精子DNA断裂指数对补救ICSI结局的影响及补救ICSI的临床价值

目的:补救卵胞浆内单精子注射术(rescue intracytoplasmic sperm injection,R-ICSI)作为体外受精(in vitro fertilization,IVF)失败的补救方案,目前已广泛开展,但是未能明显提高受精率、临床妊娠率等。精子DNA断裂指数(DNA fragmentation index,DFI)与人工辅助生殖妊娠结局高度相关。本研究旨在探讨精子DFI对R-ICSI结局的影响及R-ICSI的临床价值。方法:回顾性分析2014年1月至2019年12月间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心IVF受精失败后行R-ICSI的140对不孕不育症夫妇,并将其分为完全受精失败(total fertilization failure,TFF)后行R-ICSI且DFI<30%(TFF+低DFI)组(n=63)、TFF后行R-ICSI且DFI≥30%(TFF+高DFI)组(n=16)、部分受精失败(partial fertilization failure,PFF)后行R-ICSI且DFI<30%(PFF+低DFI)组(n=52)、PFF后行R-ICSI且DFI≥30%(PFF+高DFI)组(n=9)。新鲜移植周期的胚胎来源均为R-ICSI。观察比较不同精子DFI在两种受精失败情况下患者的一般情况(不育年限、男方年龄、女方年龄、基础促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH)水平、基础黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平、窦卵泡个数、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)日子宫内膜厚度、获卵数)和R-ICSI周期结局(受精率、正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率及活产率)。结果:TFF+低DFI组和TFF+高DFI组患者的一般情况和R-ICSI周期结局差异均无统计学意义(均P>0.05)。PFF+低DFI组和PFF+高DFI组患者的一般情况差异均无统计学意义(均P>0.05)。PFF+低DFI组受精率、正常受精率均高于PFF+高DFI组,差异均有统计学意义(分别为85.40%vs 72.41%,71.90%vs 58.62%;均P<0.05);但2组患者卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率及活产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。TFF的R-ICSI周期共79个新鲜周期,57个新鲜移植周期,761个未受精卵,对584个M II期卵子行R-ICSI,受精率为83.22%,正常受精率为75.51%,卵裂率为98.15%,优质胚胎率为40.74%,种植率为30.56%,临床妊娠率为43.86%,获得29个活产儿。PFF的R-ICSI周期共61个新鲜周期,31个新鲜移植周期,721个未受精卵,对546个M Ⅱ期卵子行R-ICSI,受精率为83.33%,正常受精率为69.78%,卵裂率为97.36%,优质胚胎率为44.39%,种植率为25.42%,临床妊娠率为45.16%,获得12个活产儿。结论:在常规IVF PFF的情况下,精子DFI影响R-ICSI受精率和正常受精率;对于常规IVF TFF或PFF,ICSI都可作为有效补救方案。

不同精子DNA断裂指数检测方法与IVF/ICSI妊娠结局关系的Meta分析

目的系统评价不同精子DNA断裂指数检测方法与IVF/ICSI结局的关系。方法计算机检索Cochrane Library、Pub Med、EMbase、中国生物医学文献数据库、万方数据库等,收集符合纳入标准的研究,检索时限均为从建库至2015年3月,并追溯纳入研究的参考文献和手工检索相关会议资料。由两位研究者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料和评价质量后,采用Rev Man5.2软件进行Meta分析。结果共纳入16个病例对照研究,共计3105例患者,meta分析结果显示,若采用TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记),精子DFI升高显著增加IVF/ICSI流产率(P<0.01),DFI降低显著提高IVF/ICSI妊娠率(P<0.01);若采用SCSA(染色质结构分析),DFI升高仅显著增加ICSI流产率(P=0.05),对ICSI妊娠率及IVF流产率/妊娠率均无显著影响。结论不同精子DFI检测方法对IVF/ICSI结局的影响不一致,统一研究对象的选择标准,对不同检测方法进行分类研究可能会得到较为可靠的结论。

生精胶囊及左卡尼汀对精子DNA断裂率顶体完整率及体外受精结局的影响

目的探讨生精胶囊及左卡尼汀对不育症患者精子DNA断裂指数(DFI)、精子顶体完整率及行体外受精结局的影响。方法选取来该中心就诊的322对不育症患者,分别用生精胶囊(A组)96例、左卡尼汀103例(B组)、生精胶囊联合左卡尼汀123例(C组)治疗3个月后行体外受精-胚胎移植,并常规检查精子顶体完整率及DFI。结果 (1)治疗后C组患者的精子DNA完整率、精子顶体完整率、受精率、优胚率均显著高于A、B两组(P<0.05);(2)三组卵裂率差异无统计学意义(P>0.05)。(3)A组精子顶体完整率、受精率、优胚率均显著高于B组(P<0.05),A、B两组精子DNA完整率差异无统计学意义(P>0.05)。(4)临床妊娠率C组>A组>B组,分别为51.2%、45.8%、39.8%(P>0.05)。结论生精胶囊治疗不育症患者精子顶体完整率、优胚率、临床妊娠率优于左卡尼汀,生精胶囊联合左卡尼汀治疗后精子DNA完整率、精子顶体完整率、受精率、优胚率、临床妊娠率均优于单独使用生精胶囊或左卡尼汀。

精子DNA损伤与不明原因复发性流产的关系

目的:探讨不明原因复发性流产与男方精子DNA损伤的关系。方法:精子DNA断裂损伤检测采用精子染色质扩散试验(sperm chromatin dispersion,SCD),以DNA断裂指数(DNA fragmentation index,DFI)表示。分别测定不明原因复发性流产(试验组,56例)男方与无流产史(对照组,31例)男方精子的DFI。结果:试验组DFI(11.0%～56.9%)高于30%的有21例(37.5%),对照组DFI(10.0%～36.8%)高于30%的有8例(25.8%)。复发性流产组的男方精子DFI均数比对照组精子DFI高(29.4%vs 25.5%),且差异显著(P<0.05)。结论:不明原因复发性流产可能与精子DNA损伤存在一定关系。

精子DNA损伤在男性不育症中的研究进展

男性不育症是现今困扰我国不孕不育夫妇的一个严重问题。目前临床上对于男性不育的筛查主要取决于精液常规的检查。但由于精液本身的易干扰性,导致其已不能对精子的受精能力及男性的生育能力进行准确的评价。近年来,精子DNA损伤作为一项新的评价精子功能的指标,逐渐成为男性不育症的研究热点。本文就精子DNA损伤的原因、机制及在男性不育症中的研究进展作一综述,为男性不育症的诊断和治疗研究提供依据。

谷胱甘肽S转移酶基因多态性与特发性男性不育精子DNA完整性相关性的研究

目的探讨谷胱甘肽S转移酶基因M1、T1及P1(GSTM1、GSTT1及GSTP1)基因多态性与特发性男性不育症患者精子DNA断裂指数(DFI)的相关性。方法选择特发性少弱精子性男性不育症患者246例。采用聚合酶链反应及聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法,分别对GSTM1、GSTT1及GSTP1基因进行分型。采用吖啶橙染色标记流式细胞仪检测精子DNA完整性,并计算DFI。结果 GSTT1基因缺失型组特发性少弱精子性男性不育症患者精子DFI显著高于野生型组(P<0.01);而GSTM1基因缺失型组与GSTP1基因突变型组患者精子DFI与野生型组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GSTT1基因缺失型与特发性男性不育症精子DFI呈正相关。

1203例不育患者的精子DFI与精液质量参数的相关性分析

目的分析不育患者精液质量、年龄与精子DNA断裂指数(DFI)的关系,探讨精子DNA损伤的机制。方法回顾性分析1 203例不育患者的精子DFI、精子浓度、活力和年龄等指标。按少、弱精子症进行分组,并进行精子DFI与精子浓度、活力的相关性分析。结果精子DFI与精子浓度无相关性,而与精子活力呈负相关(r=-0.457,P<0.05)。少、弱精子症组的DFI较正常组高,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。年龄与精子DFI呈正相关(r=0.172,P<0.05),在弱精子症组中,不同年龄组DFI值比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论精子DFI在弱精子症患者中明显升高,其升高水平与精子活力下降的程度有明显的相关性。年龄与精子DFI呈正相关。

简单的洗涤程序对高龄男性精子功能的影响

目的探讨辅助生殖技术过程中简单的精子洗涤程序对高龄男性精子功能的影响。方法选取2018年3月1日至6月1日在宁夏医科大学总医院生殖中心门诊就诊的男性不育患者68例,将其分为2组:低年龄组(20～<40岁,n=32)和高年龄组(40～50岁,n=36)。每份精液样本依据世界卫生组织标准检测精液的各项常规参数和精子功能,处理过程按照《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册(第5版)》推荐的简单洗涤程序进行操作。分别检测精液处理前2组精液体积、精子浓度、精子活力、精子正常形态率,以及处理前后精子功能指标包括[精子DNA断裂指数(DFI)、精子线粒体膜电位(MMP)及顶体反应(AR)],并进行结果的比较、分析。结果精子常规参数结果显示,高年龄组精子正常形态率低于低年龄组,差异有统计学意义(P<0.05);但2组在精液体积、精子浓度、精子活力方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2组经过简单洗涤处理后,精子DFI值均明显升高,且高年龄组升高幅度高于低年龄组;MMP值显著降低,且高年龄组的降低幅度高于低年龄组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组AR值经处理后显著降低,但2组间的降低幅度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论高龄对精液体积、精子浓度、精子活力无明显影响,但对精子正常形态率影响较大;在高龄组精子处理过程中精子的DFI、MMP变化较大,需要进一步优化处理洗涤过程,以减少对精子的负面影响。

基于SCSA乌苏里拟鲿精子保存液的使用效果

鱼类精子质量是影响人工繁殖的重要因素,雌雄性成熟不同步或需杀雄鱼取精的鱼类,为了保障其规模化繁殖,采用精子保存液将精子暂存起来,繁殖时随用随取,因此,精子保存液的保存效果又直接影响着人工繁殖。如何确定保存液中精子的质量,可以用镜检宏观判断,但这样并不精准。SCSA通过量化判断出保存液中精子的质量,从而为繁殖提供保障。自行研制的hnscz拟鲿精子保存液经SCSA分析测试,其实际应用优于购买的hanks精子保存液。测试结果为at≤0.15,精子活力旺盛,使用效果明显。