,维持TEs沉默是宿主进化的方向。DNA甲基化被认为是沉默TEs的可遗传表观遗传修饰方式,同时也在维持基因组稳定、基因印迹、调节基因表达中发挥作用。本研究综述了TEs对生物基因组进化和基因表达的影响,重点总结了以DNA甲基化为主的转座子沉默机制的最新研究进展,归纳了环境因素通过DNA去甲基化调控转座子跳跃的机理。 展开更多
关键词 植物学 转座子 转座子沉默 dna甲基化 胁迫
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精准高效外源DNA整合技术研究进展 被引量:2
2
作者 吴志胜 傅高惠 +3 位作者 罗文骏 刘俊杰 陈慧芳 白银山 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期29-37,共9页
精准高效整合技术是将外源DNA片段插入到目的细胞基因组特定位置的一项转基因技术。早期通过细胞基因组与外源DNA同源序列发生重组来完成靶向整合的目的。伴随基因编辑技术发展,特别是CRISPR/Cas9技术的出现,精准高效的外源DNA整合技术... 精准高效整合技术是将外源DNA片段插入到目的细胞基因组特定位置的一项转基因技术。早期通过细胞基因组与外源DNA同源序列发生重组来完成靶向整合的目的。伴随基因编辑技术发展,特别是CRISPR/Cas9技术的出现,精准高效的外源DNA整合技术日益成熟,广泛应用到功能基因组学、转基因动物及遗传疾病治疗的研究中。围绕基因编辑研究进展、引导RNA修饰技术、单碱基整合技术、转座子技术和外源DNA整合效率等方面对精准靶向和高效整合技术进行综述。 展开更多
关键词 外源dna整合 精准高效 CRISPR/Cas9 单碱基整合 转座子技术
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干旱胁迫下高羊茅基因组甲基化分析 被引量:19
3
作者 唐晓梅 王艳 +5 位作者 马东伟 程海洋 杨宏 代娅 陶向 马欣荣 《草业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期164-173,共10页
DNA甲基化是真核细胞基因组重要的一种表观遗传调控。DNA甲基化影响基因表达,在植物逆境胁迫适应中起着重要作用。高羊茅是禾本科单子叶羊茅属植物,具有良好的耐寒、耐热性,大量用作运动场草坪和防护草坪,也可用做牧草。干旱是限制高羊... DNA甲基化是真核细胞基因组重要的一种表观遗传调控。DNA甲基化影响基因表达,在植物逆境胁迫适应中起着重要作用。高羊茅是禾本科单子叶羊茅属植物,具有良好的耐寒、耐热性,大量用作运动场草坪和防护草坪,也可用做牧草。干旱是限制高羊茅分布和产量的主要因素之一。本研究利用甲基化敏感扩增多态性技术(MSAP),比较了高羊茅在干旱胁迫15d后基因组胞嘧啶甲基化的变化。在干旱胁迫下,植株生长受到严重抑制。MSAP分析显示,10对选择性扩增引物,共扩增出475个CCGG位点,其中131个位点发生了甲基化或去甲基化变化,占27.58%。对照组和干旱处理组,总甲基化水平分别是43.16%和42.11%,显示干旱胁迫诱导高羊茅总的甲基化率下降了1.05%。对差异条带进行归类分析,并克隆、测序,获得13条不同变化类型的序列。序列同源分析显示,大多数序列是参与胁迫应答的基因片段。其中2个片段,Fa6和Fa7为干旱诱导下发生甲基化的位点,分别与小麦和大麦的一个逆转录转座子具有较高的同源性,在干旱胁迫下它们的甲基化程度增加,表明干旱诱导二者进一步甲基化。甲基化的转座子在维持基因组稳定性具有重要作用。综上,干旱胁迫诱导的甲基化的变化,可能参与高羊茅对环境的适应性调节。 展开更多
关键词 高羊茅 干旱胁迫 dna 甲基化 转座子
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PiggyBac转座酶转基因小鼠模型的建立 被引量:4
4
作者 马元武 王冬梅 +2 位作者 廉虹 王贵利 张连峰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第3期60-64,共5页
目的建立表达PiggyBac转座酶转基因小鼠模型,为研究PiggyBac转座子介导基因修饰在小鼠中的应用提供工具。方法利用Cytomegalovirus(CMV)启动子驱动PiggyBac转座酶基因的表达,经显微注射法建立C57BL/6J表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。... 目的建立表达PiggyBac转座酶转基因小鼠模型,为研究PiggyBac转座子介导基因修饰在小鼠中的应用提供工具。方法利用Cytomegalovirus(CMV)启动子驱动PiggyBac转座酶基因的表达,经显微注射法建立C57BL/6J表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR检测PiggyBac转座酶在小鼠生殖系睾丸中的表达情况。PiggyBac转座酶转基因小鼠活性的检测,是通过与转座子供体转基因小鼠杂交检测供体位置变化来确定的。结果显微注射产生7只转基因小鼠并能传代,经RT-PCR筛选出一株在睾丸中相对高表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。随后与转座子供体转基因小鼠杂交,子代双阳小鼠与野生型小鼠杂交基因型分离,产生的子代转座子供体单阳性小鼠中具有转座子供体片段的转座反应。结论成功建立了表达Piggy-Bac转座酶转基因小鼠动物模型,该模型为PiggyBac转座子技术在小鼠中的应用提供了有价值的工具动物。 展开更多
关键词 dna转座子 PIGGYBAC 转座酶 转基因小鼠
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尖孢镰刀菌专化型及生理小种分子检测研究进展 被引量:12
5
作者 张吉祥 凌键 +1 位作者 谢丙炎 杨宇红 《中国农学通报》 CSCD 2013年第36期338-342,共5页
尖孢镰刀菌分子检测工作在枯萎病病原菌分子诊断与防治中具有重要意义。本研究综述了DNA分子标记、毒性基因和转座子等技术在尖孢镰刀菌专化型及其生理小种鉴别方面的应用,指出了各检测方法优缺点,并对今后的研究方向进行展望。
关键词 专化型 生理小种 dna分子标记 转座子 毒性基因
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植物功能基因组研究方法及进展 被引量:7
6
作者 高泽发 陈绪清 +3 位作者 杨凤萍 梁荣奇 张立全 张晓东 《生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期1-4,共4页
随着植物功能基因组研究的深入,T-DNA标签、转座子标签、反义RNA技术、基因敲除、基因陷阱和TILLING技术等多种研究方法获得了建立,并随着植物功能基因组学的不断发展而进一步完善。综述了各类研究方法的原理,并对这些方法的优缺点进行... 随着植物功能基因组研究的深入,T-DNA标签、转座子标签、反义RNA技术、基因敲除、基因陷阱和TILLING技术等多种研究方法获得了建立,并随着植物功能基因组学的不断发展而进一步完善。综述了各类研究方法的原理,并对这些方法的优缺点进行了比较与分析。 展开更多
关键词 T-dna标签 转座子标签 反义RNA技术 基因敲除 基因陷阱 TILLING技术
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插入突变在水稻功能基因组学中的研究进展 被引量:5
7
作者 苏红 印莉萍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1-4,共4页
构建饱和的基因突变体库是最直接、有效的分析鉴定基因功能的方法。根据插入突变源不同可分为T-DNA插入突变、转座子插入突变等。主要介绍这两种方法的原理及其在水稻功能基因组学研究中的应用和进展,并分析和讨论了插入突变在水稻功能... 构建饱和的基因突变体库是最直接、有效的分析鉴定基因功能的方法。根据插入突变源不同可分为T-DNA插入突变、转座子插入突变等。主要介绍这两种方法的原理及其在水稻功能基因组学研究中的应用和进展,并分析和讨论了插入突变在水稻功能基因组学研究中存在的困难和发展趋势。 展开更多
关键词 插入突变 T—dna 转座子 水稻功能基因组学
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Sleeping Beauty转座酶转基因小鼠模型的建立 被引量:3
8
作者 路迎冬 张旭 +3 位作者 马婧 张连峰 高虹 马元武 《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第10期7-12,I0003,共7页
目的建立表达Sleeping Beauty(SB)转座酶转基因小鼠模型,为研究SB转座子在小鼠中的应用提供工具动物。方法利用人的泛素C启动子驱动SB转座酶基因的表达,利用显微注射方法建立C57BL/6J表达SB转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定首建鼠的基因型,W... 目的建立表达Sleeping Beauty(SB)转座酶转基因小鼠模型,为研究SB转座子在小鼠中的应用提供工具动物。方法利用人的泛素C启动子驱动SB转座酶基因的表达,利用显微注射方法建立C57BL/6J表达SB转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定首建鼠的基因型,Western Blot(WB)和免疫组织化学(IHC)检测SB转座酶基因在小鼠生殖腺睾丸中的表达情况,筛选睾丸中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结果通过显微注射方式产生了4只首建小鼠,其中3只能稳定传代,利用WB和IHC成功的筛选出一株在睾丸中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结论成功建立了睾丸组织中高表达SB转座酶转基因小鼠动物模型,为将SB转座子应用于建立基因修饰小鼠模型提供非常重要的工具动物。 展开更多
关键词 dna转座子 SLEEPING BEAUTY 转座酶
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荧光定量PCR辐照食品鉴定技术的优化研究 被引量:2
9
作者 刘绵学 伏毅 +4 位作者 郑宇 王艳 潘琳 李华 黄敏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期77-83,共7页
为优化荧光定量PCR辐照食品鉴定技术方法,实现对假阳性样本的鉴别能力,降低模板量对鉴定结果的干扰效应。选择马铃薯作为研究材料,分别进行1-12 kGy的60Co辐照、加热和冻融处理,通过转座子引物筛选、检出限分析、DNA损伤特征比较和剂量... 为优化荧光定量PCR辐照食品鉴定技术方法,实现对假阳性样本的鉴别能力,降低模板量对鉴定结果的干扰效应。选择马铃薯作为研究材料,分别进行1-12 kGy的60Co辐照、加热和冻融处理,通过转座子引物筛选、检出限分析、DNA损伤特征比较和剂量曲线回归等方法,探究转座子引物的应用对马铃薯辐照鉴定结果的优化效果。结果显示,转座子引物组合LTR2-5\18S-8与LTR2-2\ACT-5可用于假阳性样本的鉴别,引物组合LTR2-5\18S-5可用于辐照鉴定。优化后方法中"初始循环数差值的指数函数-辐照剂量"标准曲线方程为Y=-0.1581X+4.611,线性关系R2为99.24%,优于"初始循环数差值-辐照剂量"的原有模式。通过转座子引物的应用与方法优化,增强了假阳性鉴别能力,消除了模板差异,增强了荧光定量PCR辐照鉴定技术的"剂量-效应关系"。 展开更多
关键词 辐照鉴定 转座子 马铃薯 dna损伤
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家蚕精子介导转基因技术体系的优化 被引量:7
10
作者 张业顺 夏定国 +4 位作者 张国政 唐顺明 沈兴家 赵浩勤 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期201-206,共6页
为了构建高效的家蚕转基因技术,对采用piggyBac转座载体的家蚕精子介导转基因的主要技术参数进行优化,结果表明外源DNA的稀释剂和注射方式对导入效率影响较大,G0代未整合的外源DNA在5龄期前基本被降解破坏。推荐的家蚕精子介导基因转移... 为了构建高效的家蚕转基因技术,对采用piggyBac转座载体的家蚕精子介导转基因的主要技术参数进行优化,结果表明外源DNA的稀释剂和注射方式对导入效率影响较大,G0代未整合的外源DNA在5龄期前基本被降解破坏。推荐的家蚕精子介导基因转移技术方案为:处女蛾交尾囊注射6~8μL以0.1×TE稀释的2 g/Lpig-gyBac转座子载体DNA后正常交配产卵,根据G0代5龄期及蛾期PCR检测标记基因为阳性的蛾区自交,G1代阳性个体自交以获得纯合后代。 展开更多
关键词 家蚕 精子介导转基因 交尾囊注射 转座子载体dna PCR检测
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基因克隆技术 被引量:14
11
作者 周国岭 杨光圣 傅廷栋 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期584-592,共9页
综述了基因克隆常用技术包括图位克隆法、转座子或T DNA标签法、同源序列法、表达序列标签(EST)法和差异表达基因分离方法的原理、应用。
关键词 基因克隆 图位克隆 转座子标签 T-dna标签 同源序列 EST 差异表达基因
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复合转座子ISEcp1B与IS903介导CTX-M ESBLs新基因亚型传播机制的研究 被引量:1
12
作者 廖伟娇 江洁华 +1 位作者 徐韫健 李宁 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第10期1027-1029,1032,共4页
目的研究肺炎克雷伯菌Kp49,CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)新亚型的基因环境,并分析其传播的分子机制。方法用K-B药敏法分析肺炎克雷伯菌Kp49的耐药性;用多重聚合酶链反应(PCR)技术扩增CTX-M-G1、TEM、SHV、DHA、ACT、IMP-1、VIM-1、I... 目的研究肺炎克雷伯菌Kp49,CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)新亚型的基因环境,并分析其传播的分子机制。方法用K-B药敏法分析肺炎克雷伯菌Kp49的耐药性;用多重聚合酶链反应(PCR)技术扩增CTX-M-G1、TEM、SHV、DHA、ACT、IMP-1、VIM-1、ISEcp1B、IS903及Ⅰ类整合子,PCR扩增ISEcp1B下游的CTX-M型ESBLs全序列并测序。结果肺炎克雷伯菌Kp49只对亚胺培南敏感,对其余21种抗菌剂均耐药。检出TEM、SHV、CTX-M-G1及DHA基因Ⅰ类整合子。检出1种新的CTX-M ESBLs基因亚型,全长876 bp,与blaTX-M-14相比有1个核苷酸不同(GenBank登陆号:EF446126)。blaCTX-M-like的上游是ISEcp1B的遗传元件,下游是插入序列IS903的保守序列组成复合转座子。可能是ISEcp1B序列通过转座子机制俘获β-内酰胺酶,并提供-35及-10位点2个启动子,对下游CTX-M型ESBLs的高水平表达起重要的调控作用。结论插入序列ISEcp1B与IS903组成的复合转座子可能介导了新的CTX-M ESBLs基因亚型的水平传播,并驱使其高度表达,使Kp49对多种抗菌剂耐药。 展开更多
关键词 克雷伯菌 肺炎 Β内酰胺酶类 dna可移植因子 疾病传播 转座子
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精子特异性Sleeping Beauty转座酶转基因小鼠模型的建立
13
作者 路迎冬 张旭 +2 位作者 马婧 张连峰 马元武 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第3期34-38,I0006,共6页
目的建立精子特异性表达Sleeping Beauty(SB)转座酶转基因小鼠模型,为研究SB转座子在小鼠中的应用提供工具。方法克隆精子特异性启动子用以驱动SB转座酶基因的表达,建立精子特异性表达SB转座酶的载体,利用显微注射方法建立以C57BL/6J为... 目的建立精子特异性表达Sleeping Beauty(SB)转座酶转基因小鼠模型,为研究SB转座子在小鼠中的应用提供工具。方法克隆精子特异性启动子用以驱动SB转座酶基因的表达,建立精子特异性表达SB转座酶的载体,利用显微注射方法建立以C57BL/6J为背景的精子特异性表达SB转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定首建鼠的基因型,western blot(WB)和免疫组织化学(IHC)检测SB转座酶基因在小鼠生殖腺睾丸中的表达情况,筛选睾丸中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结果显微注射方式获得了5只首建小鼠,其中3只能稳定传代,利用WB和IHC成功的筛选出一株在精子中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结论成功建立了精子特异性高表达SB转座酶转基因小鼠模型,为将SB转座子作为一种基因工程工具应用于小鼠基因修饰模型的建立提供非常重要的工具资源。 展开更多
关键词 dna转座子 SleepingBeauty 转座酶
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UV-B对植物分子和细胞水平的效应 被引量:7
14
作者 石江华 王艳 李韶山 《激光生物学报》 CAS CSCD 2002年第4期315-319,共5页
本文综述了植物在分子和细胞水平上 U V- B效应的研究进展。主要讨论了 UV- B信号途径及光受体 ,UV- B诱导的 DNA损伤、转座子激活 ,UV- B对光合器官的分子伤害及相关基因表达的调控等。
关键词 环丁烷嘧啶二聚体 dna损伤 转座子 基因表达 (6 4)光产物 UV-B受体 植物分子 植物细胞
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Ds 因子在烟草染色体插入位点旁邻顺序的克隆
15
作者 张大兵 张景六 +1 位作者 王宗阳 洪孟民 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1999年第1期7-14,共8页
用NestedPCR 方法从含Ds 因子的转基因烟草DNA 中克隆了Ds 因子在烟草染色体插入位点的9 个旁邻DNA 片段,以这些片段作探针,和野生型烟草的DNA 进行Southern 杂交,以检测这些片段在烟草基因组中... 用NestedPCR 方法从含Ds 因子的转基因烟草DNA 中克隆了Ds 因子在烟草染色体插入位点的9 个旁邻DNA 片段,以这些片段作探针,和野生型烟草的DNA 进行Southern 杂交,以检测这些片段在烟草基因组中的拷贝数,结果表明它们都属于烟草染色体上的低拷贝DNA。另外,对这些DNA 片段进行核苷酸序列测定,并将它们的顺序与Genbank 数据库中已有的核苷酸序列相比较,其中长度为128 核苷酸的片段1 和荷兰芹的4CL2 基因的一个区段有57 .8 % 同源性,而另一长度为169 核苷酸的片段3 和百合中的反转座子的一个区段有60 .9 % 的同源性。这都表明Ds 因子在异源植物烟草中插入染色体单拷贝基因的机率很高,这对转座子标签法克隆基因是非常有利的。 展开更多
关键词 Ds因子 旁邻dna片段 单拷贝 转座子标签
全文增补中
PiggyBac转座系统及在基因修饰T细胞肿瘤免疫治疗中的研究进展
16
作者 周拓 蒋振华 韩双印 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期752-757,共6页
基因修饰T细胞的肿瘤免疫治疗近年来取得了可喜进步,外源基因转导是T细胞过继转移前的关键环节,该领域的进展赋予T细胞新的生命力,实现对肿瘤细胞的精准靶向杀伤。T细胞基因修饰技术需要在转导效率、安全性和成本之间取得平衡。转座子... 基因修饰T细胞的肿瘤免疫治疗近年来取得了可喜进步,外源基因转导是T细胞过继转移前的关键环节,该领域的进展赋予T细胞新的生命力,实现对肿瘤细胞的精准靶向杀伤。T细胞基因修饰技术需要在转导效率、安全性和成本之间取得平衡。转座子免疫原性低,易于制造且成本效益高,可以将目的基因整合至靶细胞基因组,允许稳定持久的表达。哺乳动物细胞中活跃的转座子包括PiggyBac(PB)、Sleeping Beauty(SB)和Tol2。其中,PB转座系统具有无缝编辑、基因载量大、转座活性高和结构可塑性强等特点,其分子结构和转座机制逐步得到阐明,有望成为基因修饰技术的后起之秀,在嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞肿瘤免疫治疗领域占据一席之地。 展开更多
关键词 dna转座子 转基因 嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞 免疫疗法 过继 综述
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水稻NERD途径关键基因OsNERD1的功能研究
17
作者 陈雄平 《湖北农业科学》 2015年第4期988-992,1006,共6页
Rd DM(RNA-directed DNA methylation)是一种存在于植物中转录水平的基因沉默(Transcriptional gene silencing,TGS)机制,需要DCL3、RDR2及AGO4/6等多种蛋白介导si RNA同源位点的甲基化。拟南芥中发现了独立于Rd DM的一条新TGS途径,其... Rd DM(RNA-directed DNA methylation)是一种存在于植物中转录水平的基因沉默(Transcriptional gene silencing,TGS)机制,需要DCL3、RDR2及AGO4/6等多种蛋白介导si RNA同源位点的甲基化。拟南芥中发现了独立于Rd DM的一条新TGS途径,其关键蛋白为At NERD1。At NERD1能够与AGO2蛋白相互作用,产生21nt的s RNAs分子,介导某些新近进化基因的甲基化,并影响其组蛋白修饰。序列同源比对结果表明,水稻中存在有与At NERD同源非常高的蛋白,分别命名为Os NERD1和Os NERD2。体外结合试验结果表明,Os NERD的PHD结构域能够结合H3K4me3,Os NERD1参与下游基因的表观调控。对OsNERD突变体中一些转座子的检测表明,该基因的突变会影响转座子的表达量变化及其表观修饰,并且这些转座子集中在gypsy家族,gypsy家族转座子在营养核中表达活跃,可能与Os NERD1的花粉不育相关。 展开更多
关键词 NERD SRNA RDDM 转座子 dna甲基化
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用于克隆及分子标记分析的甘蔗高质量基因组DNA提取方法 被引量:2
18
作者 刘俊仙 熊发前 +9 位作者 刘菁 罗丽 丘立杭 刘丽敏 吴建明 刘红坚 刘欣 卢曼曼 何毅波 李松 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期545-552,共8页
甘蔗是世界上重要的糖料作物,其遗传背景复杂,基因组庞大复杂。但基因组测序尚未完成,严重制约了甘蔗分子生物学研究进展。为构建成熟完善的甘蔗高质量基因组DNA提取方法,本研究采用四种改良CTAB法提取甘蔗基因组DNA,先通过紫外分光光... 甘蔗是世界上重要的糖料作物,其遗传背景复杂,基因组庞大复杂。但基因组测序尚未完成,严重制约了甘蔗分子生物学研究进展。为构建成熟完善的甘蔗高质量基因组DNA提取方法,本研究采用四种改良CTAB法提取甘蔗基因组DNA,先通过紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测提取所得甘蔗基因组DNA的质量,再使用8对转座子保守区同源克隆扩增引物和8种基于单引物扩增反应的分子标记技术的78条单引物对提取的甘蔗基因组DNA的质量进行扩增验证。结果表明:(1)结合甘蔗基因组DNA的质量数据以及甘蔗转座子保守区同源克隆扩增和分子标记技术研究的验证结果来看,四种改良CTAB法的DNA提取效果表现依次为:方法三>方法四>方法二>方法一。但方法三和方法四均使用到强腐蚀性的平衡酚而不安全环保,而方法二和方法一则分别使用了二次和一次氯仿抽提,根据样品的实际状态,本研究认为后两者中的一种可作为甘蔗基因组DNA的最佳提取方法;(2)建立了甘蔗6类转座子保守区同源克隆和8种基于单引物扩增反应的分子标记技术的扩增体系。本研究为以后开展甘蔗转座子的克隆鉴定利用和分子标记研究提供了帮助。 展开更多
关键词 甘蔗 同源克隆 分子标记技术 基因组dna 转座子
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花生DNA的五种改良CTAB提取方法的比较分析及其应用 被引量:13
19
作者 熊发前 刘俊仙 +8 位作者 刘菁 贺梁琼 蒋菁 唐秀梅 黄志鹏 吴海宁 钟瑞春 韩柱强 唐荣华 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期2207-2216,共10页
花生是世界上重要的油料作物和经济作物之一,也是最重要的植物食用油来源之一,但花生分子标记和功能基因组学等分子生物学研究较落后。因此,本研究旨在建立适合自身的花生基因组DNA的提取方法,为开展花生分子标记研究和分子生物学研究... 花生是世界上重要的油料作物和经济作物之一,也是最重要的植物食用油来源之一,但花生分子标记和功能基因组学等分子生物学研究较落后。因此,本研究旨在建立适合自身的花生基因组DNA的提取方法,为开展花生分子标记研究和分子生物学研究提供帮助。本研究使用了5种改良CTAB法提取花生基因组DNA,所得DNA的纯度和浓度分别通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测,再利用8种分子标记技术的48条单引物和4对转座子保守区扩增引物对提取获得的花生基因组DNA的质量进行扩增验证和应用。结果表明:(1)综合花生基因组DNA的质量检测数据以及花生分子标记技术和转座子保守区的扩增验证结果来看,五种改良CTAB法的DNA提取效果表现依次为:方法一>方法五>方法四>方法三>方法二,其中方法一为最佳首选,方法五和方法四的提取效果也好,但是由于其有利用到强腐蚀性的平衡酚,不安全且不环保,所以不推荐;(2)在花生上建立了8种分子标记技术和4类转座子保守区的扩增体系;(3)克隆获得了花生4类转座子保守区序列。本研究为今后开展花生分子标记研究及转座子的克隆鉴定利用提供了帮助。 展开更多
关键词 花生 dna 分子标记技术 转座子 单引物扩增反应
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A Solution to the C-Value Paradox and the Function of Junk DNA: The Genome Balance Hypothesis 被引量:2
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作者 Michael Freeling Jie Xu +1 位作者 Margaret Woodhouse Damon Lisch 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2015年第6期899-910,共12页
The Genome Balance Hypothesis originated from a recent study that provided a mechanism for the phenom- enon of genome dominance in ancient polyploids: unique 24nt RNA coverage near genes is greater in genes on the re... The Genome Balance Hypothesis originated from a recent study that provided a mechanism for the phenom- enon of genome dominance in ancient polyploids: unique 24nt RNA coverage near genes is greater in genes on the recessive subgenome irrespective of differences in gene expression. 24nt RNAs target transposons. Transposon position effects are now hypothesized to balance the expression of networked genes and pro- vide spring-like tension between pericentromeric heterochromatin and microtubules. The balance (coordi- nation) of gene expression and centromere movement is under selection. Our hypothesis states that this balance can be maintained by many or few transposons about equally well. We explain known balanced dis- tributions of junk DNA within genomes and between subgenomes in allopolyploids (and our hypothesis passes "the onion test" for any so-called solution to the C-value paradox), importantly, when the allotetra- ploid maize chromosomes delete redundant genes, their nearby transposons are also lost; this result is ex- plained if transposons near genes function. The Genome Balance Hypothesis is hypothetical because the position effect mechanisms implicated are not proved to apply to all junk DNA, and the continuous nature of the centromeric and gene position effects have not yet been studied as a single phenomenon. 展开更多
关键词 junk dna transposonS C-VALUE PARADOX gene regulation BALANCE
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