食管癌前病变组织DNA含量及端粒酶变化探讨

目的 检测其组织细胞内DNA含量和端粒酶变化 ,探讨食管癌前病变的早期诊断方法。方法 电子胃镜下观察食管黏膜变化 ,用碘液染食管黏膜上皮 ,观察颜色变化 ,用流式细胞仪测定组织细胞的DNA增殖指数和端粒酶的表达水平。结果 正常组织和轻度不典型增生组织的DNA增殖指数 (DI)明显低于癌组织 (P <0 .0 5 ) ;正常组织端粒酶的含量明显低于癌组织 (P <0 .0 1)和中、重度不典型增生组织 (P <0 .0 5 ) ;轻度不典型增生组织端粒酶水平也低于癌组织和中、重度不典型增生组织 (P <0 .0 1)。结论 DNA指数、细胞增殖率的测定在癌前病变诊断方面的应用还有待进一步的研究 ;端粒酶表达在食管上皮中、重度不典型增生时就发生了明显变化 ,是食管病变的早期指标 。

鲫鱼淋巴细胞转化PHA刺激剂量及流式细胞仪检测参数探讨

从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用RPM I-1640培养基培养48 h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素（phytohem agglutin in,PHA）（0μg/mL、80μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL、1 000μg/mL、1 200μg/mL）对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量。结果表明：（1）在PHA浓度0~400μg/mL的范围内,随着PHA浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当PHA的浓度增加到1 200μg/mL,淋巴细胞转化率明显下降。其中PHA浓度为400μg/mL时,淋巴细胞转化率最高,显著高于低浓度组（80μg/mL）和高浓度组（1000μg/mL、1200μg/mL）（P〈0.05）,略高于中浓度组（200μg/mL、600μg/mL、800μg/mL）,差异不显著（P〉0.05）。由此可见,在本试验条件下,PHA体外刺激异育银鲫淋巴细胞转化的最适剂量为400μg/mL。（2）用流式细胞仪检测细胞内DNA合成情况,Mu lticyc le AV软件进行细胞周期分析,通过DNA增殖指数测定淋巴细胞转化率是一种简单、可靠的方法。需要注意的是,采用流式细胞仪测定鲫鱼淋巴细胞转化率时,FS/SS参数设置为FS：Volts 62-gain 100;SS：Volts 1000-gain 500能够获得清晰的图像。