DNA回收试剂盒技术标准研究

通过对DNA回收试剂盒质量标准现状研究以及国内外典型品牌DNA回收试剂盒的测试和比较分析,建议DNA回收试剂盒技术标准,包括柱子最大承载量、可承受最大质量、最小洗脱体积、最大容积、典型回收率等技术参数。这有助于统一规范DNA回收试剂盒技术指标,为建立DNA回收试剂盒技术标准奠定良好基础,对提高DNA回收试剂盒质量具有实际意义。

一种简单高效的聚丙烯酰胺凝胶DNA回收方法

笔者介绍了一种简单的聚丙烯酰胺凝胶DNA回收方法(直取法),通过与传统煮沸法比较以证明直取法回收聚丙烯酰胺凝胶DNA的高效性。以木薯cDNA为材料,将直取法与常规煮沸法从实验方法、杂带污染率以及回收扩增率3个方面进行比较。实验结果表明:直取法较煮沸法简单、快速;煮沸法的杂带污染率为59.09%,直取法为43.08%;煮沸法的平均产物量约为40ng/μL,直取法约为60ng/μL。研究结果表明,直取法相对煮沸法简单,快速,扩增效率高,杂带污染几率小。

琼脂糖凝胶电泳中DNA回收方法的比较

实验采用直接切取琼脂糖凝胶,进行Lambda DNA/EcoR I+H indIIIM arker的回收,将其与试剂盒回收进行比较,并对比切下的凝胶立即回收和在-20℃冰冻数小时回收的效果,结果表明实验采用的方法与试剂盒的比较产量相当,且重复性好,达到了分子生物学实验的要求。尤其实验方法在大片段的回收(21226bp)平均回收率是43.5956%与试剂盒的回收率:38.9761%相比有明显的优势,非常适合大多数实验室使用。

利用高效的大片段DNA回收方法改良Fosmid文库的构建

外源DNA插入片段为40 kb左右的Fosmid文库在基因组学研究中有广泛的应用,但长期以来,40 kb外源片段的分离与纯化依赖于传统的切胶并电洗脱至透析袋的方法,难以得到足够量的DNA片段,极大降低Fosmid文库构建的成功率。通过改进全自动核酸/蛋白质回收系统SageELF的操作流程,建立一种简单、便捷、高效地回收40 kb左右DNA片段的方法,并用其成功地构建高质量的Fosmid文库。从文库中随机挑选的25个单克隆,经过测序及酶切分析,发现该文库中插入的DNA片段大小为37.9±5.2 kb。以上结果表明,利用改良的操作方法回收40 kb基因组DNA,操作简捷、高效,片段大小精准;另外,用该DNA片段构建的Fosmid文库,插入片段比较集中,有利于后续的基因组学分析。

日本开发出DNA回收稀土新技术

《日本经济新闻》讯，广岛大学与爱信精机子公司爱信？COSMOS研究所日前共同研发出使用生物DNA回收稀土的技术。该技术通过使大麻哈鱼、鳟鱼的DNA吸附稀土类．金属并注入酸性水溶液，可回收纯度高达90％以上的钕、镝等。

日本大学开发新技术 利用三文鱼DNA回收稀土

据《日本经济新闻》网站报道，日本广岛大学和爱信精机下属的研究开发公司爱信COSMOS研究所共同开发出使用生物DNA来回收高科技产品零部件废弃物中所含稀土的技术。该技术使用三文鱼或鳟鱼的DNA吸附稀土，并注入酸性水溶液后进行分离回收。

日大学开发出使用三文鱼DNA回收稀土的技术

据《日本经济新闻》网站8月21日报道，日本广岛大学和爱信精机下属的研究开发公司爱信COSMOS研究所共同开发出使用生物DNA来回收高科技产品零部件废弃物中所含稀土的技术。该技术使用三文鱼或鳟鱼的DNA吸附稀土，并注入酸性水溶液后进行分离回收。

回收琼脂糖凝胶中DNA的简便方法

多年来国内分子生物学实验室所采用的几种从琼脂糖凝胶中回收DNA的方法不同程度地存在着各种问题。现介绍一种新的从琼脂糖凝胶上分离和提取DNA的简易方法,采用实验室常用的吸附柱中的吸附膜对DNA进行拦截、纯化和回收。实验证明这种方法回收DNA具有简便快捷、成本低和效率高等优点,是一种切实可行的方法。

琼脂糖凝胶中DNA片段的挤压回收法

为了简化琼脂糖凝胶中DNA片段的回收,该文报道一种新的挤压回收法。将含有DNA片段的凝胶块放在折叠的封口膜之间,然后用一小塑料平板将凝胶块中的DNA溶液用力挤出,用移液枪把所有挤压出的DNA溶液放入effendorf管中,然后用常规的苯酚抽提法进行纯化。DNA回收率达到40-60%(w/w)。该方法简单而有效,且回收的DNA能够直接应用于酶切、连接及PCR等各种分子生物学操作。

胍盐裂解液对自动化提取工作站DNA回收率的影响

目的研究不同稀释度胍盐裂解液对自动化提取工作站DNA回收效率的影响。方法制备不同浓度的DNA样本,并将EQ1000法医DNA提取试剂盒中的胍盐裂解液梯度稀释,在本实验室配置的自动化提取工作站上,运行"工作站磁珠法"提取程序,AB-7500型荧光定量PCR仪检测提取前后的样本DNA浓度。选取2～7号梯度组DNA回收效率数据进行统计学检验,比较不同稀释度胍盐裂解液的处理对样品DNA回收效率的影响。结果 90%～60%稀释度胍盐裂解液组样品回收效率在66%左右;50%～20%稀释度组样品DNA回收效率在41%左右;稀释度在50%以下与60%以上组样品回收效率之间差异极显著。结论应用"工作站磁珠法"提取生物检材DNA,其DNA回收效率受胍盐裂解液浓度的影响。

一种简便、高效、经济的从凝胶中回收DNA的方法

目的:尝试一种简便、高效的从凝胶中回收DNA的方法。方法:在Eppendorf管的管底用注射器扎孔,将一小团用Eppendorf管融化后拉成的细丝放入管中,把含有DNA的凝胶放在细丝上,离心,收集从管底流出的液体,经酚氯仿抽提后用乙醇沉淀DNA。结果:经过简单的离心即可近乎100%地回收凝胶中的DNA。结论:使用该方法从琼脂糖凝胶回收DNA,操作简单,回收率高,无其他试剂污染。

从琼脂糖凝胶中高效回收DNA技术的探讨

用两只离心管制成的凝胶过滤装置,从电泳后的琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简易方法。它依次包括以下步骤:凝胶过滤装置的制作、凝胶切割、凝胶低温冷冻、低温高速离心、ddH2O洗胶、DNA纯化和回收效果检测等。用此方法回收的DNA片段产率高、质量纯,可直接用于分子生物学实验的后续操作,如载体连接、PCR模板获得、DNA探针制备、基因测序等。其优点是:DNA片段的回收率高(90%以上),质量好;操作简便,耗时短;回收装置简单,成本低廉,可进行商品化开发。

一种高效、快速从凝胶中回收DNA的方法

目的:介绍了一种从普通琼脂糖电泳中回收DNA的简便、快捷、高效且廉价的方法。方法:利用0.5 mL离心管、1.5mL离心管、尼龙膜做成的一个小装置。把含有DNA的凝胶放在膜上,离心,收集从管底流出来的液体,用乙醇沉淀DNA。结果:最终回收率为60%左右,回收率大约为市售试剂盒的90%,接近市售DNA回收试剂盒。结论:该方法操作简单,回收率高,无其他试剂污染。

一种从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简单电洗脱装置

我们设计了一种简单电洗脱装置，从琼脂糖胶中回收ＤＮＡ。该装置由两个带旋盖的小管、两块透析膜和一个凝胶屏障组成。在电场作用下，ＤＮＡ从凝胶中迁移出来，通过凝胶屏障进入由凝胶屏障和透析膜组成的回收小仓。用微量吸样器收集ＤＮＡ，乙醇沉淀和清洗。该法ＤＮＡ的回收率约８５％；回收的ＤＮＡ可用于基因工程常规实验。

一种高效·快速回收DNA片断的方法

[目的]介绍一种高效、快速回收DNA片段的方法。[方法]在0.5 ml的EP管的管底用大头针扎孔,将一小块玻璃棉纸放入管中,把含有DNA片段的凝胶放在纸上,速冻后离心,收集从管底流出的液体,用乙醇沉淀回收,并且与TaKaRa回收试剂盒的结果做对比。[结果]该方法与试剂盒产量相当。[结论]该方法是一种经济、快速、高效回收DNA片段的方法。

一种从聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA片段的简易方法

从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段是分子生物学中的常用技术,本文在对目前几种常用回收方法作深入细致分析的基础上,通过设计对比实验找到一个既简单又经济、实用而有效的回收方法。

高效回收琼脂糖凝胶中质粒DNA的方法

多年来,在基因工程操作中所采用的几种从琼脂糖凝胶中回收DNA的方法不同程度地存在着各种问题。从琼脂糖凝胶中分离和提取DNA的方法具有简便快捷、成本低和效率高等优点,可直接用于各种分子克隆操作,是一种切实可行的方法。

从琼脂糖电泳凝胶中回收DNA的几种简便方法

介绍两类从普通琼脂糖电泳凝胶中回收ＤＮＡ的简便、快捷、高效且廉价的方法．第一类为电泳洗脱法．方法ａ：利用１．５ｍＬ微量离心管、ｌｍＬ吸头、尼龙网膜和透析膜做成的一个小装置，快速有效回ＤＮＡ，最终回收率为７０％左右．方法ｂ：不用ＤＥＡＥ－纤维素膜，而用透析膜在凝胶中作出横隔挡在ＤＮＡ条带前，最终回收率为５０％左右；第二类为冰冻融解法，最终回收率也在５０％左右．如果联合使用冰冻融解法和电泳洗脱法，回收率可进一步提高至９０％．

从非变性聚丙烯酰胺凝胶中快速高效回收DNA片段

获得特异性的DNA是开展多种分子生物学试验的前提,具有高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳是纯化特异性DNA的首选。借助液氮对凝胶的固化作用,介绍了通过研磨破坏聚丙烯酰胺凝胶结构回收纯化DNA的方法。将通过该方法回收纯化的DNA和采用琼脂糖凝胶电泳回收纯化的DNA,经由聚丙烯酰胺凝胶电泳的进一步检测,结果显示,该方法与琼脂糖凝胶电泳回收法相比,所获得DNA的纯度高,特异性好,且效率相当。在提高DNA特异性的同时也兼具了经济高效耗时少等优点,可以广泛应用。