膀胱癌P糖蛋白、谷胱甘肽S转移酶-π、DNA拓扑异构酶Ⅱ-α表达及其意义

目的 :探讨膀胱癌中 P糖蛋白 (Pgp)、谷胱甘肽 - S-转移酶 -π(GST-π)、DNA拓扑异构酶 -α(Topo -α)表达情况及其临床意义。方法 :采用免疫组织化学 SP法 ,检测 10 7例原发性膀胱移行细胞癌中 Pgp、GST-π、Topo - α的表达情况。结果 :Pgp、GST- π总阳性表达率分别为 6 3.6 %、72 .9% ,二者的表达与该肿瘤的病理分级、临床分期和术后腔内化疗的复发密切相关。所有膀胱癌细胞均有不同程度的 Topo - α表达降低 ,其中 Topo - α指数 、 、 、 级分别为 45 .0 %、36 .3%、12 .5 %、6 .3% ,Topo - α指数与病理分级有关、但与临床分期和术后腔内化疗的复发无关。 Pgp与 GST- π、GST- π与 Topo - α指数密切相关 ,Topo - α指数与 Pgp表达无关联。结论 :Pgp、GST-π表达情况和 Topo -α指数是判定原发性膀胱移行细胞癌恶性程度的客观指标 ;在预测以塞替派和丝裂霉素为主的术后腔内化疗敏感性方面 ,Pgp、GST-π表达情况较 Topo -α指数更为有效。

共刺激分子B7H3通过调控DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达对乳腺癌多柔比星化疗的影响

目的探讨共刺激分子B7H3(costimulatory molecule B7H3,B7H3)通过调控DNA拓扑异构酶Ⅱα(DNA topoisom eraseⅡalpha,TOP2A)的表达对乳腺癌多柔比星化疗敏感性的影响。方法收集临床标本,采用免疫组织化学染色验证B7H3表达与多柔比星化疗敏感性的相关性。采用成簇规律间隔短回文重复/Cas9基因编辑技术敲除B7H3,通过蛋白质印迹法和流式细胞术验证敲除结果。采用半抑制浓度值分析、集落形成、蛋白质印迹法检测凋亡蛋白、荧光双染色检测凋亡细胞以及细胞周期测定等方法验证B7H3表达与多柔比星作用的敏感性。小干扰TOP2A及其过表达TOP2A回复实验检测细胞凋亡。构建小鼠皮下成瘤模型验证体内B7H3表达与多柔比星化疗的作用。结果高表达B7H3的肿瘤组织对多柔比星治疗更加敏感。成功构建B7H3敲除的乳腺癌细胞。B7H3高表达的乳腺癌细胞对多柔比星作用更敏感。B7H3通过激活核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)途径促进TOP2A的表达,进而增加乳腺癌细胞对多柔比星作用的敏感性。小鼠体内实验证明,B7H3高表达可增加乳腺癌对多柔比星化疗的敏感性。结论B7H3通过激活NF-κB通路调控TOP2A的表达使乳腺癌对多柔比星化疗更敏感。

谷胱甘肽-S-转移酶π和DNA拓扑异构酶Ⅱ-α在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的探讨谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ-α(TopoⅡ-α)在肿瘤的表达及其与结直肠癌临床病理学特征之间的关系。方法应用免疫组织化学(免疫组化)ABC法检测GST-π和TopoⅡ-α在60例结直肠癌、癌旁组织和15例正常结肠黏膜中的表达并分析其意义。结果GST-π和TopoⅡ-α在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为90.0%和86.7%,显著高于癌旁组织和正常黏膜(P<0.01)。GST-π和TopoⅡ-α表达强度与肿瘤大小和组织学类型无关(P>0.05),但与肿瘤的临床分期、分化程度和淋巴结转移与否密切相关(P<0.01)。GST-π在低分化癌组织中高表达;TopoⅡ-α在高分化癌组织中的表达强度高于低分化癌(P<0.01)。结论GST-π和TopoⅡ-α在结直肠癌组织中的表达与肿瘤的临床病理特征有关,可作为衡量肿瘤恶性程度和预后的指标之一。

海南哥纳香醇甲GHM-10对L1210细胞DNA分子结构及拓扑异构酶Ⅱ活性的影响

目的：研究海南哥纳香醇甲（ＧＨＭ１０）抑制癌细胞ＤＮＡ合成的作用机制。方法：用单细胞凝胶电泳法检测ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ分子的损伤，碱洗脱法测定ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ单链长度的影响，用ＧＨＭ１０对超螺旋ｐＵＣ１８ＤＮＡ的解旋能力测定它对ＤＮＡ拓扑异构酶ＩＩ活性的影响。结果：Ｌ１２１０细胞用ＧＨＭ１０（４～１０）μｇ·ｍｌ－１处理４５ｈ后，ＤＮＡ分子受损，表现为电泳后在荧光显微镜下可见彗星状拖尾。ＧＨＭ１０（４～２５）μｇ·ｍｌ－１处理Ｌ１２１０细胞５ｈ，可引起ＤＮＡ单链断裂。Ｌ１２１０细胞或从Ｌ１２１０细胞分离的蛋白质在用ＧＨＭ１０处理后，ＤＮＡ拓扑异构酶ＩＩ的活性均被抑制。结论：ＧＨＭ１０可引起Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ分子损伤；无论在细胞内还是细胞外，ＧＨＭ１０可抑制拓扑异构酶ＩＩ的活性。

P-糖蛋白、谷胱苷肽-S-转移酶和DNA拓扑异构酶Ⅱ在胃癌中的表达及意义

目的 探讨P-糖蛋白(P-印)、谷胱苷肽-S-转移酶(CST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(Topo Ⅱ)在胃癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学二步法检测41例胃癌组织中P-gp、GST-π和Topo Ⅱ的表达。结果P-gp、GST-π和Topo Ⅱ的阳洼率分别为34.1％(14/41)、53.7％(22/41)和31.7％(13/41),P-gp表达只与肿瘤浸润深度有关,GST-7π的表达与肿瘤生物学行为无关,Topo Ⅱ的表达与组织学分类,肿瘤浸润深度有关。结论P-gp、GST-π和Topo Ⅱ的表达与胃癌的主要的生物学行为无关,联合检测有助于指导临床化疗药物筛选及化疗方案的优化。

乳腺癌组织中雌激素受体、孕激素受体、P-糖蛋白、谷胱甘肽-s-转移酶-π及DNA拓扑异构酶Ⅱ的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、P-糖蛋白(P-gP)、谷胱甘肽-s-转移酶-π(GST-π)及DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)的表达水平。方法选取淮安市妇幼保健院2010年9月～2014年1月手术切除后经病理诊断为乳腺癌的91例标本,采用免疫组化方法检测ER、PR、P-gP、GST-π、TopoⅡ在91例乳腺癌组织中的表达强度。结果 ER、PR、GST-π、TopeⅡ的表达强度与组织学分级显著相关,TopoⅡ的表达强度与淋巴结转移显著相关,P-gP的表达强度与肿瘤大小差异显著相关。ER和PR表达成正相关(r=0.637,P=0.000)。结论ER、PR、GST-π、P-gP、TopoⅡ的检测对选择化疗方案和评估预后有重要意义。

原花青素对MNNG致DNA损伤及拓扑异构酶Ⅱ的影响

目的 观察原花青素对DNA损伤的保护作用及对黑色素瘤细胞中拓扑异构酶的影响 ,探讨原花青素癌化学预防的作用机制。方法 单细胞电泳法检测羟自由基对L92 9细胞DNA损伤的尾迹 ,用 [H3]TdR参入细胞DNA中进行标记 ,测定上清液中的放射强度来判定MNNG对DNA损伤 ;从黑色素瘤肿瘤细胞中提取拓扑异构酶 ,用琼脂糖凝胶电泳测定活性。结果 原花青素可以减轻DNA损伤尾迹及MNNG对DNA的损伤。但对黑色素瘤肿瘤细胞中拓扑异构酶无抑制作用。结论 原花青素对羟自由基及致癌剂MNNG引起的细胞DNA损伤有一定的保护作用。

骆驼蓬种子提取物及其β咔保啉生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用

目的探讨去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱及哈尔满碱(止咳药用植物)对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用。方法从体外培养的Q3肝癌细胞中,提取分离DNA拓扑异构酶Ⅱ;以阿霉素为阳性对照,用琼脂糖凝胶电泳法检测药物对DNA拓扑异构酶Ⅱ的作用。结果骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱及哈尔满碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性均有一定的抑制作用。结论对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用是骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱等生物碱抗癌作用和细胞毒作用的机制之一。

拓扑异构酶Ⅱα和Ki-67表达与子宫肉瘤预后的相关性研究

目的通过检测DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)、细胞核相关抗原-67(Ki-67)的表达水平,评价子宫肉瘤细胞增殖的生物学行为,寻找其预后相关因素。方法回顾性分析解放军总医院因子宫肉瘤行肿瘤切除手术的患者48例。按照国际妇产科联盟(FIGO)分期标准,分为Ⅰ期22例,Ⅱ期12例,Ⅲ期8例,Ⅳ期6例。按照美国妇科肿瘤组(GOG)病理组织学分类,包括子宫平滑肌肉瘤(LMS)19例,子宫内膜间质肉瘤(ESS)21例,子宫恶性中胚叶混合瘤(MMMT)8例。应用免疫组织化学(IHC)方法检测TopoⅡα、Ki-67在子宫肉瘤中的表达水平并分析其与子宫肉瘤预后的相关性。结果TopoⅡα和Ki-67的高增殖(LI)组(阳性表达细胞数>25%)患者的2年、5年生存率与低LI组(阳性表达细胞数≤25%)患者比较均无明显差别,但总体生存率高LI组均明显低于低LI组(分别为P=0.002,P=0.004)。TopoⅡα和ki-67低LI组患者的复发包块体积均大于高LI组(P=0.005,P=0.000),且复发时间均明显长于高LI组(P=0.000,P=0.000)。TopoⅡα与Ki-67表达呈明显正相关(r=0.9355,P=0.000)。COX多因素分析表明,除病理类型及分期外,TopoⅡα和Ki-67的表达与患病年龄、初潮年龄、孕产次、月经周期及经期、是否绝经均无关。结论TopoⅡα与Ki-67均可作为细胞增殖的特异性标记物,但TopoⅡα在反映细胞精确的增殖状态方面较Ki-67可能有更好的特异性,结合病理类型及分期,可能对判断子宫肉瘤的预后具有重要指导意义。

DNA拓扑异构酶Ⅱ研究进展

TopoⅡ不仅对细胞的正常生命活动至关重要,而且在肿瘤发生、发展以及疗效等方面均扮演重要 角色。关于TopoⅡα表达调控及其影响因素大致可以分为三个方面。其一,蛋白激酶类成分多直接作用于TopoⅡα蛋白质,影响其生物活性,并且与TopoⅡα活性的周期性特点有关,其二,既能作用于基因水平又能从蛋白质水平影响TopoⅡα的物质,主要包括p53和Rb蛋白等。最后,转录调节因子类成分则主要是从基因水平调控TopoⅡα的表达。针对TopoⅡα和β异同,二者不仅在结构和分布方面有所差别,而且在功能上也各有侧重。特别是在药物敏感性与抗药性方面TopoⅡα与β也有一定的区别。因此,加强对TopoⅡα表达调控的研究,特别是开展对TopoⅡβ表达调控研究,以及深入探讨TopoⅡα和β结构和功能特点,不但对于了解相关作用机制,而且对提高肿瘤诊断、治疗效果具有重要意义。

DNA拓扑异构酶Ⅱα、PCNA在人脑星形细胞瘤中的表达及与预后生存的关系(英文)

目的研究DNA拓扑异构酶Ⅱα(Topo-Ⅱα)、增殖细胞核抗原(PCNA)在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达,并探讨其与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法应用SABC免疫组化技术,检测32例星形细胞瘤ToPo-Ⅱα、PCNA的表达,并针对其与恶性程度及预后生存状况的关系比较进行统计学分析。结果星形细胞瘤Topo-Ⅱα、PCNA的表达在低度恶性组与高度恶性组之间的差异有统计学意义(P<0.01);Log-rank检验及Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Topo-Ⅱα、PCNA的表达强度与星形细胞瘤的预后生存时间呈显著的负相关性,Topo-Ⅱα、PCNA的表达水平反映了星形细胞瘤患者的预后情况。结论Topo-Ⅱα、PCNA在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达与其恶性程度相关,与患者的预后生存相关。联合检测二者的表达水平对判断肿瘤的恶性程度有一定的参考意义,同时,这两个因子可作为判断与预测星形细胞瘤患者预后的重要指标。

环氧化物酶-2、血管内皮生长因子及拓扑异构酶Ⅱ在三阴性乳腺癌中的表达及意义

目的探讨拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、环氧化物酶(COX)-2、血管内皮生长因子(VEGF)在三阴性乳腺癌(TNBC)患者中的表达及临床意义。方法选取住院接受治疗的乳腺癌患者112例(TNBC 24例,非TNBC88例),构建组织芯片,采用免疫组化法检测COX-2、VEGF、TopoⅡ表达情况进行检测,分析表达情况与临床病理特征之间的相关性。结果 TNBC与非TNBC患者COX-2、VEGF阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。TNBC患者TopoⅡ表达阳性率为91.67%,明显高于非TNBC患者的69.32%(P<0.05)。TNBC患者TopoⅡ、VEGF、COX-2阳性表达率分别为91.67%、87.50%、75.00%,3项指标表达与患者年龄、病理学类型、肿瘤大小、脉管侵犯、组织分级无明显相关性(P>0.05),VEGF表达与淋巴结转移情况相关(P<0.05),而TopoⅡ及COX-2表达与淋巴结转移无关(P>0.05)。TNBC患者中COX-2与TopoⅡ表达、COX-2与VEGF表达、VEGF与TopoⅡ表达均有明显相关性(P<0.05)。结论 TNBC患者TopoⅡ阳性表达率较高,VEGF表达情况与淋巴结转移具有明显相关性,TopoⅡ、COX-2、VEGF 3项指标表达情况密切相关,可能共同参与了TNBC的发生发展过程。

DNA拓扑异构酶Ⅱα、PCNA在人脑星形细胞瘤中的表达及与预后生存的关系

目的 研究DNA拓扑异构酶Ⅱα(Topo -Ⅱα)、增殖细胞核抗原(PCNA)在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达,并探讨其与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法 应用SABC免疫组化技术,检测32例星形细胞瘤ToPo Ⅱα、PCNA的表达,并针对其与恶性程度及预后生存状况的关系比较进行统计学分析。结果 星形细胞瘤Topo Ⅱα、PCNA的表达在低度恶性组与高度恶性组之间的差异有统计学意义(P <0 0 1) ;Log rank检验及Kaplan Meier生存曲线分析显示,Topo Ⅱα、PCNA的表达强度与星形细胞瘤的预后生存时间呈显著的负相关性,Topo Ⅱα、PCNA的表达水平反映了星形细胞瘤患者的预后情况。结论 Topo Ⅱα、PCNA在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达与其恶性程度相关,与患者的预后生存相关。联合检测二者的表达水平对判断肿瘤的恶性程度有一定的参考意义,同时,这两个因子可作为判断与预测星形细胞瘤患者预后的重要指标。

基于DNA拓扑异构酶Ⅱ基因部分序列的侧耳属系统发育分析

对侧耳属(Pleurotus)14个种的14个菌株,亚侧耳属(Hohenbuehelia)1个种和离褶伞属(Lyophyllum)1个种的DNA拓扑异构酶II(EC5.99.1.3)部分序列进行扩增分析。以灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)、新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)和玉米黑粉菌(Puccinia polysora)等担子菌为外群,采用最大距离法、最大简约法和最大似然法构建侧耳属的系统发育树。结果表明:作为外群的3个物种独立于所有供试材料;侧耳属菌株作为一大类与供试的离褶伞属和亚侧耳属分开。侧耳属14个种又可细分成6支:可能为侧耳属起源最早的P.flabellatus、P.salmoneostramineus和P.djamor组成一组;P.tuberregium和P.pulmonarius均自成一组;P.abalonus和P.cystidiosus均产生束梗孢,聚为同组;P.eryngiivar.eryngii、P.eryngiivar.ferulae和P.nebrodensis为一组;另一组由P.ostreatus、P.columbinus、P.cornucopiae和P.citrinopileatus组成。按照侧耳属物种菌丝类型的不同,构建的系统发育树将该属14个种进行系群划分,单、二系菌丝分属于各个不同的分支中,说明单、二系菌丝均为多系起源,与用28S rDNA序列进行系统分析的结果一致。

DNA拓扑异构酶Ⅱ在肾癌中的表达及意义

目的：从细胞核水平对肾癌多药耐药（multldrugresistance，MDR）机制进行探讨，以期为选择化疗方案提供参考，获得更有效的化疗效果。方法：应用免疫组化的方法，对肾癌MDR的主要耐药指标DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoisomeraseⅡ，TopeⅡ）进行检测，并结合临床分型、分级、分期进行研究。结果：27例正常组织均表达TopoⅡ（100％），主要位于胞浆，70例癌组织均有TopoⅡ表达（100％），均位于胞核，TopoⅡ值以≥100为阳性标准，仅21．6％为阳性。结论：肾癌TopoⅡ表达值降低，使大多数化疗药物丧失了作用靶点而产生MDR。选择TopoⅡ高表达的患者采用不同的化疗药物进行化疗将有助于提高化疗有效率．

腺病毒介导的IL-24基因对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα及Caspase-3表达的影响

目的探讨腺病毒介导的IL-24基因(Ad5F35-hIL-24)对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα(topoⅡα)及Caspase-3表达的影响。方法应用腺病毒载体将IL-24基因转染U251细胞后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞的抑制作用;Hoechst33258荧光染色,以及流式细胞术测定细胞凋亡;应用免疫组织化学方法检测topoⅡα表达;免疫印迹法检测topoⅡα和Caspase-3蛋白质表达变化;Transwell实验观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞侵袭力的影响。结果与对照组相比,Ad5F35-hIL-24对胶质瘤细胞有明显抑制作用,能显著诱导细胞凋亡,且呈浓度依赖性;免疫组织化学法显示,Ad5F35-hIL-24能明显抑制topoⅡα表达;免疫印迹检测表明,topoⅡα表达明显降低,而Caspase-3蛋白的表达水平增加;Transwell实验表明,Ad5F35-hIL-24能明显降低U251细胞的侵袭能力。结论外源性IL-24基因能显著抑制胶质瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡;topoⅡα及Caspase-3是其重要的作用靶点。该结果对于IL-24基因用于临床治疗胶质瘤有一定参考意义。

膀胱癌谷胱甘肽转移酶π和DNA拓扑异构酶Ⅱ组合表达的意义

目的 :探讨谷胱甘肽转移酶π(GSTπ)和DNA拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )组合表达与膀胱癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组化SP法检测 6 0例膀胱移行细胞癌GSTπ和TopoⅡ表达。结果 :GSTπ表达水平升高 ,其阳性率在Ta～T1与T2 ～T4( 34.5 %、87.1% )、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级 ( 4 0 %、6 2 .5 %、84 .6 % )、初发与复发 ( 5 2 .3%、87.5 % )间比较 (P <0 .0 5 ) ;TopoⅡ表达水平下降 ,其阳性率在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级 ( 80 %、6 2 .5 %、30 .8% )、单发与多发 ( 81.3%、35 .7% )间比较P <0 .0 5 ,但与临床分期和复发无关P >0 .0 5。以GSTπ+/TopoⅡ -表达者膀胱癌恶性程度更高 ,具有更强的侵袭力 ,易复发 ,进展快 ,预后差。结论 :GSTπ高表达和TopoⅡ表达水平下降与膀胱癌生物学行为相关。

DNA拓扑异构酶Ⅱ与多药耐药研究进展

ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ与多药耐药研究进展叶传忠１黄勤２关键词拓扑异构酶Ⅱ；ＤＮＡ；多药耐药福建医科大学１．附属协和医院泌尿外科（福州３５０００１）２．基础部ＤＮＡ拓扑异构酶（ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ，Ｔｏｐｏ）是一种能催化ＤＮＡ超螺旋结构局部构型改变的...

人表皮生长因子受体-2与拓扑异构酶Ⅱ在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨人表皮生长因子受体-2(HER-2)及拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)在结直肠癌中的表达及相互关系,并探讨其意义。方法选取经手术切除的60例结直肠癌标本中切取的癌组织和距癌灶10～15cm的其癌旁正常肠组织,进行病理切片。免疫组化法检测60例结直肠癌及其癌旁正常组织HER-2和TOPOⅡ的表达水平,结合临床病理因素,运用SPSS16.0统计软件包进行统计分析。结果 HER-2在结直肠癌及癌旁正常组织阳性表达率分别为46.67%和10.00%,差异有显著性,HER-2在结直肠癌表达水平与分化程度、淋巴结累及情况、病理分期有关;TOPOⅡ在结直肠癌与癌旁正常组织表达率分别为55.00%和11.67%,差异有显著性,结合临床病理因素,TOPOⅡ表达水平仅与淋巴结有无转移、病理分期存在相关性;TOPOⅡ与HER-2蛋白表达水平在结直肠癌中存在正相关。结论 HER-2与TOPOⅡ两者在结直肠癌正相关表达,表明两者在结直肠癌的发生、侵袭和转移起着协同作用。