DNA损伤修复通路因子53BP1在骨髓干细胞自我更新和分化发育中的作用

目的探讨DNA损伤修复通路因子53BP1在骨髓干细胞自我更新及定向分化过程中发挥的作用。方法构建53BP1全身敲除C57/6小鼠模型,免疫荧光染色检测53BP1在细胞中的定位,Western blotting对53BP1蛋白表达水平进行检测及鉴定;流式细胞术进行细胞分选和计数、细胞周期检测、以及细胞表面分子marker分析,对比WT组和Mut组细胞生长速率以及定向分化过程,Co-IP检测分析表观遗传学磷酸化修饰蛋白,SPSS 22.0对数据进行统计学分析。结果体内和体外实验证实伴随KSL细胞分化发育进行,53BP1表达含量显著增加,53BP1基因敲除可影响KSL细胞的自我更新和定向分化以及表面分子标记的表达;53BP1基因敲除与否并不显著影响处于细胞周期G1/G0的KSL细胞百分含量;53BP1可影响磷酸化修饰蛋白的表达水平,53BP1基因敲除后磷酸化修饰蛋白p-H4(k20)和p-H3(k79)表达水平明显增加,但p-ATM和p-53-Ser-20含量显著减少。结论53BP1参与并影响骨髓干细胞的自我更新及定向分化过程,53BP1基因敲除可显著影响磷酸化蛋白p-H4(k20)、p-H3(k79)、p-ATM和p-53-Ser-20的表达水平。

DNA损伤修复的分子机理研究进展

生物体所处的内外环境因素均可以引起DNA损伤,如果不能及时正确的修复,将会导致基因组的不稳定性,威胁细胞的生存。染色质化的DNA在复杂的基因组环境中为了维持其结构和功能的稳定性,必须准确的对损伤性信号做出及时合理的应答。在DNA损伤的条件下,遗传信息和表观遗传信息的保真性维持需要损伤修复机器和染色质动态变化协同调节来保证。当特定DNA损伤修复通路中关键蛋白质发生突变时,会导致一系列的遗传疾病或肿瘤的发生,充分显示DNA损伤所造成危害的严重性和修复机制的重要性。本文将对DNA损伤修复的分子机制做一综述。