酒花品种的DNA指纹鉴定技术

采用DNA指纹技术对国内外 5个酒花品种进行了鉴定 ,并对不同酶切组合及 2 0对引物组合进行了筛选。结果发现 ,酶切组合E/M ,P/M以及 5对引物组合均可以扩增出较清晰的条带。通过其中任何一组引物均可鉴别国内的 2个酒花品种。国外的 3种酒花由于遗传的相似性 ,不容易区分 ,但通过几组引物综合判断 。

基于DNA指纹鉴定技术的市售川贝母质量考察分析

目的考察当前不同地区市售川贝母的质量情况.方法应用川贝母PCR检测试剂盒法和药典法对3个城市24批商品川贝母样品进行鉴定.结果在24批商品川贝母样品中检出18批伪品,6批正品,合格率仅为25%;且试剂盒法与药典法的鉴定结果一致.结论目前市售川贝母质量状况不容乐观;DNA指纹鉴定方法简单易行,该结果也为我国中药材川贝母的进一步质量控制提供依据.

蕲蛇标准品DNA特异鉴定指纹片段的克隆及评价

目的以工程菌为载体,寻找可以长期保存中药材蕲蛇标准品特异DNA指纹区段的克隆技术.方法采用蕲蛇DNA检测试剂盒提取蕲蛇标准品基因组DNA,按照2010年版《中国药典》收录的方法进行蕲蛇特异DNA片段PCR扩增,将PCR产物与质粒载体重组后导入工程菌细胞内;体外培养细菌,提取重组质粒,应用PCR及测序方法鉴定插入片段是否正确.将鉴定正确、携带正品蕲蛇特异DNA序列的菌落置-80℃冰柜保存,分别以30 d、60 d、3个月和6个月为时间点进行复苏,进行稳定性评价.结果PCR扩增蕲蛇标准品特异DNA片段长度约为300 bp,插入质粒载体后,转入工程菌细胞内的蕲蛇DNA经体外克隆、PCR扩增及测序鉴定,扩增产物与目标大小一致,序列与Genbank中蕲蛇序均一致.将4个时间点复苏后的菌落进行PCR扩增后,条带清晰,没有降解.结论采用分子克隆技术保存蕲蛇特异基因片段的方法可行、有效,方法简单明了,获得的标准品DNA稳定性良好,结果可靠.