共刺激分子B7H3通过调控DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达对乳腺癌多柔比星化疗的影响

目的探讨共刺激分子B7H3(costimulatory molecule B7H3,B7H3)通过调控DNA拓扑异构酶Ⅱα(DNA topoisom eraseⅡalpha,TOP2A)的表达对乳腺癌多柔比星化疗敏感性的影响。方法收集临床标本,采用免疫组织化学染色验证B7H3表达与多柔比星化疗敏感性的相关性。采用成簇规律间隔短回文重复/Cas9基因编辑技术敲除B7H3,通过蛋白质印迹法和流式细胞术验证敲除结果。采用半抑制浓度值分析、集落形成、蛋白质印迹法检测凋亡蛋白、荧光双染色检测凋亡细胞以及细胞周期测定等方法验证B7H3表达与多柔比星作用的敏感性。小干扰TOP2A及其过表达TOP2A回复实验检测细胞凋亡。构建小鼠皮下成瘤模型验证体内B7H3表达与多柔比星化疗的作用。结果高表达B7H3的肿瘤组织对多柔比星治疗更加敏感。成功构建B7H3敲除的乳腺癌细胞。B7H3高表达的乳腺癌细胞对多柔比星作用更敏感。B7H3通过激活核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)途径促进TOP2A的表达,进而增加乳腺癌细胞对多柔比星作用的敏感性。小鼠体内实验证明,B7H3高表达可增加乳腺癌对多柔比星化疗的敏感性。结论B7H3通过激活NF-κB通路调控TOP2A的表达使乳腺癌对多柔比星化疗更敏感。

肾上腺嗜铬细胞瘤患者组织葡萄糖转运蛋白1和拓扑异构酶ⅡA表达与临床特征及预后的相关性分析

目的探讨葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和拓扑异构酶ⅡA(TOP2A)在肾上腺嗜铬细胞瘤(PPGL)患者组织中的表达与临床特征及预后的相关性。方法选取2014年3月至2020年6月于新疆维吾尔自治区人民医院行手术切除的120例PPGL组织作为实验组。另收集同期行手术切除的100例无功能肾上腺腺瘤的肾上腺组织作为对照组。采用免疫组织化学染色法检测组织中GLUT1和TOP2A表达情况。通过Cox回归分析PPGL患者预后的影响因素。结果实验组中GLUT1的低表达率和TOP2A的高表达率均高于对照组[51.7%(62/120)比14.0%(14/100)、52.5%(63/120)比19.0%(19/100)],差异均有统计学意义(χ^(2)=34.225、31.829,均P<0.001)。GLUT1、TOP2A表达水平与镜下组织浸润和Ki-67有关(均P<0.05)。预后良好组中GLUT1高表达和TOP2A低表达比例均高于预后不良组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。单因素分析结果显示,患者镜下组织浸润、Ki-67、GLUT1、TOP2A均是影响预后的因素(均P<0.001)。Cox多因素回归分析显示TOP2A、镜下组织浸润及Ki-67均是导致PPGL患者预后不良的危险因素,GLUT1为保护因素(均P<0.001)。结论GLUT1在PPGL组织中呈低表达,TOP2A呈高表达,与患者预后不良有关。

P-gp、GSTπ联合TOPOⅡα检测对三阴性乳腺癌新辅助化疗病理完全缓解的预测价值

目的分析P⁃糖蛋白(P⁃gp)、谷胱甘肽转移酶(GSTπ)联合拓扑异构酶Ⅱα(TOPOⅡα)检测对三阴性乳腺癌(TNBC)患者新辅助化疗(NAC)病理完全缓解(pCR)的预测价值。方法本研究为一项回顾性、单中心、双盲法的试验,选取郑州大学第一附属医院自2020年3月至2022年10月,经纳入、排除标准共筛查135名TNBC患者作为研究对象,均为女性。采用SP免疫组化法检测P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα,分析TNBC患者NAC疗效,行单因素、多因素分析P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα表达与NAC pCR的关系,绘制ROC曲线分析P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα单一及联合检测对TNBC患者NAC pCR的预测价值。结果NAC后,cCR者47例(34.81%),cPR者72例(53.33%),SD者12例(8.90%),PD者4例(2.96%),总有效率88.14%;pCR者21例(15.55%)。经单因素分析,P⁃gp、GSTπ阳性表达pCR率低于P⁃gp、GSTπ阴性表达pCR率,TOPOⅡα阳性表达pCR率则高于阴性性表达pCR率,差异均有统计学意义(P<0.05)。P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα表达与pCR具有显著相关性[OR(95%CI)分别为1.446(1.127~1.858)、1.640(1.304~2.063)、1.548(1.227~1.984),P<0.05]。P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα联合检测对NAC pCR灵敏度、特异度分别为90.73%、86.73%,AUC(95%CI)为0.813(0.743~0.908),均高于上述指标单一检测(P<0.05)。结论P⁃gp、GSTπ和TOPOⅡα表达与TNBC患者NAC pCR有一定关联,且通过联合上述指标检测NAC pCR有着较高预测价值,有利于帮助临床医生为TNBC患者进一步制定更合适的治疗策略。

骆驼蓬种子提取物及其β咔保啉生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用

目的探讨去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱及哈尔满碱(止咳药用植物)对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用。方法从体外培养的Q3肝癌细胞中,提取分离DNA拓扑异构酶Ⅱ;以阿霉素为阳性对照,用琼脂糖凝胶电泳法检测药物对DNA拓扑异构酶Ⅱ的作用。结果骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱及哈尔满碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性均有一定的抑制作用。结论对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用是骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱等生物碱抗癌作用和细胞毒作用的机制之一。

原花青素对MNNG致DNA损伤及拓扑异构酶Ⅱ的影响

目的 观察原花青素对DNA损伤的保护作用及对黑色素瘤细胞中拓扑异构酶的影响 ,探讨原花青素癌化学预防的作用机制。方法 单细胞电泳法检测羟自由基对L92 9细胞DNA损伤的尾迹 ,用 [H3]TdR参入细胞DNA中进行标记 ,测定上清液中的放射强度来判定MNNG对DNA损伤 ;从黑色素瘤肿瘤细胞中提取拓扑异构酶 ,用琼脂糖凝胶电泳测定活性。结果 原花青素可以减轻DNA损伤尾迹及MNNG对DNA的损伤。但对黑色素瘤肿瘤细胞中拓扑异构酶无抑制作用。结论 原花青素对羟自由基及致癌剂MNNG引起的细胞DNA损伤有一定的保护作用。

DNA拓扑异构酶Ⅱ研究进展

TopoⅡ不仅对细胞的正常生命活动至关重要,而且在肿瘤发生、发展以及疗效等方面均扮演重要 角色。关于TopoⅡα表达调控及其影响因素大致可以分为三个方面。其一,蛋白激酶类成分多直接作用于TopoⅡα蛋白质,影响其生物活性,并且与TopoⅡα活性的周期性特点有关,其二,既能作用于基因水平又能从蛋白质水平影响TopoⅡα的物质,主要包括p53和Rb蛋白等。最后,转录调节因子类成分则主要是从基因水平调控TopoⅡα的表达。针对TopoⅡα和β异同,二者不仅在结构和分布方面有所差别,而且在功能上也各有侧重。特别是在药物敏感性与抗药性方面TopoⅡα与β也有一定的区别。因此,加强对TopoⅡα表达调控的研究,特别是开展对TopoⅡβ表达调控研究,以及深入探讨TopoⅡα和β结构和功能特点,不但对于了解相关作用机制,而且对提高肿瘤诊断、治疗效果具有重要意义。

DNA拓扑异构酶Ⅱα、PCNA在人脑星形细胞瘤中的表达及与预后生存的关系(英文)

目的研究DNA拓扑异构酶Ⅱα(Topo-Ⅱα)、增殖细胞核抗原(PCNA)在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达,并探讨其与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法应用SABC免疫组化技术,检测32例星形细胞瘤ToPo-Ⅱα、PCNA的表达,并针对其与恶性程度及预后生存状况的关系比较进行统计学分析。结果星形细胞瘤Topo-Ⅱα、PCNA的表达在低度恶性组与高度恶性组之间的差异有统计学意义(P<0.01);Log-rank检验及Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Topo-Ⅱα、PCNA的表达强度与星形细胞瘤的预后生存时间呈显著的负相关性,Topo-Ⅱα、PCNA的表达水平反映了星形细胞瘤患者的预后情况。结论Topo-Ⅱα、PCNA在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达与其恶性程度相关,与患者的预后生存相关。联合检测二者的表达水平对判断肿瘤的恶性程度有一定的参考意义,同时,这两个因子可作为判断与预测星形细胞瘤患者预后的重要指标。

二去水卫矛醇对肺癌NCI-H460细胞DNA拓扑异构酶Ⅱ的抑制作用

目的评价二去水卫矛醇(dianhydrogalactitol,DAG)在肺癌NCI-H460细胞上的抗肿瘤作用,探讨其抗肿瘤作用机制。方法采用CCK-8法、细胞克隆形成实验,评价DAG对NCI-H460细胞的增殖抑制作用。显微拍照观察细胞形态改变;Hoechst 33342检测细胞核染色质的变化。Real time PCR法检测拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)mRNA的表达水平。Western blot法检测TopoⅡ蛋白表达水平。另外,应用计算机模拟分子对接技术来预测DAG与TopoⅡ的相互作用。结果 CCK-8法检测结果显示,DAG对NCI-H460细胞的体外抗肿瘤活性明显。细胞克隆形成实验结果表明,DAG能持续抑制肿瘤细胞的增殖。Hoechst 33342检测细胞凋亡发现细胞核染色质发生明显改变。Real time PCR和Western blot检测结果显示TopoⅡ mRNA和蛋白表达量降低。计算机模拟分子对接显示DAG与TopoⅡ有相互结合作用。结论DAG能明显抑制NCI-H460细胞的增值,作用机制研究表明DAG能降低TopoⅡ mRNA和蛋白水平,并与TopoⅡ结合,最终可能导致DNA双链断裂,引起细胞死亡。

DNA拓扑异构酶Ⅱα、PCNA在人脑星形细胞瘤中的表达及与预后生存的关系

目的 研究DNA拓扑异构酶Ⅱα(Topo -Ⅱα)、增殖细胞核抗原(PCNA)在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达,并探讨其与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法 应用SABC免疫组化技术,检测32例星形细胞瘤ToPo Ⅱα、PCNA的表达,并针对其与恶性程度及预后生存状况的关系比较进行统计学分析。结果 星形细胞瘤Topo Ⅱα、PCNA的表达在低度恶性组与高度恶性组之间的差异有统计学意义(P <0 0 1) ;Log rank检验及Kaplan Meier生存曲线分析显示,Topo Ⅱα、PCNA的表达强度与星形细胞瘤的预后生存时间呈显著的负相关性,Topo Ⅱα、PCNA的表达水平反映了星形细胞瘤患者的预后情况。结论 Topo Ⅱα、PCNA在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达与其恶性程度相关,与患者的预后生存相关。联合检测二者的表达水平对判断肿瘤的恶性程度有一定的参考意义,同时,这两个因子可作为判断与预测星形细胞瘤患者预后的重要指标。

p53与DNA拓扑异构酶Ⅱα在胆囊腺癌中的表达及临床意义

目的探讨突变型p53与DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoisomeraseⅡα,TOPOⅡα)在胆囊癌前病变及腺癌中的表达特点及临床意义。方法通过免疫组织化学方法检测胆囊腺肌瘤样增生(腺肌瘤/病,n=29)、慢性胆囊炎(n=52,对照组)、胆囊低级别上皮内瘤变(n=21)、胆囊高级别上皮内瘤变(n=19)、胆囊浸润性腺癌(n=64)中p53和TOPOⅡα的表达;分析p53和TOPOⅡα与胆囊腺癌临床病理参数的关系以及二者表达的相关性。结果 p53和TOPOⅡα在胆囊腺肌瘤样增生(腺肌瘤/病)中表达极低,而在胆囊腺癌中呈高表达(P<0.05)。胆囊腺癌中p53的表达(78.12%,50/64)明显高于慢性胆囊炎(1.92%,1/52)、低级别上皮内瘤变(23.81%,5/21)和高级别上皮内瘤变(47.37%,9/19)(χ~2=85.395,P<0.05);胆囊腺癌中TOPOⅡα的表达(76.56%,49/64)明显高于慢性胆囊炎(3.85%,2/52)、低级别上皮内瘤变(28.5%,6/21)和高级别上皮内瘤变(52.63%,11/19)(χ~2=81.127,P<0.05)。腺癌中p53、TOPOⅡα的表达:临床分期Ⅲ—Ⅳ明显高于Ⅰ—Ⅱ者(χ~2=13.042,P=0.000;χ~2=16.663,P<0.000),术后5年死亡明显高于生存者(χ~2=8.591,P=0.003;χ~2=16.154,P<0.000),低分化腺癌明显高于高、中分化腺癌(χ~2=4.790,P=0.029;χ~2=5.182,P=0.023);p53和TOPOⅡα在胆囊腺癌的表达呈正相关(r=0.421,P=0.001)。结论联合检测突变型p53与TOPOⅡα在胆囊良、恶性病变中有很好的鉴别诊断价值。突变型p53与TOPOⅡα可作为评估胆囊癌发展及预后的参考指标,且TOPOⅡα可作为增殖指数反映肿瘤细胞的增殖状态。

乳腺癌组织中金属硫蛋白(MT)和拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡα)的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌中拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡα)和金属硫蛋白(MT)的表达与乳腺癌预后的关系,并分析两者的相关性。方法:采用SABC免疫组化方法检测72例乳腺癌标本中MT和TopoⅡα的表达。结果:MT和TopoⅡα的阳性率分别为33.33%和48.61%。MT阳性表达率与乳腺癌病理类型及有否巴结转移有关(P<0.05)。TopoⅡα阳性表达率与是否有淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:检测MT和TopoⅡα对提示预后和临床选择化疗方案有指导意义。

基于DNA拓扑异构酶Ⅱ基因部分序列的侧耳属系统发育分析

对侧耳属(Pleurotus)14个种的14个菌株,亚侧耳属(Hohenbuehelia)1个种和离褶伞属(Lyophyllum)1个种的DNA拓扑异构酶II(EC5.99.1.3)部分序列进行扩增分析。以灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)、新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)和玉米黑粉菌(Puccinia polysora)等担子菌为外群,采用最大距离法、最大简约法和最大似然法构建侧耳属的系统发育树。结果表明:作为外群的3个物种独立于所有供试材料;侧耳属菌株作为一大类与供试的离褶伞属和亚侧耳属分开。侧耳属14个种又可细分成6支:可能为侧耳属起源最早的P.flabellatus、P.salmoneostramineus和P.djamor组成一组;P.tuberregium和P.pulmonarius均自成一组;P.abalonus和P.cystidiosus均产生束梗孢,聚为同组;P.eryngiivar.eryngii、P.eryngiivar.ferulae和P.nebrodensis为一组;另一组由P.ostreatus、P.columbinus、P.cornucopiae和P.citrinopileatus组成。按照侧耳属物种菌丝类型的不同,构建的系统发育树将该属14个种进行系群划分,单、二系菌丝分属于各个不同的分支中,说明单、二系菌丝均为多系起源,与用28S rDNA序列进行系统分析的结果一致。

DNA拓扑异构酶Ⅱ在肾癌中的表达及意义

目的：从细胞核水平对肾癌多药耐药（multldrugresistance，MDR）机制进行探讨，以期为选择化疗方案提供参考，获得更有效的化疗效果。方法：应用免疫组化的方法，对肾癌MDR的主要耐药指标DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoisomeraseⅡ，TopeⅡ）进行检测，并结合临床分型、分级、分期进行研究。结果：27例正常组织均表达TopoⅡ（100％），主要位于胞浆，70例癌组织均有TopoⅡ表达（100％），均位于胞核，TopoⅡ值以≥100为阳性标准，仅21．6％为阳性。结论：肾癌TopoⅡ表达值降低，使大多数化疗药物丧失了作用靶点而产生MDR。选择TopoⅡ高表达的患者采用不同的化疗药物进行化疗将有助于提高化疗有效率．

膀胱癌谷胱甘肽转移酶π和DNA拓扑异构酶Ⅱ组合表达的意义

目的 :探讨谷胱甘肽转移酶π(GSTπ)和DNA拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )组合表达与膀胱癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组化SP法检测 6 0例膀胱移行细胞癌GSTπ和TopoⅡ表达。结果 :GSTπ表达水平升高 ,其阳性率在Ta～T1与T2 ～T4( 34.5 %、87.1% )、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级 ( 4 0 %、6 2 .5 %、84 .6 % )、初发与复发 ( 5 2 .3%、87.5 % )间比较 (P <0 .0 5 ) ;TopoⅡ表达水平下降 ,其阳性率在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级 ( 80 %、6 2 .5 %、30 .8% )、单发与多发 ( 81.3%、35 .7% )间比较P <0 .0 5 ,但与临床分期和复发无关P >0 .0 5。以GSTπ+/TopoⅡ -表达者膀胱癌恶性程度更高 ,具有更强的侵袭力 ,易复发 ,进展快 ,预后差。结论 :GSTπ高表达和TopoⅡ表达水平下降与膀胱癌生物学行为相关。

DNA拓扑异构酶Ⅱ与多药耐药研究进展

ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ与多药耐药研究进展叶传忠１黄勤２关键词拓扑异构酶Ⅱ；ＤＮＡ；多药耐药福建医科大学１．附属协和医院泌尿外科（福州３５０００１）２．基础部ＤＮＡ拓扑异构酶（ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ，Ｔｏｐｏ）是一种能催化ＤＮＡ超螺旋结构局部构型改变的...

海南哥纳香醇甲GHM-10对L1210细胞DNA分子结构及拓扑异构酶Ⅱ活性的影响

目的：研究海南哥纳香醇甲（ＧＨＭ１０）抑制癌细胞ＤＮＡ合成的作用机制。方法：用单细胞凝胶电泳法检测ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ分子的损伤，碱洗脱法测定ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ单链长度的影响，用ＧＨＭ１０对超螺旋ｐＵＣ１８ＤＮＡ的解旋能力测定它对ＤＮＡ拓扑异构酶ＩＩ活性的影响。结果：Ｌ１２１０细胞用ＧＨＭ１０（４～１０）μｇ·ｍｌ－１处理４５ｈ后，ＤＮＡ分子受损，表现为电泳后在荧光显微镜下可见彗星状拖尾。ＧＨＭ１０（４～２５）μｇ·ｍｌ－１处理Ｌ１２１０细胞５ｈ，可引起ＤＮＡ单链断裂。Ｌ１２１０细胞或从Ｌ１２１０细胞分离的蛋白质在用ＧＨＭ１０处理后，ＤＮＡ拓扑异构酶ＩＩ的活性均被抑制。结论：ＧＨＭ１０可引起Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ分子损伤；无论在细胞内还是细胞外，ＧＨＭ１０可抑制拓扑异构酶ＩＩ的活性。

疏肝养胃通脉冲剂对萎缩性胃炎患者DNA拓扑异构酶Ⅱ和细胞增殖指数的影响

目的观察疏肝养胃通脉冲剂治疗慢性萎缩性胃炎后DNA拓扑异构酶Ⅱ表达和细胞增殖指数的变化。方法应用免疫组化S-P方法,对174例不同病理亚型CAG患者进行DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)和细胞增殖指数PCNA检测。结果观察组(n=106)和对照组(n=68)随着萎缩、异型增生、化生和HP感染加重,To-poⅡ和PCNA表达均数治疗前逐渐增大,治疗后则相反。两组治疗前后比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01);观察组和对照组治疗后对比,除萎缩程度外,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论疏肝养胃通脉冲剂能抑杀HP,对CAG特别是伴异型增生和肠上皮化生、假幽门腺化生者能下调TopoⅡ和PCNA表达,对CAG的治疗和预防其癌变有较好的作用。

DNA拓扑异构酶Ⅱ与细胞增殖

细胞增殖的核心事件是DNA复制与细胞分裂 ,DNA拓扑异构酶Ⅱ在该过程中起重要作用。由于传统细胞增殖标记物的局限 ,DNA拓扑异构酶Ⅱ作为细胞增殖标记物的意义正逐渐被人们所关注。作者就近年来人们对DNA拓扑异构酶Ⅱ的认识及其作为细胞增殖标记物的价值进行如下综述。

DNA拓扑异构酶Ⅱ在扁桃体程序性死亡细胞中的表达及分布

目的 :了解拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )、bcl 2、Ki 6 7在扁桃体淋巴滤泡程序性死亡细胞中的表达 ,探讨与细胞程序性死亡的关系。 方法 :收集 2 3例慢性扁桃体炎的手术标本 ,用TUNEL法和免疫组化法观察TopoⅡ、bcl 2、Ki 6 7在淋巴滤泡中淋巴细胞的表达及与程序性死亡分布的关系。 结果 :TUNEL法显示扁桃体的细胞程序性死亡多集中在淋巴滤泡生发中心 ;bcl 2为套区淋巴细胞表达 ;TopoⅡ阳性分布多集中于滤泡暗区和基底明区 ,而明区较少 ,外套层基本不表达 ;Ki 6 7分布与TopoⅡ相似。 结论 :淋巴滤泡生发中心细胞程序性死亡活跃 ,bcl 2呈阴性表达 ,而TopoⅡ在淋巴滤泡生发中心呈阳性表达 。