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DNA功能化金纳米颗粒在沙眼衣原体检测中的应用 被引量:1
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作者 周朴帆 肖福兵 +4 位作者 曾心靛 刘子卿 陈曦 唐婷 陈丽丽 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期428-433,共6页
目的建立一种基于DNA功能化金纳米颗粒检测沙眼衣原体的新方法。方法分析沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)Trp B保守基因序列,设计2条特异性寡核苷酸链,一条进行巯基修饰后与柠檬酸钠还原法制备的金纳米颗粒结合得到信号探针,另一... 目的建立一种基于DNA功能化金纳米颗粒检测沙眼衣原体的新方法。方法分析沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)Trp B保守基因序列,设计2条特异性寡核苷酸链,一条进行巯基修饰后与柠檬酸钠还原法制备的金纳米颗粒结合得到信号探针,另一条用生物素标记作为捕获探针。制备的靶序列与两种探针在包被链霉亲和素的酶标板内形成牢固的带有金纳米颗粒的核酸复合物,加入银染液后,经酶标仪读取630 nm处A值或肉眼观察96孔板底灰度。对建立的检测体系进行特异性和灵敏度验证。用建立的检测体系及荧光定量PCR法对可疑临床沙眼衣原体样本进行检测。结果制备的金纳米颗粒经透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察确定其粒径约20 nm,吸收峰为518 nm,金纳米颗粒标记的信号探针吸收峰为520 nm;不同靶序列浓度的银染结果可用肉眼进行分辨。优化后的检测体系为:反应时间2 h,杂交温度25℃,生物素探针浓度100 nmol/L,银染色时间8 min。建立的方法能特异性检测沙眼衣原体核酸序列,与其他生殖道病原菌无交叉反应,最低检测浓度达55 pmol/L。49份临床样本检出率为61%,与荧光定量PCR法相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立了一种简便、高效、特异的沙眼衣原体检测方法,成本低廉,为沙眼衣原体的临床病原学诊断提供了新的途径。 展开更多
关键词 dna功能化 金纳米颗粒 沙眼衣原体
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基于功能化双链DNA复合纳米结构的荧光适体传感器
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作者 任林娇 刘玉鑫 +4 位作者 陈高凯 马世林 张培 秦自瑞 姜利英 《分析试验室》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1243-1251,共9页
针对生化及临床检测分析中生物小分子浓度低、变化范围大等特点,基于功能化双链DNA复合纳米结构,构建了一种宽范围、低检出限的荧光传感检测方法。功能化双链DNA由3’端含有多个碱基T的核酸适体(PolyTn-Apt)和5’端修饰FAM荧光基团的互... 针对生化及临床检测分析中生物小分子浓度低、变化范围大等特点,基于功能化双链DNA复合纳米结构,构建了一种宽范围、低检出限的荧光传感检测方法。功能化双链DNA由3’端含有多个碱基T的核酸适体(PolyTn-Apt)和5’端修饰FAM荧光基团的互补链(cDNA@FAM)构成,在纳米金(AuNPs)表面修饰该功能化双链DNA,由于荧光共振能量转移作用,FAM荧光处于猝灭状态;加入被测物后,核酸适体与被测物结合,双链被打开,FAM远离AuNPs,荧光恢复。碱基T的存在可使AuNPs结合更多的双链结构,扩大其传感检测范围。结果表明:以该方法制备的三磷酸腺苷(ATP)传感器,检测范围可达1 nmol/L~100μmol/L,跨5个数量级,检出限为0.41 nmol/L,且特异性明显;以该方法制备的氨苄西林(AMP)传感器,检测范围可达1 nmol/L~50μmol/L,跨4个数量级,检出限为0.42 nmol/L,且特异性突出。该方法具有一定的普适性,通过置换核酸适体种类,有望对多种生物小分子实现宽范围、低检出限的定量检测。 展开更多
关键词 功能化双链dna 荧光传感器 宽范围 三磷酸腺苷 氨苄西林
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Mitochondrial dysfunction and aging muscle
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作者 MENG Si-jin YU Long-jiang ZHANG Li 《Journal of Life Sciences》 2009年第5期59-65,共7页
Mitochondrial dysfunction in aged skeletal muscle has been mainly attributable to mtDNA deletions, uncoupling in oxidative phosphorylation, leading to ATP deficit. Moreover, the accumulation of damaged mitochondria is... Mitochondrial dysfunction in aged skeletal muscle has been mainly attributable to mtDNA deletions, uncoupling in oxidative phosphorylation, leading to ATP deficit. Moreover, the accumulation of damaged mitochondria is associated with imperfect autophagocytosis and declined biogenesis of efficient mitochondria. Mitochondria-associated apoptotic signaling is involved in the loss of fibers and atrophy of the remaining fibers by ROS, TNF-α, and denervation, leading to sarcopenia. Current investigations have indicated that exercise, especially resistance exercise, has extensively preventive effects on sarcopenia. Whether caloric restriction in aged animals is suitable for aged people remains to be further clinlically experimented. Additionally, it will be interesting to develop effectively supplementary and alternative medical methods associated with Chinese tonifying herbs to prevent or reverse sarcopenia in the future because of their efficacy and less frequent side effects. 展开更多
关键词 mitochondrial dysfunction SARCOPENIA APOPTOSIS INTERVENTION Chinese medicine
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