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T-DNA插入产生的水稻白化苗突变的遗传分析 被引量:8
1
作者 张泽民 朱海涛 +6 位作者 王江 高菊 陈兆贵 刘芳 宛新杉 张景六 张桂权 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期1-5,共5页
在筛选和鉴定水稻T-DNA(含Basta抗性基因Bar)插入纯合体的过程中,观察到1个白化苗的突变体.对该突变体进行遗传分析表明,分离群体出现绿苗和白化苗2种类型,其分离比率为3∶1,符合1对基因的显性遗传.Basta抗性检测、PCR分子检测及Souther... 在筛选和鉴定水稻T-DNA(含Basta抗性基因Bar)插入纯合体的过程中,观察到1个白化苗的突变体.对该突变体进行遗传分析表明,分离群体出现绿苗和白化苗2种类型,其分离比率为3∶1,符合1对基因的显性遗传.Basta抗性检测、PCR分子检测及Southern杂交证实,该突变体是由单一T-DNA插入所引起的,白化苗性状与T-DNA共分离.该突变材料可用于插入座位的基因克隆. 展开更多
关键词 水稻 白化苗突变体 T—dna插入 遗传分析
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稻瘟病菌T-DNA插入突变体库构建及致病相关突变体筛选 被引量:10
2
作者 贺春萍 林春花 +2 位作者 廖奇亨 李锐 郑服丛 《热带作物学报》 CSCD 2007年第1期80-84,共5页
利用农杆菌T-DNA介导的遗传转化体系转化稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)Y34菌株,平均每转化1.0×106个稻瘟病菌分生孢子可得到约300个抗潮霉素菌株。用该转化体系转化和筛选,获得抗潮霉素菌株6855个。PCR检测结果表明,所有表现抗潮... 利用农杆菌T-DNA介导的遗传转化体系转化稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)Y34菌株,平均每转化1.0×106个稻瘟病菌分生孢子可得到约300个抗潮霉素菌株。用该转化体系转化和筛选,获得抗潮霉素菌株6855个。PCR检测结果表明,所有表现抗潮霉素菌株均含抗潮霉素基因,说明抗潮霉素特性是T-DNA携带潮霉素基因插入Y34基因组的表型效应,即抗潮霉素菌株是T-DNA插入突变体。对56个突变体DNASouthern检测结果表明,有27个突变体是单拷贝插入,突变体T-DNA插入拷贝数平均为1.43。随机取1600个突变体进行致病力测定,结果发现23个突变体完全丧失致病能力。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 T—dna插入突变 致病相关突变体 SOUTHERN杂交
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T-DNA插入产生的水稻迟抽穗突变体的遗传分析 被引量:11
3
作者 陈兆贵 王江 +5 位作者 张泽民 刘芳 朱海涛 宛新杉 张景六 张桂权 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2004年第1期75-80,共6页
在筛选和鉴定水稻T-DNA插入纯合体的过程中,观察到一个迟抽穗的突变体。对该突变体进行遗传分析的结果表明,分离群体后代中出现正常抽穗、迟抽穗和特迟抽穗3种类型,分离比率为1∶2∶1,符合一对基因的不完全显性遗传;对突变体及其后代分... 在筛选和鉴定水稻T-DNA插入纯合体的过程中,观察到一个迟抽穗的突变体。对该突变体进行遗传分析的结果表明,分离群体后代中出现正常抽穗、迟抽穗和特迟抽穗3种类型,分离比率为1∶2∶1,符合一对基因的不完全显性遗传;对突变体及其后代分离群体做Basta抗性检测及PCR分子检测,证实该突变体是由T-DNA插入所引起的,突变性状与T-DNA共分离。该材料可用于插入座位的基因克隆。 展开更多
关键词 水稻 生育期 突变体 T—dna插入
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水稻T-DNA插入雄配子不育突变体的创建 被引量:2
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作者 陈睿 于法科 +2 位作者 刘华清 杨绍华 王锋 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期173-181,共9页
对6000多个转基因T-DNA插入水稻株系进行异常遗传分离分析(选择标记基因为潮霉素磷酸转移酶基因hpt),发现216个转基因株系的T-DNA呈现1∶1分离。接着利用测交方法检测T-DNA的遗传规律,初步确定其中57个候选株系为雄配子不育候选突变体... 对6000多个转基因T-DNA插入水稻株系进行异常遗传分离分析(选择标记基因为潮霉素磷酸转移酶基因hpt),发现216个转基因株系的T-DNA呈现1∶1分离。接着利用测交方法检测T-DNA的遗传规律,初步确定其中57个候选株系为雄配子不育候选突变体。随后对候选突变株进行多代遗传分析及花粉细胞学观察,结果表明其中的38个突变体花粉黑染率约为50%,自交后代T-DNA的异常分离是由于转基因植株的花粉半不育所致,T-DNA的传递只能通过雌配子体。另外,利用ELISA定量测定突变体中cry1Ac(Bt)基因编码蛋白的表达量,发现花粉的这种不育性与外源基因的表达量之间没有直接关系,推测这38个雄配子突变体败育的原因主要是T-DNA插入引起内源基因变异。TAIL-PCR获得了22个水稻雄配子不育T-DNA插入突变体的侧翼序列,通过BLAST检索,定位了15个不同的插入位点,其中12个插入位点位于基因区或基因调控区。 展开更多
关键词 水稻 异常分离 雄配子不育 T dna插入 突变体
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T-DNA插入麝香百合的研究(英文) 被引量:3
5
作者 李刚 刘菊华 +2 位作者 谭光兰 徐碧玉 金志强 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第2期33-35,41,共4页
采用2步外植体法结合比较成熟的农杆菌介导T—DNA插入技术转化麝香百合,为快速选育百合新品种奠定基础。
关键词 麝香百合 2步外植体法 T—dna插入技术 快速选育
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大片段DNA插入文库的研究进展 被引量:8
6
作者 陈凡国 张学勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第2期1-5,共5页
基因组DNA大片段插入文库作为基因组学和基因克隆的技术平台 ,它的发展主要经历了Cosmid文库、YACs文库、BACs文库三个阶段 ,文中对几种文库作了简单的比较和评价 ,对大片段文库的应用作了比较详实的介绍。作者根据自己的建库经验 ,重... 基因组DNA大片段插入文库作为基因组学和基因克隆的技术平台 ,它的发展主要经历了Cosmid文库、YACs文库、BACs文库三个阶段 ,文中对几种文库作了简单的比较和评价 ,对大片段文库的应用作了比较详实的介绍。作者根据自己的建库经验 ,重点介绍了BAC文库的构建。 展开更多
关键词 大片段dna插入 研究进展 基因组文库 细菌人工染色体 应用
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一种从重组质粒快速提纯DNA插入片段的方法
7
作者 江昌俊 张明渝 《生物技术》 CAS CSCD 1995年第3期40-41,共2页
本文介绍一种从重组质位中快速提纯DNA插入片段的方法.质粒DNA的制备简单、快速,分离的质粒洲DNA可用于限制性酶切和转化大肠杆菌等.从琼脂糖凝胶中提纯DNA注入片段的方法操作简单,回收效率高,提纯的DNA片段可用于... 本文介绍一种从重组质位中快速提纯DNA插入片段的方法.质粒DNA的制备简单、快速,分离的质粒洲DNA可用于限制性酶切和转化大肠杆菌等.从琼脂糖凝胶中提纯DNA注入片段的方法操作简单,回收效率高,提纯的DNA片段可用于连接和制备杂交探针等. 展开更多
关键词 重组质粒 dna插入片段 提纯
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La(Ⅲ)配合物的抗氧化性和DNA结合性质研究 被引量:5
8
作者 刘永春 徐秀英 +3 位作者 雷瑞霞 张小伟 武芸 杨正银 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1475-1483,共9页
由8-羟基喹啉-2-甲醛和四个芳香酰肼合成的四种希夫碱配体分别与La(NO3)3·6H2O反应合成了四个La(Ⅲ)配合物。La(Ⅲ)和每个配体均形成双核的1:1(金属:配体)型9配位配合物。这些配合物均能与小牛胸腺DNA以插入作用较强结... 由8-羟基喹啉-2-甲醛和四个芳香酰肼合成的四种希夫碱配体分别与La(NO3)3·6H2O反应合成了四个La(Ⅲ)配合物。La(Ⅲ)和每个配体均形成双核的1:1(金属:配体)型9配位配合物。这些配合物均能与小牛胸腺DNA以插入作用较强结合,结合力常数为10^-6~10^7L·mol^-1。这些配合物均有较强的清除羟基自由基和超氧负离子自由基的抗氧化活性。含有酚羟基基团的配合物表现出较强的清除羟基自由基的活性.而含有N-杂环基团的配合物表现出较强的清除超氧负离子自由基的活性。 展开更多
关键词 抗氧化 小牛胸腺dna 稀土金属配合物 希夫碱 dna插入试剂
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4-(1H-1,2,4-三唑-1-亚甲基)苯甲酸过渡金属配合物的合成、结构、抑菌活性及DNA裂解活性(英文) 被引量:3
9
作者 李婕 熊萍萍 +1 位作者 步怀宇 陈三平 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1354-1362,共9页
以4-(1H-1,2,4-三唑-1-亚甲基)苯甲酸(HL)为配体,水热合成了三个过渡金属配合物[Cu0.5L]n(1),{[Ni(L)2·(H2O)2]·(H2O)2}n(2),{[Co(L)2·(H2O)2]·(H2O)2}n(3);运用红外光谱、元素分析、单晶X射线衍射、热分析、紫外... 以4-(1H-1,2,4-三唑-1-亚甲基)苯甲酸(HL)为配体,水热合成了三个过渡金属配合物[Cu0.5L]n(1),{[Ni(L)2·(H2O)2]·(H2O)2}n(2),{[Co(L)2·(H2O)2]·(H2O)2}n(3);运用红外光谱、元素分析、单晶X射线衍射、热分析、紫外光谱和荧光光谱等手段对化合物进行了表征.结构分析表明,配合物1呈现一维(1D)的链状结构,而同构的配合物2和3则通过链间的氢键连接为三维(3D)网状结构.抑菌活性研究表明,配合物对镰刀菌、苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌、梨炭疽病菌和烟草赤星病菌均有良好的抑菌效果,特别是配合物1的抑菌效果最为显著.质粒DNA(pUC 18)裂解活性实验结果表明,相比较于化合物2和3,化合物1能更有效地促进质粒DNA裂解.进一步采用光谱法检测三种配合物对DNA的结合作用.结果显示三种配合物均可插入DNA分子中,其中配合物1的插入作用最为强烈. 展开更多
关键词 过渡金属配合物 晶体结构 抑菌活性 dna裂解活性 dna插入
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8-羟基喹啉-2-醛-芳香酰腙Cu(Ⅱ)配合物的合成及其与DNA相互作用
10
作者 雷瑞霞 唐步蔚 +2 位作者 孙成君 刘琰琰 刘永春 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 2010年第3期450-454,共5页
合成并表征8-羟基喹啉-2-醛-苯甲酰腙Cu(II)配合物(2 a)和8-羟基喹啉-2-醛-对羟基苯甲酰腙Cu(II)配合物(2b),利用黏度滴定、紫外光谱和荧光光谱法研究它们与CT-DNA相互作用情况.实验结果表明,配合物2 a和2b均为良好的DNA插入试剂,它们与... 合成并表征8-羟基喹啉-2-醛-苯甲酰腙Cu(II)配合物(2 a)和8-羟基喹啉-2-醛-对羟基苯甲酰腙Cu(II)配合物(2b),利用黏度滴定、紫外光谱和荧光光谱法研究它们与CT-DNA相互作用情况.实验结果表明,配合物2 a和2b均为良好的DNA插入试剂,它们与DNA的结合常数分别为1.162×106L.mol-1和6.934×106L.mol-1,均为潜在的抗肿瘤药物. 展开更多
关键词 CU(II)配合物 8-羟基喹啉-2-醛-苯甲酰腙 8-羟基喹啉-2-醛-对羟基苯甲酰腙 小牛胸腺dna(CT-dna) dna插入试剂
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The effects of DNA intercalators on chromatin of chicken red blood cells---differential extraction on nonhistone proteins
11
作者 Wang Fan and Zhu JingdeShanghai Institute of Cell Biology,Shanghai Open Labortory of Life Science, Academia Sinica, 320 Yue-yang Road, Shanghai 200031, China 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1990年第1期105-118,共14页
Taking advantage of the effects on DNA secondary structure of two DNA-intercalators,ethidium bromide and chloroquine,we used each of them to treat nuclei from both mature erythrocytes and reticulocytes of chicken,as a... Taking advantage of the effects on DNA secondary structure of two DNA-intercalators,ethidium bromide and chloroquine,we used each of them to treat nuclei from both mature erythrocytes and reticulocytes of chicken,as an alternative approach to study the relationships between DNA secondary structure,nuclear proteins and chromatin structure.We presented results of differential extraction of nuclear proteins from nuclei with DNA-intercalators,as well as preliminary characterization of these proteins.A 45kd protein is the major component in fractions extracted by both intercalators from nuclei from either mature erythrocytes or reticulocytes and seems to be a DNA-binding protein.Furthermore,from current concepts of functional aspects of DNA conformation and structural heterogeneity in chromatin and nuclear proteins,we have discussed both the significance of our results as well as technical aspects of this approach. 展开更多
关键词 dna插入 鸡红细胞染色质 核蛋白 过卷曲 抽提 肝素亲和色谱法
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根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展 被引量:10
12
作者 周芳芳 李志芳 +4 位作者 冯自力 师勇强 赵丽红 李彩红 朱荷琴 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期461-467,共7页
农杆菌介导遗传转化成为真菌实现菌种改良、新基因标记及目的基因的筛选、分离和克隆的重要方法之一。该方法操作简单、受体范围广、转化效率高、单拷贝率高及突变体遗传稳定,解决了传统转化方法的瓶颈。利用该方法成功实现了多种真菌... 农杆菌介导遗传转化成为真菌实现菌种改良、新基因标记及目的基因的筛选、分离和克隆的重要方法之一。该方法操作简单、受体范围广、转化效率高、单拷贝率高及突变体遗传稳定,解决了传统转化方法的瓶颈。利用该方法成功实现了多种真菌大容量高质量突变体库的构建,且在各类真菌突变体库构建的基础上,相关基因的筛选和功能基因的验证工作成为下一步的研究热点,进而为各类病原菌致病机理的深入研究提供依据,为抗病育种等亟待解决的问题奠定基础。 展开更多
关键词 农杆菌 真菌 遗传转化 T—dna插入 突变体
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3,5-二碘水杨醛缩邻苯二胺Ni(Ⅱ)配合物的合成及生物活性 被引量:1
13
作者 李晓红 杨天林 +2 位作者 王敏 霍丽娜 李艳萍 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期43-47,共5页
合成了3,5-二碘水杨醛缩邻苯二胺席夫碱合镍(Ⅱ)配合物。通过核磁共振、元素分析、紫外光谱、红外光谱及摩尔电导对结构进行了表征,用Gaussian03程序优化计算,确定配合物的结构为Ni(Ⅱ)L。通过紫外光谱、粘度法及与溴化乙锭(EB)的竞争实... 合成了3,5-二碘水杨醛缩邻苯二胺席夫碱合镍(Ⅱ)配合物。通过核磁共振、元素分析、紫外光谱、红外光谱及摩尔电导对结构进行了表征,用Gaussian03程序优化计算,确定配合物的结构为Ni(Ⅱ)L。通过紫外光谱、粘度法及与溴化乙锭(EB)的竞争实验,研究了配合物与小牛胸腺DNA(ct-DNA)的作用情况。结果显示,配合物与DNA作用时,紫外吸收发生明显的减色效应,其结合常数为Kb=1.129×105L/mol;EB-DNA体系的荧光强度随配合物的加入迅速减弱;配合物的加入使ct-DNA的粘度增加。这些结果表明,该化合物以插入式与ct-DNA键合。并用打孔法测试了配合物对藤黄微球菌(M.luteus)的抑制作用。 展开更多
关键词 含碘席夫碱 Ni(Ⅱ)配合物 光谱性质 dna插入作用 抑菌活性
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8-羟基喹啉-2-醛缩芳香酰肼Ni(Ⅱ)配合物的合成及表征 被引量:1
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作者 张克钧 刘永春 +2 位作者 胡怀生 武芸 赵俊英 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1461-1465,共5页
合成并表征了8-羟基喹啉-2-醛缩苯甲酰肼、8-羟基喹啉-2-醛缩水杨酰肼以及8-羟基喹啉-2-醛缩对羟基苯甲酰肼Ni(Ⅱ)配合物,并利用黏度滴定、紫外光谱和荧光光谱法研究了它们与CT-DNA相互作用情况。结果表明,这些配合物均为良好的DNA插入... 合成并表征了8-羟基喹啉-2-醛缩苯甲酰肼、8-羟基喹啉-2-醛缩水杨酰肼以及8-羟基喹啉-2-醛缩对羟基苯甲酰肼Ni(Ⅱ)配合物,并利用黏度滴定、紫外光谱和荧光光谱法研究了它们与CT-DNA相互作用情况。结果表明,这些配合物均为良好的DNA插入试剂,它们与DNA的结合常数(Kb)分别为1.006×105 M-1、9.154×105 M-1和2.663×105 M-1。 展开更多
关键词 Ni(Ⅱ)配合物 Shiff碱 小牛胸腺dna(CT-dna) dna插入试剂
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大豆GAMYB基因序列分析及拟南芥同源突变体鉴定
15
作者 李文滨 刘丽雪 +6 位作者 谷月娇 闫海波 吕庆雪 赵琳 王朋朋 张可欣 丁福全 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期1-6,共6页
GAMYB基因是赤霉素(GA)信号转导途径中的一个重要促进因子,该基因与植物由营养生长向生殖生长的开花过渡以及生殖发育有重要关系。通过构建系统进化树分析,发现该基因与拟南芥MYB33和MYB65亲缘关系较近,根据TAIR网站上公布的GAMYB-Like... GAMYB基因是赤霉素(GA)信号转导途径中的一个重要促进因子,该基因与植物由营养生长向生殖生长的开花过渡以及生殖发育有重要关系。通过构建系统进化树分析,发现该基因与拟南芥MYB33和MYB65亲缘关系较近,根据TAIR网站上公布的GAMYB-Like基因信息,从美国拟南芥生物资源中心购买该基因的T-DNA插入拟南芥突变体材料,运用双引物法对此突变体进行T-DNA插入位点的鉴定,分别获得3株和6株稳定遗传的纯合突变体,可为深入研究GmGAMYB基因的功能及进行互补拟南芥突变体myb33或myb65试验奠定基础。 展开更多
关键词 GmGAMYB 序列分析 T—dna插入突变体 拟南芥
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蒽二酮类抗肿瘤药物的研究进展 被引量:5
16
作者 杨新颖 倪沛洲 陆涛 《药学进展》 CAS 2002年第5期261-265,共5页
蒽二酮类化合物抗肿瘤活性显著 ,是一类重要的抗肿瘤药物 ,本文综述了该类化合物的作用机制、构效关系。
关键词 研究进展 蒽二酮 抗肿瘤 拓扑异构酶Ⅱ dna插入 心脏毒性
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酿酒酵母磷酸甘油酸激酶基因(PGK1)的分子克隆和特性研究 被引量:3
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作者 杨艳卿 刘玉方 +1 位作者 郭子剑 蔡金科 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期279-283,共5页
以大肠杆菌和酵母菌穿校质粒pCN60为载体,大肠杆菌C600或HB101为受体构建成酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)Hind Ⅲ基因文库。从基因文库中提取重组DNA转化酵母受体XSB44-35D(a,pgkl,leul,adel,trpl,gall),选出转化体Pgk1^+。琼脂... 以大肠杆菌和酵母菌穿校质粒pCN60为载体,大肠杆菌C600或HB101为受体构建成酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)Hind Ⅲ基因文库。从基因文库中提取重组DNA转化酵母受体XSB44-35D(a,pgkl,leul,adel,trpl,gall),选出转化体Pgk1^+。琼脂糖凝胶电泳指出所插入的DNA片段长度为3.1kb。 PGK1 DNA片段插入的方向性是此基因的5'-侧翼区靠近pCN60的BamH Ⅰ位点,而3'-侧翼区接近Bgl Ⅱ位点。Cla Ⅰ,EcoRV,Kpn Ⅰ,Xba Ⅰ,Pst Ⅰ,Hind Ⅲ,BamH Ⅰ及Pvu Ⅰ等核酸内切酶制作的酶切图谱的结果表明,除报道的PGK酶切位点外,还发现一个新的Kpn Ⅰ及一个新的Cla Ⅰ位点。 展开更多
关键词 PGKI基因克隆 酶切图谱 dna插入
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CRISPR/Cas核糖核蛋白介导的植物基因组编辑 被引量:6
18
作者 李霞 施皖 +1 位作者 耿立召 许建平 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期556-564,共9页
CRISPR/Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins)系统作为一种重要的基因编辑工具,自诞生以来被广泛应用于作物的性状改良。与CRISPR/Cas DNA载体介导的植物基因组编辑相比,CRISPR/... CRISPR/Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins)系统作为一种重要的基因编辑工具,自诞生以来被广泛应用于作物的性状改良。与CRISPR/Cas DNA载体介导的植物基因组编辑相比,CRISPR/Cas核糖核蛋白(CRISPR/Cas ribonucleoprotein,CRISPR/Cas RNP)介导的植物基因组编辑具有作用迅速、脱靶率低和无外源DNA插入(DNA-free)等优点,因而无需清除CRISPR编辑工具而更容易获得纯合的编辑体。但是,由于植物细胞转化方法和细胞再生技术的限制,不借助筛选标记的辅助将CRISPR/Cas RNP直接导入植物细胞并获得高效基因编辑仍比较困难,直接限制了CRISPR/Cas RNP在植物基因组编辑中的广泛应用。本文系统介绍了CRISPR/Cas RNP基因组编辑技术的分子作用机理及其优势,并总结了CRISPR/Cas RNP导入植物细胞的方法,最后对CRISPR/Cas RNP在植物基因组编辑中的新应用和新思路进行了展望,以期为进一步改进CRISPR/Cas RNP基因组编辑技术和扩大其在作物改良中的应用提供参考。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas 基因编辑 核糖核蛋白 无外源dna插入 植物转化
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用组合引物PCR法简便快速筛选阳性正向克隆 被引量:1
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作者 徐意 《重庆科技学院学报(自然科学版)》 CAS 2009年第3期52-54,共3页
PCR扩增的小片段DNA用T载体连接,转化受体菌后观察不到典型的蓝/白斑。用插入片段的特异性引物对菌落进行PCR来筛选阳性正向重组子,测序鉴定结果吻合率达100%,说明当利用颜色特性挑选阳性克隆成为困难时,菌落PCR技术是一种简单、快速、... PCR扩增的小片段DNA用T载体连接,转化受体菌后观察不到典型的蓝/白斑。用插入片段的特异性引物对菌落进行PCR来筛选阳性正向重组子,测序鉴定结果吻合率达100%,说明当利用颜色特性挑选阳性克隆成为困难时,菌落PCR技术是一种简单、快速、可靠的筛选方法。 展开更多
关键词 组合引物PCR法 蓝/白斑筛选方法 外源dna插入方向 T载体克隆 菌落PCR
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利用CRISPR/Cas9技术对人多能干细胞进行高效基因组编辑 被引量:2
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作者 刘改改 李爽 +2 位作者 韦余达 张永贤 丁秋蓉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1167-1173,共7页
CRISPR/Cas9技术提供了一个全新的基因组编辑体系。本文利用CRISPR/Cas9平台,在人胚胎干细胞株中对选取的一段特定基因组区域进行了多种基因组编辑:通过在基因编码框中引入移码突变进行基因敲除;通过单链DNA提供外源模板经由同源重组定... CRISPR/Cas9技术提供了一个全新的基因组编辑体系。本文利用CRISPR/Cas9平台,在人胚胎干细胞株中对选取的一段特定基因组区域进行了多种基因组编辑:通过在基因编码框中引入移码突变进行基因敲除;通过单链DNA提供外源模板经由同源重组定点敲入FLAG序列;通过同时靶向多个位点诱导基因组大片段删除。研究结果表明CRISPR/Cas9可以对多能干细胞进行高效基因编辑,获得的突变干细胞株有助于对基因和基因组区域的功能进行分析和干细胞疾病模型的建立。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9基因编辑 人多能干细胞 基因敲除 dna序列定点插入 基因组大片段删除
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