聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微流控芯片DNA分析系统的研制

生物分析是微流控芯片分析最具进一步发展及商品化前景的分支领域之一。报道了基于聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微流控芯片DNA分析系统的研制。采用简易热压法自制的PMMA芯片,以小型光纤式激光诱导荧光为检测器,以四触点可切换1800V高压电源为电驱动系统,以2%羟乙基纤维素(HEC)为筛分介质,通过用于DNA分析的TO-PRO-3荧光染料和激光诱导荧光检测器670nm截止滤光片的选择,构建了微流控芯片DNA分析系统。芯片凝胶电泳分离φX174-HaeⅢRFDNA片段,以603bp片段计算理论塔板数n为1.14×106.m-1,271/281bp的分离度R为1.2。建立的PMMA微流控芯片DNA分析系统具有制作和运行成本低,芯片可重复使用,分析重现性好等特点。该研究可用于制作微型化便携式DNA分析仪,应用于临床诊断、疾病筛查等领域。

基于4300 DNA分析系统的茶树SSR发掘方法优化与建立

简单序列重复(Simple sequence repeats,SSR)在茶树遗传与育种研究中具有重要的作用,基于4300DNA分析系统的SSR发掘具有通量高、准确和灵敏等特点,已被用于许多物种的分子标记研究,但在茶树的相关研究中尚未见报道。本研究应用单因素试验和L9(34)正交设计试验对影响茶树SSR-PCR的主要参数进行优化,建立了适合于4300 DNA分析系统的茶树SSR-PCR反应体系:1.0μL DNA(25 ng·μL-1),0.2μL M13F-F、0.2μL R和0.4μL IR-M13F,0.8μL dNTPs(25 mmol·L-1),1.0μL 10×Buffer(含Mg2+),0.1μL Ex-Taq聚合酶(5 U·μL-1),无菌水定容至10μL。所有引物浓度均为1μmol·L-1。同时,本研究还证明,可以以自行配制的6.5%聚丙烯酰胺凝胶溶液(acry∶bis=29∶1)替代4300 DNA分析系统指定凝胶溶液,检测SSR位点。

DNA倍体分析系统结合HR-HPV检测在宫颈癌、癌前病变筛查中的价值

目的:分析DNA倍体分析系统结合HR-HPV检测在宫颈癌、癌前病变筛查中的应用价值。方法:选取2019年1月—2022年3月在我院进行宫颈筛查患者600例,均采用DNA倍体分析系统结合HR-HPV检测,并以病理活检结果作为金标准,分析对宫颈癌、癌前病变的筛查价值。结果:600例早期宫颈癌筛查患者,HR-HPV检出阳性率20.83%,DNA倍体分析系统检出阳性率22.67%,两种联合检出阳性率25.67%;三者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。联合指标诊断宫颈癌、癌前病变的灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值、阴性预测值分别为96.79%、99.32%、98.67%、98.05%、98.67%,均高于HR-HPV、DNA倍体分析系统,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DNA倍体分析系统结合HR-HPV检测可提高宫颈癌、癌前病变筛查检出率,应用价值高。

全自动DNA定量分析系统用于宫颈癌和癌前病变筛查中的价值分析

研究在宫颈癌和癌前病变筛查工作中使用全自动DNA定量分析系统的临床价值。方法 时间取自2022.9至2023.1,共有500例研究对象,均使用常规细胞学诊断、全自动DNA定量分析系统诊断,将病理组织学诊断结果视为金标准,对不同检查方法的诊断效能实施对照分析。结果 统计结果显示,常规细胞学诊断、全自动DNA定量分析系统诊断对500例研究对象的阳性检出率分别为14.60%(73/500)、16.00%(80/500);对70例患者实施病理组织活检标准,以该项结果视为金标准,显示正常宫颈组织共40例,占比为57.14%(40/70);CIN I级共9例,占比为12.86%(9/70);CIN Ⅱ级共12例,占比为17.14%(12/70);CIN III级共7例,占比为10.00%(7/70);宫颈癌共2例,占比为2.86%(2/70);在诊断效能统计结果方面,全自动DNA定量分析系统的灵敏度95.24%(20/21)、特异度67.35%(33/49)均高于常规细胞学诊断57.14%(12/21)、63.27%(31/49),P<0.05。结论 应用全自动DNA定量分析系统能够将宫颈癌及癌前病变筛查中将阳性检出率进一步提高,使漏诊率得到有效控制,若ASC-US患者同时存在DNA倍体异常的情况,则会使CIN检出风险显著提升。

全自动DNA定量分析系统在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用价值

目的通过与常规细胞学诊断相比较,探讨细胞DNA定量分析系统在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用价值。方法对2003例患者的宫颈细胞学标本分别采用常规细胞学和DNA定量分析系统检测,并将结果进行对比。结果常规细胞学检测为高级别以上的病变15例,DNA定量检测均为(+)。在细胞学检测为非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)的57例中,28例DNA定量分析(+),25例因为非整倍体细胞未达到诊断阳性标准而建议4～6个月复查;4例为(-)。结论 DNA定量分析技术有明确的诊断标准,结果客观,可与常规细胞学结合应用于宫颈癌及宫颈癌前病变的筛查。对于细胞学检测为ASC-US的人群有分流作用,需组织学证实。

DNA倍体分析系统在输尿管癌筛查及诊断中的应用

目的探讨DNA倍体分析系统在输尿管癌筛查及诊断中的应用价值。方法回顾性分析2016年11月至2018年11月上海交通大学医学院附属同仁医院收治的102例输尿管癌患者(研究组)和88例良性泌尿系统疾病患者(对照组)的临床资料。收集两组患者尿液标本,分别采用液基细胞学(LBC)和DNA倍体分析系统两种方法进行检查,并将两种检查方法的结果进行对比。结果102例输尿管癌患者尿液标本中,DNA倍体分析阳性检出率(65.69%)明显高于LBC检查阳性检出率(27.45%),差异有统计学意义(χ^2=29.965,P=0.000);DNA倍体分析系统筛查对输尿管癌的诊断效能显著高于LBC检查,差异有统计学意义(χ^2=8.135,P=0.043);DNA倍体分析系统筛查对输尿管癌的诊断效能显著高于LBC与DNA倍体分析联合检查,差异有统计学意义(χ^2=9.008,P=0.029)。结论DNA倍体分析系统在输尿管癌的筛查及诊断中能有效弥补常规细胞学诊断的不足,提高阳性检出率,是输尿管癌诊断的有效检查方法,值得推广应用。

基于模糊理论的产品设计DNA分析辅助设计系统开发

针对产品创新设计过程,为保持必要的品牌风格,提出了设计DNA分析法。基于该方法,通过采用ASP.NET,ADO.NET技术和SQL Server 2005数据库技术,设计并开发了产品设计DNA分析辅助设计系统。该系统以模糊数学理论为算法依据,采用浏览器/服务器模式,通过在线模糊识别、数据库实时归类保存,最终实现辅助设计的目的;同时通过数据库编辑操作,满足了系统开放性、交互性和通用性要求。

肿瘤细胞DNA图像分析系统的研制

介绍一种采用数字图像处理技术而设计的肿瘤细胞DNA图像分析系统。该系统功能包括细胞DNA含量定量测量,DNA倍体分析和细胞核形态参数分析。该系统可为癌细胞的病理诊断提供可靠的数据。文中给出了系统硬件、软件的设计。

细胞DNA倍体分析系统在临床宫颈癌筛查中的应用

目的:探讨细胞DNA倍体分析系统在临床宫颈癌筛查中的应用。方法:对宫颈细胞行宫颈DNA倍体分析及液基薄层细胞学检查(TCT)。结果:共检出宫颈细胞学和(或)DNA倍体异常693例,液基细胞学阳性270例,阳性率4.5%。DNA倍体分析系统检出668例异常,阳性检出率11.1%。以≥3个DNA异倍体出现作为活检标准,宫颈病变的敏感性78.9%,特异性43.27%,阳性预期值63.13%,阴性预期值62.5%。以液基细胞学检查LSIL以上作为活检标准,宫颈病变的敏感性43.75%,特异性79.81%,阳性预期值72.72%,阴性预期值53.55%。结论:宫颈细胞DNA倍体分析系统具有客观性及较高的敏感性,与宫颈液基细胞学检查联合应用,可减少误诊、漏诊,提高检查的特异性。

DNA梯度化分析软件系统在细胞凋亡定量检测中的应用

目的:检验我们设计的DNA梯度化分析软件在细胞凋亡定量检测中的应用价值 方法:用Camptothesin(CAM)诱导U937细胞株凋亡,通过该系统计算DNA琼脂糖凝胶电泳后DNA的梯度值,并与凋亡细胞胞浆寡聚核小体的Elisa检测值进行相关性分析.结果:随着CAM浓度的增加,DNA琼脂糖凝胶电泳后梯度化程度越明显,测出的梯度值也越大,而且与胞浆寡聚核小体的Elisa检测值呈正相关(r=0.989,p<0.01)结论:利用DNA梯度化分析系统可对琼脂糖凝胶电泳后的凋亡细胞DNA片段,进行定量分析,提供简便直接的方法.

细胞DNA倍体分析系统结合HR-HPV在宫颈癌筛查中的应用

目的评估DNA倍体分析系统检测结合HR-HPV检测在宫颈癌及癌前病变筛查中的临床意义。方法随机选取2019年1000例行宫颈活检及宫颈细胞学检查的标本,同时行DNA倍体分析系统检测和HR-HPV检测,并对结果进行统计学分析。结果CIN I及以上的阳性检出率:HR-HPV阳性率67.6%~90.9%;DNA倍体分析结果阳性率5.3%~76.4%;HR-HPV+DNA倍体分析结果阳性率70.7%~100%。结论随着组织病理恶性度升高,HR-HPV及DNA倍体分析结果阳性率都有不同程度的升高。DNA倍体分析系统结合HR-HPV检测,可以提高宫颈癌及癌前病变的检出率,有效的提高检查的准确性。

联合运用宫颈液基细胞学及DNA定量分析系统诊断宫颈病变的临床价值

目的探讨联合运用宫颈液基细胞学及细胞DNA倍体定量分析系统在宫颈病变诊断中应用价值。方法女性患者1 002例分别采用宫颈液基细胞学检查和细胞DNA倍体定量分析系统检测,并将结果进行对比分析。结果宫颈液基细胞学检测为高级别以上病变(HSIL及SCC)13例,DNA定量分析检测均为阳性;宫颈液基细胞学检测为非典型鳞状上皮细胞病变(ASC-US))28例,其中15例DNA定量分析检测为阳性,11例为异倍体细胞<3个而建议4～6个月复查。39例宫颈液基细胞学检测正常,而DNA定量分析检测为异倍体<3个,建议4～6月复查;DNA定量分析检测敏感性为97.44%,特异性为12.50%;液基细胞学检测的敏感性为73.33%,特异性为33.33%。结论联合运用宫颈液基细胞学及细胞DNA倍体定量分析系统能使宫颈病变检出率明显提高,尤其对诊断为非典型鳞状上皮细胞的患者有分流作用。

DNA定量分析系统用于非典型鳞状细胞检查的评估

目的评价DNA定量分析系统用于非典型鳞状细胞患者宫颈癌及癌前病变筛查的应用价值。方法对2008年6月～2010年11月在钟祥市计划生育服务站检测出的ASC病例60例,其中意义不明的非典型鳞状上皮细胞52例,非典型鳞状上皮内病变,不排除高度病变8例,进行DNA定量分析系统检测,并以病检结果为标准,评价DNA定量分析系统筛查ASC中宫颈癌及癌前病变的敏感性、特异性。结果在52例ASCUS病例中,进行DNA定量分析系统检测,敏感性为97.1%,特异性为90.0%;在8例ASC-H病例中,敏感性为100%,特异性为66.7%。结论 DNA定量分析系统筛查ASC中宫颈癌及癌前病变,敏感性与特异性均较好,能使ASC的病变及处理更明确。

细胞DNA倍体分析与TCT在宫颈癌及癌前病变早期筛查中的临床对比

宫颈癌的发生经历了从前驱病变到癌变的漫长历程，故通过对宫颈癌前期病变的筛查成为其最重要的治疗手段。本文通过对我院妇科门诊从2012年5月至2013年5月就诊的3220例患者，同时采用宫颈细胞DNA倍体分析与TCT检测，并对阳性病例进行阴道镜下病理学活检，对比两种方法对宫颈癌及癌前病变早期筛查的临床意义。

内蒙古朱开沟遗址古代居民线粒体DNA分析

目的:探讨内蒙古朱开沟古代居民的遗传关系。方法:对9例保存较好的个体牙齿的线粒体基因组的高可变一区进行扩增和测序,与内蒙古饮牛沟古代人群及现代亚洲人群对比进行系统发育分析,并推测单倍型类群归属。结果:获得7例朱开沟遗址古代居民线粒体基因组高可变一区364 bp的序列,共检测出15个突变位点,界定7种单倍型,并归属到单倍型类群。结论:朱开沟古代居民在母系遗传上与其后的饮牛沟墓地古代居民及现代内蒙古地区人群关系密切,内蒙古中南部地区人群母系遗传结构具有连续性。

879例女性宫颈液基细胞学检查与DNA定量分析法的对比研究

目的比较液基细胞学检查和DNA定量分析法在女性宫颈病变中的应用及其临床意义。方法对参与对比的879例妇女用宫颈刷取材,进行液基薄层制片,分别进行巴氏染色和DNA染色。对巴氏染色片做液基细胞学检查,并对DNA染色片进行全自动扫描诊断。结果对液基细胞学检查结果显示病变程度在非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)意义不明以上病例和全自动DNA倍体分析系统检测见异倍体细胞部分病例,建议进一步做阴道镜检查及宫颈活检。28例妇女做了病理活检。以细胞诊断结果为标准,计算出细胞DNA定量分析法在ASCUS以上宫颈病变的检出率。结论细胞DNA定量分析法与液基细胞学检查组合应用,能明显提高宫颈癌及癌前病变的阳性检出率,对我国女性宫颈癌的防治具有重要的意义。

细胞DNA定量分析技术在尿路上皮癌诊断中的应用价值

目的:探讨细胞DNA定量分析技术(DNA-ICM)在尿路上皮癌诊断中的应用价值。方法:收集162例尿液标本,其中92例来自尿路上皮癌患者,70例来自良性泌尿系统疾病患者,分别采用DNA-ICM和液基细胞学(LBC)两种方法进行检查,并将两种结果对比。结果:细胞DNA-ICM在尿路上皮癌诊断中的敏感度为65.2%、特异度为100%,LBC分别为27.2%、98.6%,DNA-ICM检查的敏感度高于LBC,差异有统计学意义(P<0.01)。上尿路上皮细胞癌患者尿液标本中DNA-ICM敏感度为77.1%,高于膀胱尿路上皮细胞癌患者尿液标本的57.9%,但两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:细胞DNA-ICM在诊断尿路上皮癌方面有较大应用价值,可提高尿脱落细胞学的阳性检出率,是尿路上皮癌诊断和随访的有效检查方法。

痰液细胞DNA定量分析在原发性肺癌中的诊断价值

目的:探讨痰液细胞DNA定量分析技术(DNA-ICM)在原发性肺癌诊断中的临床意义。方法:分别采用细胞DNA-ICM和液基细胞学技术(LBC)对300例可疑肺癌患者痰液进行检查,并将结果进行比较分析。结果:细胞DNA-ICM在痰液中的阳性检出率为37.3%(112/300), LBC在痰液中的阳性检出率为21.0%(63/300),差异有统计学意义(P<0.01)。两种方法联合检查的痰检阳性率为38.7%(116/300),高于LBC,差异有统计学意义(P<0.01);也高于DNA-ICM,但差异无统计学意义(P>0.05)。细胞DNA-ICM的敏感度为42.6%(112/263),特异度为100%(37/37);LBC敏感度为23.2%(61/263),特异度为94.6%(35/37),细胞DNA-ICM的敏感度高于LBC,差异有统计学意义(P<0.01)。在病理组织分型不同的肺癌患者中,DNA-ICM在鳞癌中的敏感度高于腺癌(P<0.01)。DNA-ICM在早期肺癌及晚期肺癌检查结果中无统计学差异(P>0.05)。结论:细胞DNA-ICM技术是一种敏感而特异的肺癌筛查技术,在肺癌早期诊断方面具有一定优势,可与LBC联合应用于肺癌的筛查。

DNA倍体分析筛查宫颈及癌前病变的意义

目的：探讨细胞DNA倍体分析在宫颈筛查中的应用.方法：宫颈糜烂患者500例,由妇科医生留取标本,用麦克奥迪（厦门）全自动细胞图像分析系统对标本行Feulgen染色后进行DNA定量分析系统自动扫描分析;对有异常者进一步作阴道镜检查或活检确诊.结果：500例中发现有异常者60例,其中1~2个异倍体细胞的36例,≥3个异倍体细胞的24例,病理检查结果显示：正常者4例,宫颈炎19例,宫颈上皮内瘤样病变CINⅠ15例,CINⅡ8例,CINⅢ 11例,宫颈癌3例,DNA倍体分析系统与病理诊断符合率为93.3%（56/60）.结论：全自动DNA倍体分析系统可以作为辅助方法,对宫颈及其癌前病变早期诊断具有重要的参考价值.