EMB基因330密码子分子DNA探针设计及荧光检测

目的针对结核杆菌耐乙胺丁醇embB330密码子位点设计分子DNA探针,尝试运用荧光分光光度计直接观测液相中分子DNA探针与embB330密码子扩增产物杂交后的荧光信号,从而检出该位点突变。方法运用软件Beacon designer设计embB基因包含330密码子的分子DNA探针,应用荧光分光光度计检测embB306密码子扩增片段与探针杂交后荧光信号,比较扩增产物测序结果。结果通过荧光分光光度计观测到结核标准株及embB330密码子突变株PCR产物与探针杂交后荧光信号存在显著差异;33株耐乙胺丁醇组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐乙胺丁醇组embB330密码子突变检出率为3%,测序法突变检出率为3%。结论分子DNA探针技术可以有效检测embB330密码子单碱基靶点突变;应用荧光分光光度计直接观测液相荧光杂交信号简单、灵敏。

布氏菌病新诊断技术的研究

我们在1995～1998年间对PCR诊断布病技术进行了多方面研究。其结果表明,该技术在诊断中有一定特异性和较高的敏感性(100fg)。对陕西、河北和山东省区的布病患者及健康对照人群的PCR检测,不同省区患者阳性率差别较大,各省区的对照人群也有一定的阳性。建议,进一步改进PCR诊断布病技术,并扩大试用范围,以便提高诊断水平。同时对DNA分子探针等技术也作了初步探索。

基于微机械电子系统的电化学电极阵列的研制

为了克服传统电化学电极反应液需要量较大、预处理繁琐和耗时的不足,本研究通过腐蚀、键合、光刻、氧化、扩散和溅射等工艺在75 mm×25 mm光学玻片上制备了基于微机械电子系统的电化学电极阵列。该电极阵列含有16个电极单元,每个单元之间的差异性≤3.7%;电极表面Rct=28Ω,预处理时间1 min;反应液量1～50μL。用此电极阵列构建的生物传感器实现了对大肠杆菌特异性靶分子序列的检测,检测下限达到1×10-8mol/L。结果表明,此电化学电极阵列能满足多通道微量检测的需求,在其表面可方便地进行生物功能化修饰,应用范围广,实用性强。

亚微米及纳米尺度上的生物分析化学

细胞内化学成分的测定是细胞生物学、生物物理学、毒物学等领域重要的研究方向之一.实时、在线、活体、原位测定细胞内化学物质的浓度和空间分布情况,将为医学、生物学的研究提供有益的信息.