Sombati癫癎模型中程序性死亡神经元的检测

目的 :对海马神经元癫样放电后的程序性死亡神经元作定性和定量检测 ,以探讨颞叶癫患者海马神经元丢失的机制。 方法 :首先制备海马神经元癫样放电模型 ,然后采用DNA梯度电泳、Tunel标记、荧光染色以及流式细胞技术对模型中的程序性死亡神经元作定性和定量检测。 结果 :发现神经元癫样放电后出现细胞程序性死亡 ,而且随着放电时间的延长 ,程序性死亡细胞递增。 结论 :反复癫样放电的兴奋性毒性导致神经元程序性死亡 。

环氧合酶2对胰腺癌细胞凋亡的调节作用及其机制

目的 有研究提示环氧合酶 2 (COX 2 )可能参与了细胞凋亡和增殖平衡的调节过程。该文研究COX 2在胰腺癌细胞凋亡发生过程中的调节作用 ,并探讨其可能作用机制。方法 应用流式细胞术、DNA梯度电泳和透射电镜 ,观察选择性COX 2抑制剂Celebrex对胰腺癌细胞PC 3(高表达COX 2 )凋亡的影响 ,并用RT PCR研究凋亡相关基因bcl xl、bax、Survivin等表达的变化。结果 10 0 μmol/LCelebrex作用PC 3细胞 2 4h ,流式细胞术显示凋亡细胞比例显著升高 ;DNA电泳见典型梯形条带 ;透射电镜发现细胞核固缩 ,表明Celebrex可诱导PC 3细胞凋亡。RT PCR结果表明 ,Bax、bcl xl和Survivin等凋亡相关基因在PC 3细胞高表达 ,而Celebrex在诱导PC 3细胞凋亡过程中 ,bax基因的表达无明显变化 ,但bcl xl和Survivin基因的表达均显著下调。结论 COX 2对胰腺癌细胞凋亡呈负向调节作用 ,其机制可能部分通过凋亡抑制基因bcl xl和Survivin的信号传导而实现。

氨甲喋呤对映体药物对A549人肺腺癌细胞株增殖抑制作用及诱导凋亡作用

目的探讨氨甲喋呤对映体[(+)MTX,(-)MTX]对A549细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡作用。方法采用培养的A549细胞,应用MTT比色法分析其活性;用光学显微镜和荧光显微镜观察细胞的形态学变化;碘化丙啶(PI)单染流式细胞术检测细胞周期;DNA梯度电泳检测凋亡。结果在0.1～150μmol·L-1范围内,(+)MTX和(-)MTX作用于A549细胞24,48,72h,均抑制细胞A549增值,但抑制强度为(+)MTX>(-)MTX,倒置显微镜和荧光显微镜观察不同浓度(+)MTX和(-)MTX作用A549细胞不同时间后,出现细胞不同程度的形态学改变;用10μmol·L-1的(+)MTX和(-)MTX作用A549细胞48h后,PI单染流式细胞术检测A549细胞周期的影响,表明氨甲喋呤对映体干扰A549细胞DNA合成;DNA梯度电泳检测结果发现MTX作用组有凋亡条带出现,其中(+)MTX最为明显。结论 (+)MTX和(-)MTX对A549细胞的抗增殖作用具有化学结构的立体选择性,(+)MTX的抗A549细胞增殖作用明显强于(-)MTX。