共刺激分子B7H3通过调控DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达对乳腺癌多柔比星化疗的影响

目的探讨共刺激分子B7H3(costimulatory molecule B7H3,B7H3)通过调控DNA拓扑异构酶Ⅱα(DNA topoisom eraseⅡalpha,TOP2A)的表达对乳腺癌多柔比星化疗敏感性的影响。方法收集临床标本,采用免疫组织化学染色验证B7H3表达与多柔比星化疗敏感性的相关性。采用成簇规律间隔短回文重复/Cas9基因编辑技术敲除B7H3,通过蛋白质印迹法和流式细胞术验证敲除结果。采用半抑制浓度值分析、集落形成、蛋白质印迹法检测凋亡蛋白、荧光双染色检测凋亡细胞以及细胞周期测定等方法验证B7H3表达与多柔比星作用的敏感性。小干扰TOP2A及其过表达TOP2A回复实验检测细胞凋亡。构建小鼠皮下成瘤模型验证体内B7H3表达与多柔比星化疗的作用。结果高表达B7H3的肿瘤组织对多柔比星治疗更加敏感。成功构建B7H3敲除的乳腺癌细胞。B7H3高表达的乳腺癌细胞对多柔比星作用更敏感。B7H3通过激活核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)途径促进TOP2A的表达,进而增加乳腺癌细胞对多柔比星作用的敏感性。小鼠体内实验证明,B7H3高表达可增加乳腺癌对多柔比星化疗的敏感性。结论B7H3通过激活NF-κB通路调控TOP2A的表达使乳腺癌对多柔比星化疗更敏感。

原花青素对MNNG致DNA损伤及拓扑异构酶Ⅱ的影响

目的 观察原花青素对DNA损伤的保护作用及对黑色素瘤细胞中拓扑异构酶的影响 ,探讨原花青素癌化学预防的作用机制。方法 单细胞电泳法检测羟自由基对L92 9细胞DNA损伤的尾迹 ,用 [H3]TdR参入细胞DNA中进行标记 ,测定上清液中的放射强度来判定MNNG对DNA损伤 ;从黑色素瘤肿瘤细胞中提取拓扑异构酶 ,用琼脂糖凝胶电泳测定活性。结果 原花青素可以减轻DNA损伤尾迹及MNNG对DNA的损伤。但对黑色素瘤肿瘤细胞中拓扑异构酶无抑制作用。结论 原花青素对羟自由基及致癌剂MNNG引起的细胞DNA损伤有一定的保护作用。

骆驼蓬种子提取物及其β咔保啉生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用

目的探讨去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱及哈尔满碱(止咳药用植物)对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用。方法从体外培养的Q3肝癌细胞中,提取分离DNA拓扑异构酶Ⅱ;以阿霉素为阳性对照,用琼脂糖凝胶电泳法检测药物对DNA拓扑异构酶Ⅱ的作用。结果骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱及哈尔满碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性均有一定的抑制作用。结论对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用是骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱等生物碱抗癌作用和细胞毒作用的机制之一。

DNA拓扑异构酶Ⅱ研究进展

TopoⅡ不仅对细胞的正常生命活动至关重要,而且在肿瘤发生、发展以及疗效等方面均扮演重要 角色。关于TopoⅡα表达调控及其影响因素大致可以分为三个方面。其一,蛋白激酶类成分多直接作用于TopoⅡα蛋白质,影响其生物活性,并且与TopoⅡα活性的周期性特点有关,其二,既能作用于基因水平又能从蛋白质水平影响TopoⅡα的物质,主要包括p53和Rb蛋白等。最后,转录调节因子类成分则主要是从基因水平调控TopoⅡα的表达。针对TopoⅡα和β异同,二者不仅在结构和分布方面有所差别,而且在功能上也各有侧重。特别是在药物敏感性与抗药性方面TopoⅡα与β也有一定的区别。因此,加强对TopoⅡα表达调控的研究,特别是开展对TopoⅡβ表达调控研究,以及深入探讨TopoⅡα和β结构和功能特点,不但对于了解相关作用机制,而且对提高肿瘤诊断、治疗效果具有重要意义。

DNA拓扑异构酶Ⅱα、PCNA在人脑星形细胞瘤中的表达及与预后生存的关系(英文)

目的研究DNA拓扑异构酶Ⅱα(Topo-Ⅱα)、增殖细胞核抗原(PCNA)在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达,并探讨其与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法应用SABC免疫组化技术,检测32例星形细胞瘤ToPo-Ⅱα、PCNA的表达,并针对其与恶性程度及预后生存状况的关系比较进行统计学分析。结果星形细胞瘤Topo-Ⅱα、PCNA的表达在低度恶性组与高度恶性组之间的差异有统计学意义(P<0.01);Log-rank检验及Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Topo-Ⅱα、PCNA的表达强度与星形细胞瘤的预后生存时间呈显著的负相关性,Topo-Ⅱα、PCNA的表达水平反映了星形细胞瘤患者的预后情况。结论Topo-Ⅱα、PCNA在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达与其恶性程度相关,与患者的预后生存相关。联合检测二者的表达水平对判断肿瘤的恶性程度有一定的参考意义,同时,这两个因子可作为判断与预测星形细胞瘤患者预后的重要指标。

DNA拓扑异构酶Ⅱα、PCNA在人脑星形细胞瘤中的表达及与预后生存的关系

目的 研究DNA拓扑异构酶Ⅱα(Topo -Ⅱα)、增殖细胞核抗原(PCNA)在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达,并探讨其与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法 应用SABC免疫组化技术,检测32例星形细胞瘤ToPo Ⅱα、PCNA的表达,并针对其与恶性程度及预后生存状况的关系比较进行统计学分析。结果 星形细胞瘤Topo Ⅱα、PCNA的表达在低度恶性组与高度恶性组之间的差异有统计学意义(P <0 0 1) ;Log rank检验及Kaplan Meier生存曲线分析显示,Topo Ⅱα、PCNA的表达强度与星形细胞瘤的预后生存时间呈显著的负相关性,Topo Ⅱα、PCNA的表达水平反映了星形细胞瘤患者的预后情况。结论 Topo Ⅱα、PCNA在中枢神经系统星形细胞瘤中的表达与其恶性程度相关,与患者的预后生存相关。联合检测二者的表达水平对判断肿瘤的恶性程度有一定的参考意义,同时,这两个因子可作为判断与预测星形细胞瘤患者预后的重要指标。

乳腺癌组织中金属硫蛋白(MT)和拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡα)的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌中拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡα)和金属硫蛋白(MT)的表达与乳腺癌预后的关系,并分析两者的相关性。方法:采用SABC免疫组化方法检测72例乳腺癌标本中MT和TopoⅡα的表达。结果:MT和TopoⅡα的阳性率分别为33.33%和48.61%。MT阳性表达率与乳腺癌病理类型及有否巴结转移有关(P<0.05)。TopoⅡα阳性表达率与是否有淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:检测MT和TopoⅡα对提示预后和临床选择化疗方案有指导意义。

基于DNA拓扑异构酶Ⅱ基因部分序列的侧耳属系统发育分析

对侧耳属(Pleurotus)14个种的14个菌株,亚侧耳属(Hohenbuehelia)1个种和离褶伞属(Lyophyllum)1个种的DNA拓扑异构酶II(EC5.99.1.3)部分序列进行扩增分析。以灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)、新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)和玉米黑粉菌(Puccinia polysora)等担子菌为外群,采用最大距离法、最大简约法和最大似然法构建侧耳属的系统发育树。结果表明:作为外群的3个物种独立于所有供试材料;侧耳属菌株作为一大类与供试的离褶伞属和亚侧耳属分开。侧耳属14个种又可细分成6支:可能为侧耳属起源最早的P.flabellatus、P.salmoneostramineus和P.djamor组成一组;P.tuberregium和P.pulmonarius均自成一组;P.abalonus和P.cystidiosus均产生束梗孢,聚为同组;P.eryngiivar.eryngii、P.eryngiivar.ferulae和P.nebrodensis为一组;另一组由P.ostreatus、P.columbinus、P.cornucopiae和P.citrinopileatus组成。按照侧耳属物种菌丝类型的不同,构建的系统发育树将该属14个种进行系群划分,单、二系菌丝分属于各个不同的分支中,说明单、二系菌丝均为多系起源,与用28S rDNA序列进行系统分析的结果一致。

DNA拓扑异构酶Ⅱ在肾癌中的表达及意义

目的：从细胞核水平对肾癌多药耐药（multldrugresistance，MDR）机制进行探讨，以期为选择化疗方案提供参考，获得更有效的化疗效果。方法：应用免疫组化的方法，对肾癌MDR的主要耐药指标DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoisomeraseⅡ，TopeⅡ）进行检测，并结合临床分型、分级、分期进行研究。结果：27例正常组织均表达TopoⅡ（100％），主要位于胞浆，70例癌组织均有TopoⅡ表达（100％），均位于胞核，TopoⅡ值以≥100为阳性标准，仅21．6％为阳性。结论：肾癌TopoⅡ表达值降低，使大多数化疗药物丧失了作用靶点而产生MDR。选择TopoⅡ高表达的患者采用不同的化疗药物进行化疗将有助于提高化疗有效率．

膀胱癌谷胱甘肽转移酶π和DNA拓扑异构酶Ⅱ组合表达的意义

目的 :探讨谷胱甘肽转移酶π(GSTπ)和DNA拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )组合表达与膀胱癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组化SP法检测 6 0例膀胱移行细胞癌GSTπ和TopoⅡ表达。结果 :GSTπ表达水平升高 ,其阳性率在Ta～T1与T2 ～T4( 34.5 %、87.1% )、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级 ( 4 0 %、6 2 .5 %、84 .6 % )、初发与复发 ( 5 2 .3%、87.5 % )间比较 (P <0 .0 5 ) ;TopoⅡ表达水平下降 ,其阳性率在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级 ( 80 %、6 2 .5 %、30 .8% )、单发与多发 ( 81.3%、35 .7% )间比较P <0 .0 5 ,但与临床分期和复发无关P >0 .0 5。以GSTπ+/TopoⅡ -表达者膀胱癌恶性程度更高 ,具有更强的侵袭力 ,易复发 ,进展快 ,预后差。结论 :GSTπ高表达和TopoⅡ表达水平下降与膀胱癌生物学行为相关。

DNA拓扑异构酶Ⅱ与多药耐药研究进展

ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ与多药耐药研究进展叶传忠１黄勤２关键词拓扑异构酶Ⅱ；ＤＮＡ；多药耐药福建医科大学１．附属协和医院泌尿外科（福州３５０００１）２．基础部ＤＮＡ拓扑异构酶（ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ，Ｔｏｐｏ）是一种能催化ＤＮＡ超螺旋结构局部构型改变的...

海南哥纳香醇甲GHM-10对L1210细胞DNA分子结构及拓扑异构酶Ⅱ活性的影响

目的：研究海南哥纳香醇甲（ＧＨＭ１０）抑制癌细胞ＤＮＡ合成的作用机制。方法：用单细胞凝胶电泳法检测ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ分子的损伤，碱洗脱法测定ＧＨＭ１０对Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ单链长度的影响，用ＧＨＭ１０对超螺旋ｐＵＣ１８ＤＮＡ的解旋能力测定它对ＤＮＡ拓扑异构酶ＩＩ活性的影响。结果：Ｌ１２１０细胞用ＧＨＭ１０（４～１０）μｇ·ｍｌ－１处理４５ｈ后，ＤＮＡ分子受损，表现为电泳后在荧光显微镜下可见彗星状拖尾。ＧＨＭ１０（４～２５）μｇ·ｍｌ－１处理Ｌ１２１０细胞５ｈ，可引起ＤＮＡ单链断裂。Ｌ１２１０细胞或从Ｌ１２１０细胞分离的蛋白质在用ＧＨＭ１０处理后，ＤＮＡ拓扑异构酶ＩＩ的活性均被抑制。结论：ＧＨＭ１０可引起Ｌ１２１０细胞ＤＮＡ分子损伤；无论在细胞内还是细胞外，ＧＨＭ１０可抑制拓扑异构酶ＩＩ的活性。

疏肝养胃通脉冲剂对萎缩性胃炎患者DNA拓扑异构酶Ⅱ和细胞增殖指数的影响

目的观察疏肝养胃通脉冲剂治疗慢性萎缩性胃炎后DNA拓扑异构酶Ⅱ表达和细胞增殖指数的变化。方法应用免疫组化S-P方法,对174例不同病理亚型CAG患者进行DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)和细胞增殖指数PCNA检测。结果观察组(n=106)和对照组(n=68)随着萎缩、异型增生、化生和HP感染加重,To-poⅡ和PCNA表达均数治疗前逐渐增大,治疗后则相反。两组治疗前后比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01);观察组和对照组治疗后对比,除萎缩程度外,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论疏肝养胃通脉冲剂能抑杀HP,对CAG特别是伴异型增生和肠上皮化生、假幽门腺化生者能下调TopoⅡ和PCNA表达,对CAG的治疗和预防其癌变有较好的作用。

DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达与颅咽管瘤预后的关系

目的检测颅咽管瘤组织中DNA拓扑异构酶Ⅱα(DNATopoⅡα)的表达情况,分析其表达与肿瘤复发的关系,探讨其是否可作为判定颅咽管瘤预后的一个有效指标。方法设计前瞻性队列研究方案,采用免疫组化方法和图像分析技术测定63例颅咽管瘤组织切片中DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平,评价颅咽管瘤釉质上皮瘤与鳞状乳头瘤病理亚型、复发组与非复发组、原发组与复发组之间肿瘤细胞的增殖能力。结果32例釉质上皮瘤14例复发,31例鳞状乳头瘤6例复发;釉质上皮瘤与鳞状乳头瘤病理亚型之间以及复发组与非复发组肿瘤之间DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平有显著性差异(P<0.05),而原发组与复发组肿瘤之间DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平无统计学差异(P>0.05)。结论颅咽管瘤的病理亚型以及DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平与肿瘤的预后和复发有关,可作为预测肿瘤复发危险性的一个参考指标;DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平在原发组和复发组肿瘤之间无显著性差异,提示肿瘤在复发过程中瘤细胞的增殖活性无明显变化。

DNA拓扑异构酶Ⅱα在乳腺癌组织中的表达及其与病理特征的关系

目的分析DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)在乳腺癌患者中的表达情况及临床意义。方法选择2017年6月~2018年8月本院收治的144名乳腺癌患者,患者均经病理确诊为乳腺浸润性导管癌,术前均未行放化疗治疗,入院后接受手术治疗,通过免疫组化方法检测术后标本的TopoⅡα蛋白表达,观察TopoⅡα的阳性表达与乳腺癌临床特征的相关性。结果病理分级Ⅲ级乳腺癌患者的TopoⅡα蛋白阳性比例高于病理分级Ⅰ~Ⅱ级的乳腺癌患者,差异有统计学意义(P<0.05);Ki-67阳性乳腺癌患者的TopoⅡα蛋白阳性比例高于Ki-67阴性的乳腺癌患者,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman秩相关分析显示,乳腺癌病理分级与Ki-67与TopoⅡα表达成显著正相关(P<0.05)。结论TopoⅡα与肿瘤病理分级及增值状态相关。

DNA拓扑异构酶Ⅱ在扁桃体程序性死亡细胞中的表达及分布

目的 :了解拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )、bcl 2、Ki 6 7在扁桃体淋巴滤泡程序性死亡细胞中的表达 ,探讨与细胞程序性死亡的关系。 方法 :收集 2 3例慢性扁桃体炎的手术标本 ,用TUNEL法和免疫组化法观察TopoⅡ、bcl 2、Ki 6 7在淋巴滤泡中淋巴细胞的表达及与程序性死亡分布的关系。 结果 :TUNEL法显示扁桃体的细胞程序性死亡多集中在淋巴滤泡生发中心 ;bcl 2为套区淋巴细胞表达 ;TopoⅡ阳性分布多集中于滤泡暗区和基底明区 ,而明区较少 ,外套层基本不表达 ;Ki 6 7分布与TopoⅡ相似。 结论 :淋巴滤泡生发中心细胞程序性死亡活跃 ,bcl 2呈阴性表达 ,而TopoⅡ在淋巴滤泡生发中心呈阳性表达 。

DNA拓扑异构酶Ⅱ与抗肿瘤药物靶点的研究进展

DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoisomeraseⅡ,TopoⅡ)是一种真棱生物生存所必需的泛酶,在几乎所有DNA代谢过程中发挥重要作用。因为TopoⅡ具有重要的生理功能,它已成为抗癌药物的重要作用靶点。近年来,对TopoⅡ催化机制和药物作用方式的研究取得了很大进展,这些发现有助于进一步了解TopoⅡ的生理功能,进而研究出更有效的治疗方案和新的抗癌药。本文介绍了以TopoⅡ为靶点的抗癌药物的作用机制及其发展现状。

DNA拓扑异构酶Ⅱα与乳腺癌治疗的相关研究进展

DNA拓扑异构酶IIα(topoisomeraseⅡα,topoⅡα)是DNA代谢过程中重要核酶。因其特有的生物学功能,topoⅡα已成为许多抗癌药物的作用靶点。在乳腺癌的治疗中,作为蒽环类抗癌药物的作用靶点,topoⅡα可以作为蒽环类药物的疗效预测指标以及可能作为乳腺癌预后指标。本文介绍topoⅡα作为抗癌药物作用靶点的作用机制及其在乳腺癌治疗中的作用。

应用组织芯片探讨宫颈癌前病变及宫颈癌中DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达及其临床意义

目的：探讨DNA拓扑异构酶Ⅱα（TopoⅡα）蛋白在宫颈癌前病变及宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生发展中的作用。方法选取2007-2008年在山西省肿瘤医院行宫颈病变诊治的患者，其中包括慢性宫颈炎，低级别和高级别宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈浸润性鳞癌（SCC）的患者分别21、33、30、73例，制作组织芯片，应用免疫组织化学法（SP）检测宫颈组织中TopoⅡα蛋白的表达情况。结果结果TopoⅡα蛋白在慢性宫颈炎上皮组织、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ、SCC中的表达率分别是5％，12％，90％，97％，表达率逐渐增加，高级别CIN和浸润性鳞癌的表达显著高于低级别CIN和正常宫颈组织，差异有统计学意义；而高级别CIN与浸润性癌之间、低级别CIN与正常宫颈上皮之间的表达差异均无统计学意义。结论 TopoⅡα蛋白表达随着宫颈癌前病变的严重程度的加重而增加，因此T o poⅡα蛋白可能参与了宫颈上皮的异常增生和恶性转变。