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法医DNA提取纯化试剂盒在MP-120自动化工作站上提取案件样本DNA的性能研究 被引量:3
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作者 孙敬 赵兴春 +3 位作者 姜伯玮 白雪 赵蕾 叶健 《生命科学仪器》 2010年第1期34-36,共3页
本文利用自主研制的法医DNA提取纯化试剂盒在MP-120自动化工作站上对48份检材样本DNA进行了提取和扩增,成功检测到所有样本DNA的STR分型,检测成功率为100%。结果表明法医DNA提取纯化试剂盒具有较高的灵敏度和检材适应性,提取得到的DNA... 本文利用自主研制的法医DNA提取纯化试剂盒在MP-120自动化工作站上对48份检材样本DNA进行了提取和扩增,成功检测到所有样本DNA的STR分型,检测成功率为100%。结果表明法医DNA提取纯化试剂盒具有较高的灵敏度和检材适应性,提取得到的DNA模板质量完全能够满足法医日常DNA检验工作的需要。 展开更多
关键词 法医dna提取纯化试剂盒 PCR STR分型
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法医DNA提取纯化试剂盒在Hamilton Microlab~ Starlet DNA自动提取仪上的应用研究 被引量:2
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作者 孙敬 赵兴春 +3 位作者 姜伯玮 欧元 张建 叶健 《生命科学仪器》 2010年第4期54-56,共3页
本文利用自主研制的法医DNA提取纯化试剂盒在Hamilton Microlab~ Starlet DNA自动提取仪上提取276份血斑样本DNA,PCR扩增检测到270份样本STR分型,成功率达97.8%。结果表明法医DNA提取纯化试剂盒可与国外进口的DNA自动提取仪相配伍进... 本文利用自主研制的法医DNA提取纯化试剂盒在Hamilton Microlab~ Starlet DNA自动提取仪上提取276份血斑样本DNA,PCR扩增检测到270份样本STR分型,成功率达97.8%。结果表明法医DNA提取纯化试剂盒可与国外进口的DNA自动提取仪相配伍进行血斑样本的批量提取。 展开更多
关键词 法医dna提取纯化试剂盒 dna自动提取 血斑样本
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DNA提取纯化技术的发展及在法医学中的应用
3
作者 赵兴春 叶健 姜成涛 《刑事技术》 2009年第B12期91-94,共4页
本文对国内外在DNA提取纯化技术上的发展以及相关试剂研究进行了综述,针对DNA提取纯化技术在法庭科学上的应用进行了归纳和展望。
关键词 dna提取纯化 发展 法医学
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活性污泥总DNA的提取和纯化
4
作者 吴楚 应尧 《廊坊师范学院学报(自然科学版)》 2008年第z2期42-43,共2页
在很多生物处理的工艺中,人们对处理过程的生物降解机理并不是很清楚,对处理过程的微生物的区系结构及主要的功能菌也知之甚少.微生物分子生态学可以帮助了解污泥中微生物区系的结构与功能动态变化情况,并鉴定主要的功能菌.本文对几种... 在很多生物处理的工艺中,人们对处理过程的生物降解机理并不是很清楚,对处理过程的微生物的区系结构及主要的功能菌也知之甚少.微生物分子生态学可以帮助了解污泥中微生物区系的结构与功能动态变化情况,并鉴定主要的功能菌.本文对几种常用的活性污泥总DNA的提取和纯化方法作了介绍并进行了总结和比较,根据这些方法原理对影响提取效果的因素做了分析,提出了相应的改进措施,以期建立满足微生物分子生态学研究的所需的DNA. 展开更多
关键词 活性污泥 dna提取纯化 分子生态
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不同处理对柿属植物DNA提取产率和品质的影响 被引量:5
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作者 易庆平 罗正荣 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期158-163,共6页
基于CTAB法对鄂柿一号、前川次郎、君迁子3份材料进行DNA提取纯化,探讨不同采样时期、不同的纯化及沉淀方法对柿属植物DNA产率和品质的影响。结果表明,不同时期采样对DNA产率影响很大,随叶片生长,DNA产率不断下降,成熟叶片DNA产率仅为... 基于CTAB法对鄂柿一号、前川次郎、君迁子3份材料进行DNA提取纯化,探讨不同采样时期、不同的纯化及沉淀方法对柿属植物DNA产率和品质的影响。结果表明,不同时期采样对DNA产率影响很大,随叶片生长,DNA产率不断下降,成熟叶片DNA产率仅为幼嫩叶片的16.7%~19.4%;在苯酚氯仿法、高盐乙醚法、CTAB沉淀法中以高盐乙醚法效果最好,可酶切,能有效去除多糖污染,产率较高;4种沉淀方法中,高浓度的盐溶液有助于去除多糖、多酚等杂质,相比单纯的乙醇或异丙醇沉淀可获得更高品质的DNA。另外,不同材料间提取DNA难度存在较大差异。 展开更多
关键词 柿属植物 dna提取纯化 优化
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阪崎肠杆菌核酸提取纯化方法分析比较
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作者 刘张岚 王晶 +2 位作者 石磊 黄晓蓉 张玲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期179-182,202,共5页
阪崎肠杆菌是一种食源性致病菌,目前越来越多的分子检测技术用于该菌的检测,以取代传统的检测技术。针对分子检测技术相应的核酸标准物质的研制势在必行。核酸的提取和纯化是核酸标准物质的研制过程中的重要环节之一,快速高效高质量,低... 阪崎肠杆菌是一种食源性致病菌,目前越来越多的分子检测技术用于该菌的检测,以取代传统的检测技术。针对分子检测技术相应的核酸标准物质的研制势在必行。核酸的提取和纯化是核酸标准物质的研制过程中的重要环节之一,快速高效高质量,低毒低成本已成为核酸提取的重要目标。就现有方法进行分析比较,重点对常用的三种提取微生物基因组DNA的试剂盒进行了全方位比较,获得了阪崎肠杆菌较优的基因组DNA提取方法,并对提取的DNA进行PCR特异性扩增检测,获得较清晰的谱带。为阪崎肠杆菌核酸标准物质的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 dna提取纯化 方法比较 标准物质
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一种河口沉积物总DNA的高效提取方法 被引量:3
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作者 王东升 黄江丽 +3 位作者 谭胤静 田晓娟 张志红 丁建南 《江西科学》 2014年第3期323-327,共5页
研究主要目的是从河口沉积物中提取高质量DNA,为后期应用分子生物学技术研究河口沉积物微生物功能基因及种群分析等奠定基础。用CTAB-SDS-冻融法,样品预处理-CTAB-SDS-冻融法,样品预处理-CTABSDS-冻融-DNA重沉淀法和土壤总DNA提取试剂... 研究主要目的是从河口沉积物中提取高质量DNA,为后期应用分子生物学技术研究河口沉积物微生物功能基因及种群分析等奠定基础。用CTAB-SDS-冻融法,样品预处理-CTAB-SDS-冻融法,样品预处理-CTABSDS-冻融-DNA重沉淀法和土壤总DNA提取试剂盒法提取3种河口沉积物总DNA,通过DNA琼脂糖凝胶电泳、DNA纯度和浓度及16S rDNA的PCR扩增分别对这4种方法进行评价。结果显示,样品预处理-CTABSDS-冻融法-DNA重沉淀所提取的DNA质量最高,可以用于后续的分子生物学研究。 展开更多
关键词 河口沉积物 环境微生物 dna提取纯化 方法优化
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Methodological Studies on Genomic DNA Extraction and Purification from Plant Drug Materials 被引量:12
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作者 曹晖 毕培曦 邵鹏柱 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 1998年第3期18-25,共8页
This paper reports the rationale and methods of DNA extraction and purification from nine species of Compositae and four commercial drugs of corresponding plant Elephantopus scaber. The comparison of three methods: Cs... This paper reports the rationale and methods of DNA extraction and purification from nine species of Compositae and four commercial drugs of corresponding plant Elephantopus scaber. The comparison of three methods: CsCl gradient, CTAB/CsCl gradient and CTAB miniprep extraction by yield, purity and factors affecting PCR was carried out. In conclusion, CTAB miniprep method provides a rapid, effective, economic approach for isolating genomic DNA for Chinese drug identification by genomic fingerprints. 展开更多
关键词 dna extraction dna purification CTAB miniprep Genomic fingerprinting AP PCR
全文增补中
An Efficient Procedure for DNA Isolation and Profiling of the Hyper Variable MtDNA Sequences
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作者 Nazia Akbar Habib Ahmad +2 位作者 Muhammad Shahid Nadeen Nasir Ali Muhammad Saadiq 《Journal of Life Sciences》 2015年第11期530-534,共5页
Present study describes the results of an efficient protocol for the isolation of good quality DNA from human saliva. The protocol includes collection of saliva in sterile specimen tubes, followed by the cell lysis. A... Present study describes the results of an efficient protocol for the isolation of good quality DNA from human saliva. The protocol includes collection of saliva in sterile specimen tubes, followed by the cell lysis. After formation of cell lysate, proteins wereextracted by phenol chloroform treatment for purification of DNA. The purified DNA was precipitated by adding equal volume of isopropanol to the treated supernatant. After isolation DNA pellet was washed with 70% ethanol, air-dried and was suspended in 30 pL of double distilled water. Best quality of DNA was extracted from the saliva samples and the PCR product was amplified for hyper-variable regions (HVI& HV2) of the mitochondrial DNA. The genes were cleaned with GeneAll gel elution kit (Gel SV) (Cat. No. 102-10) and sequenced accordingly. The DNA isolation protocol presented here is recommended for the isolation, best quality and yield of DNA from the human saliva. 展开更多
关键词 Human saliva dna isolation mtdna sequences forensic study.
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Improvements on environmental DNA extraction and purification procedures for matagenomic analysis
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作者 谢建平 吴力游 +6 位作者 J.D.van Nostrand 贺志理 吕镇梅 于浩 熊金波 刘新星 周集中 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2012年第11期3055-3063,共9页
Our previously described environmental DNA extraction method has been widely used in environmental microbial community analysis. However, residual humic substances may remain with obtained environmental DNA, which int... Our previously described environmental DNA extraction method has been widely used in environmental microbial community analysis. However, residual humic substances may remain with obtained environmental DNA, which interferes downstream molecular analyses. To remedy this situation, two DNA extraction buffers (PIPES and Tris-HCl) and four purification strategies including our new modified low melting point gel purification method and three commercial kits from QIAEX, Omega and Promega were evaluated with diverse soil samples. The PIPES buffer (pH 6.5) is found to be more effective for removing the humic substances, but it leads to lower DNA yield and causes more severe DNA shearing than using the Tris-HC1 buffer (pH 8.0). Gel purification and the Promega purification kit achieve much higher DNA recoveries than QIAEX or Omega kit, and higher purity of DNA is obtained by gel purification than by the Promega kit with both DNA extraction buffers mentioned above. Considering all results together, two alternative methods for DNA extraction and purification are proposed: one uses Tris-HCl buffer extraction and gel purification as the primary approach when the amount of soil or biomass is not a major concern, and the other uses PIPES buffer extraction and the Promega kit purification when severe DNA shearing and/or limited biomass occurs. Purified DNA samples by both methods are amenable for use as templates for whole community genome amplifications and PCR amplifications of bacterial 16S rRNA genes. It is demonstrated that these two alternative methods could be applied to a wide variety of environmental samples. 展开更多
关键词 dna extraction dna purification metagenomic analysis GeoChip PYROSEQUENCING
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堆肥宏基因组柯斯质粒文库的构建和DNA提取技术的改进 被引量:1
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作者 庞浩 封毅 +1 位作者 唐纪良 冯家勋 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期768-772,共5页
堆肥环境中高浓度腐殖酸的存在阻碍了对这个环境中的未培养微生物的宏基因组研究。我们提出了一个确实可行的提取堆肥环境DNA的方法,这个方法通过使用Sephadex G200+酸洗PVPP层析柱与电洗脱两步纯化的方法成功地纯化堆肥环境来源的DNA,... 堆肥环境中高浓度腐殖酸的存在阻碍了对这个环境中的未培养微生物的宏基因组研究。我们提出了一个确实可行的提取堆肥环境DNA的方法,这个方法通过使用Sephadex G200+酸洗PVPP层析柱与电洗脱两步纯化的方法成功地纯化堆肥环境来源的DNA,用提取的DNA成功构建了一个包含约10万个克隆的柯斯质粒文库。从这个文库中筛选到一个新的β-葡萄糖苷酶基因。针对文库低的阳性筛选率问题,利用分子技术研究了不同的分离速度对提取到的总DNA中真核生物DNA量的影响,以减少文库中真核生物DNA的污染。 展开更多
关键词 堆肥 宏基因组 dna提取纯化 柯斯质粒文库
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实时荧光PCR在鉴别奶粉中掺入大豆成分的应用研究 被引量:15
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作者 岳巧云 陈定虎 +2 位作者 伍朝晖 周灼标 邱德义 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期190-193,共4页
首次利用实时荧光PCR方法,以大豆内源参照基因lectin为指标,对奶粉中掺入豆粉等植物成分进行定性、定量分析研究。结果表明,通过正己烷抽提奶粉中的油脂,苯酚抽提奶粉中的蛋白质等处理步骤后,应用植物基因组DNA提取试剂盒能够得到高质量... 首次利用实时荧光PCR方法,以大豆内源参照基因lectin为指标,对奶粉中掺入豆粉等植物成分进行定性、定量分析研究。结果表明,通过正己烷抽提奶粉中的油脂,苯酚抽提奶粉中的蛋白质等处理步骤后,应用植物基因组DNA提取试剂盒能够得到高质量的DNA模板。实时荧光PCR反应结果表明,该方法判定奶粉中掺入植物成分的灵敏度大大提高;奶粉中掺入大豆粉或大豆制品的掺入量与实时荧光PCR扩增曲线及循环数呈良好的对应关系。实时荧光PCR法能够对奶粉中掺入的植物成分进行快速准确地定性、定量分析,可以作为市场监督和检验鉴定的可行性方法。 展开更多
关键词 奶粉 实时荧光PCR 植物蛋白成分 dna提取纯化
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接触DNA在法医实践中的应用研究进展 被引量:20
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作者 黄艳梅 王萌鸽 赵兴春 《中国法医学杂志》 CSCD 2016年第2期151-155,共5页
人体在接触物体后,会在其表面留下少量接触DNA。对接触DNA的检验是目前法医DNA检验技术的热点和难点。接触DNA的检验成功率差异较大,受各环节多重因素影响。影响接触DNA检验成功率的主要因素有接触DNA检材的准确发现、接触DNA的提取与... 人体在接触物体后,会在其表面留下少量接触DNA。对接触DNA的检验是目前法医DNA检验技术的热点和难点。接触DNA的检验成功率差异较大,受各环节多重因素影响。影响接触DNA检验成功率的主要因素有接触DNA检材的准确发现、接触DNA的提取与纯化以及扩增策略的选择和结果分析等。本文详述了接触DNA检验过程的进展及研究展望。 展开更多
关键词 法医物证学 接触dna 检材提取 dna提取纯化
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接触DNA在法医实践中的应用研究进展
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作者 刘硕 《中国科技期刊数据库 医药》 2018年第9期220-220,共1页
无论人体接触任何物体,在接触后都会在物体表面留下少量接触DNA。目前我国对接触DNA的检验一直是法医DNA检验技术的重难点,相关科技人员在未来需要不断努力,为公安机关案件侦查贡献力量。接触DNA的检验成功率相差较大,影响因素有各方面... 无论人体接触任何物体,在接触后都会在物体表面留下少量接触DNA。目前我国对接触DNA的检验一直是法医DNA检验技术的重难点,相关科技人员在未来需要不断努力,为公安机关案件侦查贡献力量。接触DNA的检验成功率相差较大,影响因素有各方面,不仅受环境影响,还会有人为因素等等各环节多重因素影响。对于接础的人检验成功率影响最大的包括以下三点:是否能准确发现接触DNA的检材,基础DNA的提取与纯化,扩张策略的选择和结果分析。本文主要探究关于接触DNA检验的整个过程,以及在接触DNA发展进程中的研究展望。 展开更多
关键词 法医物证学 接触dna 检材提取 dna提取纯化
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